Cтраница 1
Состав элюента в жидкостной хроматографии имеет решающее значение. Проводя элюирование смесями различного состава, можно за короткое время элюировать из колонки в виде острых хорошо разделенных пиков не только легко элюируемые выбранным элюен-том соединения, но и те компоненты пробы, которые таким элюен-том постоянного состава элюировались бы с трудом. Градиентное элюирование позволяет значительно сократить продолжительность анализа и существенно улучшить его чувствительность. Разумеется, разрешение в большинстве случаев становится хуже. Все эти вопросы подробно обсуждаются в разд. [1]
Состав элюента, вытекающего из колонки, непрерывно контролируют детектором. К сожалению, для жидкостной хроматографии пока не разработано специального универсального детектора. Для каждой системы проба - элюент следует выбирать подходящий детектор. По этой причине в каждом хроматографе должно быть по крайней мере два различных детектора. [2]
Состав элюента остается постоянным, меняется только активность адсорбента в колонке. [3]
Изменение состава элюента в различной степени влияет на разные механизмы удерживания, поэтому для получения прогнозируемых и воспроизводимых хроматографических результатов необходимы данные об этих механизмах, их относительной роли, а также о влиянии на них состава подвижной фазы. [4]
Если в состав элюента входит какой-либо спирт, то не исключена возможность переэтерификации эфиров порфиринкарбоно -: вых кислот в ходе их разделения. Этого можно избежать путем добавления в систему растворителей того же самого спирта, остаток которого присутствует в сложноэфирных группах хрома-тографируемых соединений. [5]
![]() |
Хроматограмма сложной смеси, разделенной ступенчатым элюирова.| Разделение методом градиентного элюирования. [6] |
Постепенно менять состав элюента удобно, смешивая растворитель б с растворителем а в сообщающихся цилиндрических сосудах. [7]
Соль в составе элюента в момент посадки препарата на обменник может быть необходима для растворимости биополимера или сохранения его нативности, однако чаще всего ее вводят изначально для предотвращения слишком прочной сорбции исходного препарата. Обычно для обменников на основе целлюлозы исходная солевая концентрация должна быть около 0 01 М, для ионообменных сефадек-сов - на порядок выше. [8]
![]() |
Различные типы хроматографии на клиновидном слое. [9] |
При градиентном элюировании состав элюента меняют непрерывно или ступенчато. Раствор гомогенизуют перемешиванием магнитной мешалкой, а полоска фильтровальной бумаги, закрепленная на нижнем ( погруженном в растворитель) краю пластинки с помощью резиновой ленты, предотвращает механическое размывание слоя при перемешивании. Растворитель добавляют в камеру с помощью бюретки или дозирующего насоса. Объем поддерживается постоянным, так как избыток жидкости выливается. [10]
Пов-сть сорбента и состав элюента подбирают так, чтобы исключить или уменьшить энергию адсорбц. [11]
Как правило, состав элюента нужно выбирать с таким расчетом, чтобы коэффициент разделения, равный отношению коэффициентов распределения, достигал высоких значений. Следует, однако, отметить, что на практике оптимальный состав элюента не всегда совпадает с составом, соответствующим максимальному значению коэффициента разделения. При этом время, требуемое для разделения, даже увеличивается ( ср. Поэтому желательно использовать такой элюент, который дает высокий коэффициент разделения, но не слишком высокие коэффициенты распределения. Такое компромиссное решение удается найти достаточно часто. Иногда удобно последовательно применять несколько элюентов с возрастающей элю-ирующей способностью ( ступенчатое элюирование), чтобы более прочно удерживаемые ионы элюировались по возможности малыми объемами раствора. [12]
![]() |
Скорости элюирования в ионообменной хроматографии. [13] |
При градиентном элюировании состав элюента непрерывно меняется ( см. разд. [14]
В ЖАХ подбором состава элюента можно создать условия, когда дисперсионное взаимодействие вещество - данный адсорбент практически не будет влиять на удерживание. В этом случае, например, гомологи не будут разделяться и возможно только групповое разделение веществ по классам. [15]