Cтраница 2
Использование растворов солей для элюирования выделяемых веществ с сорбентов в гидрофобной хроматографии рассмотрено в разд. Иеннисен и Хейлмейер [20] показали, что элюирующая способность анионов соответствует их расположению в ряду Гофмейстера и элюирующая способность катионов обратна их высаливающему или всаливающему действию. Соли способны проникать непосредственно между белком и гидрофобной поверхностью сорбента, что приводит к десорбции белка. Если за адсорбцию ответственны ионные взаимодействия, то элюирование белков должно зависеть от ионной силы раствора, но не от природы и типов используемых солей. [16]
Разнообразие условий выделения обусловлено природой выделяемых веществ. Хотя иногда вещество в гомогенном виде выделялось из сырого материала с помощью только хроматографии, значительно чаще встречаются случаи, когда для очистки необходима комбинация аффинной хроматографии с другими методами. Принципы, обязательные для успешной очистки и выделения вещества, в общем виде детально рассмотрены в гл. Для того чтобы читателя информировать об индивидуальных аффинных лигандах, которые были использованы, или о промышленно выпускаемых иммобилизованных аффинных лигандах, во всех случаях приведены коммерческие названия, если они были опубликованы. Эти иммобилизованные лиганды приведены в табл. 11.2, где указаны также их химическая природа и фирма-изготовитель. [17]
При большой разнице в температурах кипения выделяемого вещества и растворителя последний может быть впоследствии легко выделен обычной или вакуумной перегонкой. Этот метод применяется главным образом в полупрепаративном масштабе, когда необходимо получить раствор исследуемого вещества для последующей спектроскопической идентификации. [18]
При использовании жидкостей, понижающих растворимость выделяемого вещества, следует, однако, помнить, что нельзя добавлять слишком большое количество жидкости осадителя, так как это может привести к выделению из раствора и примесей. [19]
Бортовые отсосы неприменимы при высоких температурах выделяемых веществ и значительной летучести жидкости, так как скорость движения этих веществ вверх будет значительно выше скорости отсоса. [20]
При большой разнице в температурах кипения выделяемого вещества и растворителя последний может быть впоследствии легко выделен обычной или вакуумной перегонкой. Этот метод применяется главным образом в полупрепаративном масштабе, когда необходимо получить раствор исследуемого вещества для последующей спектроскопической идентификации. [21]
Экстракционные методы весьма экономичны, так как выделяемое вещество обычно легко извлекается из органической фазы, а экстрагент легко регенерировать. [22]
Таким образом, в зависимости от природы выделяемых веществ должно подбираться соотношение между количествами компонентов подвижной фазы ( водяного пара и органического элюата), обеспечивающее необходимое концентрирование выделяемых веществ. Если сорбат хорошо растворим в воде, то концентрация водяного пара в смешанном элю-енте должна быть невелика и, наоборот, если сорбат хорошо растворяется в органической фазе, то водяной пар должен составлять основную часть элюента. [23]
В колоночной аффинной хроматографии достаточно сильное взаимодействие выделяемых веществ с иммобилизованным аффинным лигандом приводит к концентрированию вещества и его медленной миграции вниз по колонке. Этот процесс зависит от концентрации лиганда и почти не зависит от начальной концентрации свободных макромолекул. [24]
Иногда на свежеприготовленном сорбенте теряется заметная часть выделяемого вещества из-за необратимой сорбции, которая при повторном использовании сорбента уже не проявляется. Места такой сорбции следует насытить, пропуская через сорбент 10-кратное против расчетного количество неочищенного вещества и элюируя выбранным для работы способом все, что удается: люировать. [25]
Прежде всего экстрагенты должны обладать хорошей способностью извлекать выделяемое вещество или группу веществ. Экстрагент должен отличаться малой растворимостью в воде, и вода, с другой стороны, должна мало растворяться в экстрагенте. [27]
Эта же условность присуща осадительной флотации, когда выделяемое вещество образует мелкодисперсный или коллоидный осадок в результате взаимодействия с поверхностно-активным веществом или осадителем. По этой причине в книгу включены результаты работ по выделению коллоидных частиц и микроорганизмов. [28]
Верхняя концентрационная граница метода, использующего химическое взаимодействие выделяемых веществ и поверхностно-активного вещества, определяется либо чисто экономическими соображениями, либо тем, что с повышением концентрации - особенно катионов тяжелых металлов - изменяется характер процесса. При больших концентрациях катионов анионные поверхностно-активные вещества начинают выступать в роли осадителей и процесс принимает характер флотации осадков. [29]
В зависимости от того, в каком виде находится выделяемое вещество, его можно экстрагировать как из смеси твердых веществ, так и из растворов. [30]