Cтраница 2
Различие между белками этих двух штаммов состоит в том, что у подорожникового штамма белок содержит метионин и гистидин, отсутствующие в белке нормального штамма. Вирусы эти различаются по своим иммунологическим свойствам. Оказалось, что - гибридный вирус вызывает заболевание, характерное для подорожникового штамма, но по иммунологическим свойствам напоминает обычный штамм. Потомство же гибридного вируса содержит метионин и гистидин, подобно белку подорожникового штамма, из которого первоначально была получена нуклеиновая кислота вируса, и в отличие от белка гибрида, использованного в качестве инокулума. Эти результаты доказывают, что генетические особенности вируса определяются его РНК, но не его белком. [16]
Примеры специализированных систем общей рекомбинации можно найти у паразитов, которые с их помощью борятся с иммунной системой организмов-хозяев. Экспрессируются лишь те гены, которые находятся в локусах, называемых рИЕ, они и определяют, какой пилин представлен на поверхности клеток. Таким способом гонококки сравнительно часто меняют иммунологические свойства пилей и не позволяют развиться эффективному иммунному ответу. [17]
В принципе возможен систематический анализ любой системы иммуноглобулин - лиганд. Используя аффинную хроматографию, получаемые антитела затем очищаются. Эти антитела отличаются константами сродства к лиганду, что проявляется также в химических, спектральных и иммунологических свойствах центров связывания. На первый взгляд кажется, что вырожденный ответ должен усложнить пространственную организацию центров связывания. В действительности, однако, в этом случае возможно объединить и взаимно контролировать данные по нескольким центрам связывания, что заметно увеличивает вероятность нахождения правильных моделей. [18]
Различие между белками этих двух штаммов состоит в том, что у подорожникового штамма белок содержит метионин и гистидин, отсутствующие в белке нормального штамма. Вирусы эти различаются по своим иммунологическим свойствам. Оказалось, что - гибридный вирус вызывает заболевание, характерное для подорожникового штамма, но по иммунологическим свойствам напоминает обычный штамм. Потомство же гибридного вируса содержит метионин и гистидин, подобно белку подорожникового штамма, из которого первоначально была получена нуклеиновая кислота вируса, и в отличие от белка гибрида, использованного в качестве инокулума. Эти результаты доказывают, что генетические особенности вируса определяются его РНК, но не его белком. [19]
Иммунологическая природа этого коллоидно-химического явления была раскрыта лишь спустя несколько десятилетий. На основе реакции преципитации в геле был разработан ряд новых методов исследования, которые не только позволили охарактеризовать иммунологические свойства белков, но и открыли новые перспективы их углубленного анализа. [20]
В иммуноферментном анализе используются поли - и моноклональ-ные антитела как по отдельности, так и вместе. Относительная легкость получения поликлональных антител из антисывороток иммунизированных животных в ряде случаев дает возможность пренебречь их гетерогенностью. Однако разработка метода получения монокло-нальных антител - продуктов гибридных клеток - дала им огромные преимущества в иммунохимическом анализе в связи с уникальными свойствами, выгодно отличающими их от антисывороток. Использование моноклональных антител в иммуноферментном анализе дает возможность работать с практически неограниченным источником антител, однородных по молекулярным и иммунологическим свойствам. [21]
Таким образом, результаты этих опытов показывают, что конформация молекулы, обусловливающая ее ферментативную активность, полностью определяется последовательностью аминокислот в полипептидной цепи. Для того чтобы остатки ци-стеина соединились правильно, не нужно никакого специального фермента. Образование специфических дисульфидных связей требуется, по-видимому, лишь для стабилизации активной кон-формации, а не для ее возникновения. В результате восстановления и последующего окисления рибонуклеазы образуется продукт, имеющий ту же ферментативную активность, ультрафиолетовый спектр, характеристическую вязкость, дисперсию оптического вращения и те же иммунологические свойства, что и нативный фермент. Пептидные карты, получаемые после ферментативного расщепления этих двух веществ, также идентичны. Если бы расположение дисульфидных связей в нативной и реконструированной рибонуклеазе было различным, пептиды, содержащие такие связи, не могли бы попасть на одинаковые места карты. [22]
Комплексы сывороточных белков с другими веществами белковой природы могут быть также выделены с помощью гель-хроматографии, как это было уже показано на примере комплекса гемоглобин - гапто-глобин ( фиг. В предыдущем разделе на примере инсулина были рассмотрены возможности изучения растворимых иммунокомплек-сов. Иммунологические методы в сочетании с гель-фильтрацией играют важную роль в исследовании строения у-глобулинов. Среди работ на эту тему ( см. литературу, приложение X) имеются блестящие исследования, посвященные восстановительному расщеплению и выделению L - и Н - цепей, их рекомбинации, ограниченному действию папаина и, наконец, иммунологическим свойствам интактного белка и его фрагментов. [23]
Для выяснения полного строения гликопротеина нужно решить три основные задачи: 1) установить сбщий тип построения гликопротеина ( архитектонику гликопротеина); 2) установить природу связи между пептидными и полисахаридными цепями; 3) установить мономерную последовательность в пептидных и полисахаридных цепях. Решение каждой из этих проблем требует особых подходов, хотя, естественно, эти проблемы неотделимы и часто решаются одновременно. Для изучения связи биологической функции гликопротеина с его строением особенно важно выяснение структуры тех фрагментов биополимера, которые ответственны за его специфичность. Эти группировки являются чаще всего олигосахаридными цепями. Для гликопротеинов, обладающих иммунологическими свойствами, они носят обычно название иммунологических или антигенных детерминантов. [24]
Пока нет ясности, идентичны ли химически вновь синтезированные внесинаптические рецепторы субсинаптическим. Некоторые данные свидетельствуют против этого. Кинетические данные для соответствующих ионных каналов также отличаются: после активации агонистами каналы денервнрованных мышц остаются открытыми в - 3 раза дольше, чем каналы иннервированных мышц. Однако они обладают только 1 / 3 проводимости последних. В то же время их сродство к лигандам и иммунологические свойства практически одинаковы. Кураре и а-бунгаротоксин ингибируют активацию. Возможно, оба типа рецепторов кодируются одними генами, но при переходе в мембрану по-рязному модифицируются посттрансляциоино. Как раз этот аспект и делает денервацию и связанную с ней гиперсенсибилизацию такими интересными. Что приводит к исчезновению внесинаптического рецептора при онтогенезе и к субсинаптической агрегации. Полагают, что это связано с молекулярным механизмом синаптического сопряжения между клетками в период эмбрионального развития и является моделью регуляции процессов обучаемости и поведения. [25]
Алкилирующие средства независимо от их химического происхождения отличаются тем, что благодаря содержанию в них реакционноспособных функциональных групп значительно нарушают процесс деления клеток. Речь идет об азотистом иприте, который в последующие годы дал начало большому числу синтетических цитостатических средств. С начала 50 - х годов начался синтез производных азотистого иприта, содержащих фосфорил. В то время как ранее синтезированные ациклические соединения не обладали цитостатическим действием, создание циклофосфамидов позволило к концу 50 - х годов совершить большой прыжок. Эти вещества активируются только в организме, прежде всего в печени и при поступлении кислорода. Они обладают широким спектром применения и оказывают некоторое действие даже на прогрессирующей стадии развития раковых опухолей. Но, к сожалению, новейшие соединения этого типа все еще сильно нарушают иммунологические свойства организма. [26]