Cтраница 1
Сангер и его коллега Ганс Таппи были первыми, кто расщепил полипептиды на отдельные аминокислоты и идентифицировал 21 аминокислоту, из которых состоит А-цепь, и 30 аминокислот, из которых состоит Б - цепь. Затем, чтобы определить, в какой последовательности эти аминокислоты соединяются в цепи, исследователи расщепили полйпептид не на отдельные аминокислоты, а на фрагменты, состоящие из двух или трех аминокислот. Это было достигнуто путем так называемого частичного гидролиза, при котором разрушались только наиболее слабые из пептидных связей, или обработкой его пищеварительным соком, который разрушает связи только между определенными аминокислотами, оставляя остальные нетронутыми. [1]
Сангер нашел, что свободные аминогруппы белков реагируют с 1-фтор - 2, 4-динитробензолом при слабощелочном рН и комнатной температуре. Ему удалось осуществить гидролиз динитрофенильных производных белков в условиях, при которых связи между динитрофенильной группой и аминокислотами сохраняются. [2]
Нейбергер и Сангер [1061] впервые высказали предположение о том, что одним из продуктов обмена лизина является 3-ами-новалерьяновая кислота. [3]
По данным Сангер, молекула инсулина - гормона поджелудочной железы имеет строение, схематически изображенное на стр. [4]
Так, отщепляя по одной аминокислоте с каждого конца, Сангер смог определить концевые аминокислоты для некоторых пептидов. [5]
Реакция идет с большой скоростью и отвечает общему правилу, что в процессах нуклеофильного замещения ароматические фтор-заместители более подвижны ( см. реагент Сангера), чем атомы других галогенов. [6]
Реакция идет с большой скоростью и отвечает общему правилу, что в процессах нуклеофильного замещения ароматические фтор-заместителн более подвижны ( см - реагент Сангера), чем атомы других галогенов. [7]
Впервые в истории науки была установлена полная аминокислотная последовательность в столь важном белке. За проделанную работу Сангер в 1958 году был удостоен Нобелевской премии в области химии. [8]
Соответствующее фторпроизводное, рекомендованное Сангером [132, 133], реагирует с аминокислотами в растворе бикарбоната при комнатной температуре и потому практически более удобно, Все N-динитрофенильные производные аминокислот окрашены в желтый цвет, что облегчает их идентификацию на хромато-граммах. Некоторые аминокислоты реагируют более чем с одним молем реагента; так, в реакцию с 1-фтор - 2 4-динитробензолом вступают как а -, так и со-аминогруппы лизина и орнитина, имино-азот гистидина, фенольная группа тирозина и сульфгидрильная группа цистеина. Поэтому перечисленные аминокислоты образуют бис-динитрофенильные производные. [9]
Очень часто для решения биотехнологических и некоторых других задач бывает необходимо знать полную нуклеотидную последовательность клонированного гена. Для секвенирования используют несколько методов; один из них - ди-дезокси-метод, разработанный Сангером и др. В его основе лежит остановка синтеза цепи после присоединения к ней дидезоксинуклеотида. У такого нуклеотида отсутствует З - гидроксильная группа, и дальнейший рост цепи становится невозможным. Для секвенирования в разных пробирках одновременно проводят четыре реакции синтеза ДНК, каждая - в присутствии одного из четырех дидезоксинуклеотидов. Продукты реакций разделяют с помощью гель-электрофореза, проводят радиоавтографию и считывают с радиоавтографа нуклеотидную последовательность синтезированного фрагмента ДНК. [10]
Сангер впервые употребляет понятие контроль над рождаемостью, которое вначале имело смысл пропаганды использования средств контрацепции, а несколько позднее стало рассматриваться также и в контексте евгенических идей. [11]
Определение числа и природы С - и N-концевых аминокислотных остатков позволило добиться существенных успехов в выяснении структуры некоторых белков. Более короткая цепь ( по обозначению Сангера - пептид А) имеет N-концевой остаток глицина и С-концевой остаток аспарагина. В более длинной цепи ( пептид В) N-концевой аминокислотой оказался фенил-аланин, а на С-конце цепи находится аланин. [12]
Обработка инсулина динитрофенолом показала, что этот белок содержит две различные N-концевые аминокислоты, на основании чего можно было сделать вывод, что состоит он из двух полипептидных цепей. Цепи соединяются между собой молекулами цистина. Обработав инсулин реактивом, который раз-ру Шает связь между двумя атомами серы в цистине, Сангер расщепил молекулу инсулина на две отдельные полипептидные цепи. [13]