Cтраница 4
Вычисленные константы не являются термодинамическими константами рКа поскольку они учитывают концентрации ионной и нейтральной форм вещества, а не их активности. В ряде случаев, когда исследователя интересуют константы основности при сравнении серии соединений, имеющих родственную структуру, можно ограничиться полученными спектрофотометрически константами равновесия. Если необходимо знать термодинамические константы, вносят поправку, которая зависит от ионной силы растворов. Эти поправки, как правило, незначительны, за исключением тех случаев, когда определяются вторые константы ионизации или используются поливалентные буферные соли. [46]
В этом случае исследуемое вещество присутствует в очень большом разбавлении, и поэтому могло бы показаться, что полученные спектрофотометрическим способом р / Са являются тер-нединамическими. Однако из-за присутствия буферных солей такое положение бывает очень редко. Таким образом, и в этом слу чае мы получаем К %, а не Кта. Концентрация, которая используется при расчете поправок на активность, равна концентрации буферных солей ( обычно 0 01 М); расчеты проводятся так, как уже было указано выше. [47]
Несколько капель водного раствора высушивают в катодах из нержавеющей стали, которые затем прокаливают при 300 - 350 С для полного удаления воды. В раствор вводят буферную соль ( для разряда при 80 ма - MgSO4, при 120 ма - LiaSOi) в количестве, превосходящем в 20 - 30 раз количество определяемых элементов. Ее роль сводится к образованию более однородного осадка на поверхности катода и предотвращению слишком быстрого выхода анализируемого элемента из полости. Таким образом определяют 2 - 10 5 % РЬ; ЫО-5 % Си, В. Элементы, гидролизующиеся в водных растворах, анализируют в графитовых катодах, которые пропитывают погружением в 2 мл анализируемого раствора без добавления буферной соли. Указанные пределы обнаружения всех перечисленных элементов по данным [1138] могут быть улучшены. [48]
Восходящая и нисходящая части электрофореграммы не симметричны. Границы обычно острее на восходящей стороне. Не совпадают также и площади под соответствующими пиками. Причина этих явлений понятна из рассмотренного выше примера. Очевидно, что определение состава белковой смеси по электро-фореграмме будет неточным, так как на границах меняется одновременно концентрация всех компонентов, включая концентрацию буферных солей, и каждый из них вносит вклад в изменение показателя преломления на границе. Очевидно также, что точно определить подвижность можно в общем случае только для самого быстрого компонента смеси на нисходящей стороне, подставив в уравнение ( 9) значение электропроводности исходного белкового раствора. Все остальные подвижности можно определить лишь приблизительно, так как электропроводность раствора в областях между границами точно не известна. [49]