Cтраница 1
Содержание неорганического фосфата очень низко, так что неорганический фосфат, возможно, является ограничивающим фактором для тех метаболических реакций, которые требуют участия фосфатов. Биосинтез фитиновой кислоты в развивающихся семенах изучен слабо. [1]
В клинике при исследовании крови различают следующие фракции фосфора: общий фосфат, кислоторастворимый фосфат, липоидный фосфат и неорганический фосфат. Для клинических целей чаще определяют содержание неорганического фосфата в плазме ( сыворотке) крови. [2]
Учитывая также важную роль этих ионов в поддержании структуры хроматина и их кофакторную функцию в действии эндонуклеаз и фосфоли-пазы митохондрий, изменения в их содержании после облучения могут оказаться критическими для клеток. В цитоплазме облученных тимоцитов резко понижено содержание неорганического фосфата, что связывается с его оттоком в митохондрии в виде фосфата кальция. Предполагают, что создающийся таким образом дефицит ионов Са вызывает изменение проницаемости и дестабилизацию мембраны. Однако при этом нарушается структура хроматина. [3]
Другое возможное объяснение заключается в том, что эффект Пастера вызывается конкуренцией между гликолизом и окислительным фосфорилированием. В аэробных условиях фосфорилирование в дыхательной цепи снижает содержание неорганического фосфата до такого уровня, при котором окисление триозофосфата ограниченно. [4]
Механизм действия витамина D остается еще неясным. При D-авитами-нозе, по-видимому, не столько нарушается всасывание фосфорнокислых солей из кишечника, сколько депонирование фосфорнокислого кальция в костной ткани; особенно характерно снижение содержания неорганического фосфата в крови. [5]
Один весьма удачный метод определения органических фосфатов состоит в том, что пестицид, в котором содержится такой фосфат, в очищенном экстракте окисляют до неорганического фосфата с помощью дымящей азотной и хлорной кислот. Общий метод очистки, приведенный в данной главе, вполне применил. Затем содержание неорганического фосфата определяют с помощью обычной цветной реакции образования молибденовой сини. [6]
Затем осторожно, избегая образования пузырьков воздуха, в пробирки вносят по 0 1мл сыворотки крови и полученную фермент-субстратную смесь инкубируют в течение 1 ч при 37 С. Время термостатирования опытных проб используют для определения содержания неорганического фосфата в контрольных пробах. Для этого в центрифужные пробирки с надписью Кщ и Кк вносят соответственно по 1 мл щелочного или кислого раствора р-глицерофосфата, приливают по 1 1 мл раствора ТХУ, после чего добавляют по 0 1 мл той же сыворотки крови. Пробы перемешивают и через 5 мин центрифугируют в течение 10 мин при 3000 об / мин. Затем отбирают по 1 5 мл центрифугата и переносят в обычные пробирки с соответствующей маркировкой ( Кщ и Кк), прибавляют по 1 мл молибденового раствора, 1 мл раствора аскорбиновой кислоты, перемешивают. Пробы выдерживают 10 мин при комнатной температуре, после чего их колориметрируют при красном светофильтре в кюветах шириной 5 мм. В качестве контрольной пробы используют дистиллированную воду. К опытным пробам после инкубации в термостате добавляют по 1 1 мл раствора ТХУ, перемешивают. Далее обрабатывают и колориметрируют, как контрольные пробы. [7]
При наличии в исследуемой воде неорганических фосфатов перед анализом пробы находят их содержание. Для этого 10 мл анализируемого раствора вносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, приливают 4 мл реактивного раствора, доводят раствор до метки водой и перемешивают. Через 10 мин измеряют оптическую плотность при Я 720 нм и по градуировочному графику находят содержание неорганических фосфатов в анализируемой пробе. [8]
К 1 мл фильтра добавляют 1 0 мл воды, 0 4 мл молибденового реактива и 0 1 мл, рабочего раствора эйконогена, хорошо перемешивают и оставляют на 10 мин в термостате при 37 С. Раствор быстро охлаждают и тотчас же колори-метрируют на ФЭКе. Одновременно строят калибровочный график по стандартным растворам фосфата, содержащим от 0 2 до 2 мкмоль фосфата в пробе ( с. По разности содержания неорганического фосфата в пробах после ферментативного гидролиза и в контрольной пробе рассчитывают количество фосфата, образовавшегося в процессе ферментативного расщепления АТФ. Затем рассчитывают активность миозина - в мкмолях превращенного субстрата за 1 мин на 1 мг белка. [9]