Сложная смесь - липид
Cтраница 1
Сложные смеси липидов предварительно разделяют методом адсорбционной ХТС на силикагеле Г на классы соединений, например холестериновые эфиры, триглицериды, кислоты. [1]
Сложные смеси липидов обычно вначале разделяют на классы. Среди многочисленных вариантов наиболее часто используют три метода. Обзор этого метода был сделан в работе [2] и детально рассмотрен в обзоре [15], в котором дано сравнение этого метода с методами других авторов, использовавших колонки с силикагелем. [2]
Сложные смеси липидов предварительно разделяют методом адсорбционной ХТС на силикаееле Г на классы соединений, например холестериновые эфиры, триглицерйды, кислоты. [3]
Все животные и растительные ткани содержат такие сложные смеси липидов, что выделить и идентифицировать все компоненты этих смесей каким-либо одним аналитическим методом практически невозможно, и достичь этой цели можно, только объединяя несколько методов. Предварительное разделение липидов на группы, состоящие из соединений двух или трех хорошо охарактеризованных классов, облегчает последующее разделение смеси на индивидуальные компоненты. Этот прием сейчас широко используется в тех случаях, когда исследователь располагает достаточным запасом времени и достаточным для проведения такого последовательного анализа количеством вещества. В настоящее время существует несколько очень хороших систем, включающих колоночную и тонкослойную хроматографию, которые позволяют выполнить этот анализ. [4]
Наиболее эффективным и широко применяемым методом фракционирования сложных смесей липидов является хроматография. Главную роль при аналитическом фракционировании играет адсорбционная хроматография в тонком слое сорбента. Если масса липидов превышает 300 мг, используют колоночную хроматографию, хотя по разделяющей способности и времени разделения этот метод часто уступает тонкослойной и газовой хроматографии. Однократного хроматографирования обычно бывает недостаточно для выделения индивидуальных веществ, в евязи с этим полученные фракции подвергают препаративной тонкослойной хроматографии или колоночной хроматографии другого типа. При колоночной хроматографии липидов используют не только принцип адсорбции, но и принцип распределения между двумя несмеши-вающимися жидкостями, гель-фильтрации, ионного обмена. [5]
Мид и Филрап [20, 88, 89], а также Хирш и Арене [34] описали тщательно разработанную методику адсорбционнохроматографического разделения сложных смесей липидов на колонках с силикагелем при использовании этих двух растворителей. [6]
Поэтому необходимо разрабатывать в ближайшем будущем аналитические системы, включающие несколько взаимно дополняющих друг друга методов. Это, по-видимому, будут системы, объединяющие ГЖХ или ВЭЖХ с масс-спектрометрией, поскольку каждый из указанных хрома-тографических методов в отдельности не в состоянии справиться с задачей идентификации и количественной оценки при анализе сложных смесей липидов. [7]
Добавляя к составным растворителям три-метилборат, они практически исключили возможность взаимных превращений 1 2 - и 1 3-дипальмитинов и, возможно, 1 - и 2-моноглицеридов, которые обычно происходят при разделении на силикагеле G. Кроме того, с помощью метода Поллака и сотрудников можно разделять сложные смеси липидов, содержащие нейтральные липиды, глико - и фосфолипиды. После этого пластинки поворачивают на 90 для элюирования во втором направлении смесью бензол-этилацетат-триметилборат ( 100: 20: 7 2) при такой же длине пути элюирования. [8]
Применение метода обращенной фазы предполагает, что анализируемые винилогомологи совершенно не содержат веществ других классов соединений. Поэтому последовательное применение адсорбционной и распределительной ХТС с обращенной фазой является идеальной комбинацией при разделении сложных смесей липидов: группы соединений, не отделяющиеся друг от друга адсорбционной ХТС, разделяются затем методом распределительной хроматографии. Газовая хроматография служит для определения состава жирных кислот из липидов, выделяемых методом адсорбционной и распределительной ХТС с обращенной фазой. [9]
Применение метода обращенной фазы предполагает, что анализируемые винилогомологи совершенно не содержат веществ других классов соединений. Поэтому последовательное применение адсорбционной и распределительной ХТС с обращенной фазой является идеальной комбинацией при разделении сложных смесей липидов: группы соединений, не отделяющиеся друг от друга адсорбционной ХТС, разделяются затем методом распределительной хроматографии. Газовая хроматография служит для определения состава жирных кислот из липидов, выделяемых методом адсорбционной и распределительной ХТС с обращенной фазой. [10]
 |
Разделение нейтральных липидов и продуктов их гидролиза методом адсорбционной ХТС на силикагеле Г. [11] |
Чаще других сорбентов для фракционирования липидов применяют силикагель. Врен [145] описал свойства и преимущества этого сорбента. На пластинке размером 20 X 20 см с нанесенным на нее силикаге-лем Г можно разделить 10 - 20 м сложной смеси липидов. При необходимости фракционирования лишь небольшого числа веществ, сильно отличакъ щихся по полярности, можно наносить на стандартную пласгинку до 50 м & вещества. Для разделения методомЖГС можно также использовать флорисил - синтетический силикат Магния, часто применяемый в колоночной хроматографии аилйдовк. Весьма подходящим адсорбентом для липидов является также вторичный фосфат магния ( см. стр. [12]
 |
Разделение нейтральных липидов и продуктов их гидролиза методом адсорбционной ХТС на силикагеле Г. [13] |
Чаще других сорбентов для фракционирования липидов применяют силикагель. Врен [145] описал свойства и преимущества этого сорбента. На пластинке размером 20 X 20 см с нанесенным на нее силикаге-лем Г можно разделить 10 - 20 мг сложной смеси липидов. При необходимости фракционирования лишь небольшого числа веществ, сильно отличающихся по полярности, можно наносить на стандартную пластинку до 50 мк вещества. Весьма подходящим адсорбентом для липидов является также вторичный фосфат магния ( см. стр. [14]
Страницы: 1