Ионообменный сефадекс

Cтраница 2

Зависимость скорости течения элюента ( и от гидравлического напора ( h / L для ионообменных сефадексов Размеры колонки 2 5 X 45 эпюент - 0 1 М NaCl. [16]

Отсюда можно сделать два практически важных вывода. Во-первых, колонки, заполненные крупнопористыми ионообменными се-фадексами, должны быть с самого начала уравновешены элюентом, содержащим не менее 0 1 М NaCl, иначе в ходе элюции с увеличением концентрации соли их объем ( высота набивки) может уменьшиться в 2 - 3 раза, что приведет к существенному ухудшению разрешения пиков. Вместо этого увеличивающиеся в объеме гранулы будут деформироваться, утрачивать сферическую форму и заполнять свободные промежутки между ними - протекание элюента по колонке резко затруднится. Для регенерации ионообменных сефадексов типов А-50 и С-50 после элюции с увеличением концентрации соли колонки приходится опорожнять и обменники промывать декантацией в свободном объеме. [17]

Выбор типа обменника целесообразно начать с его пористости. Для низкомолекулярных соединений ( аминокислот, нуклеотидов, коротких пептидов и олигонуклеотидов) удобно использовать ионообменные смолы на основе полистирола. Для особо тонких случаев фракционирования, когда размеры гранул ( и особенно их разброс) желательно свести до минимума, выбирают обменник типа Amdnex. Для более крупных полипептидов и полинуклеотидов с молекулярной массой менее 10 000 можно использовать ионообменные сефа-дексы типов А-25 и С-25. Для фракционирования и очистки белков имеется большой выбор крупнопористых обменников: ионообменные целлюлозы, сефадексы типов А-50 и С-50 ( для М 100 000), ионообмеиники на основе агарозы, обменники типа DEAE-TrisacrylM, CM-Trisacryl M и Spheron. Фракционирование и очистку особо крупных молекулярных агрегатов и вирусов с молекулярной массой более 4 - Ю6 приходится вести на поверхности гранул, для чего можно использовать ионообменные сефадексы типов А-25 и С-25 или даже смолы. [18]

Страницы: 1 2