Cтраница 1
Сочетание электрофореза и хроматографии является весьма чАгЬективным для разделения сложных смесей веществ. [1]
![]() |
Анализ примесей методом вырезания части хроматографической порции на выходе из колонки. [2] |
Сочетание электрофореза с ТСХ существенно расширяет возможности хроматографического разделения смесей, особенно неорганических ионов. В этом случае разделение может быть обусловлено различием устойчивости комплексных соединений, образующихся при взаимодействии ионов с электролитом, необходимым для создания токопроводящей среды. Для ионов щелочных металлов разделение обусловлено неодинаковой степенью ассоциации этих ионов с анионами электролита. [3]
Решающим при сочетании электрофореза с ТСХ является правильный выбор электролита, которым предварительно пропитывают тонкий слой сорбента. Обычно для разделения смесей ионов щелочных металлов в качестве электролита применяют буферный раствор NH4C1 HC1 ( рН 2 18), 3 5 - 10 3 М раствор паравольфра-мата аммония или 0 001 - 0 1 М раствор нитрата аммония. Для анализа щелочноземельных металлов применяют 0 15 М раствор-лимонной кислоты, для анализа тяжелых металлов - 0 05 М раствор NaOH, 0 1 М раствор НС1 или 0 1 М раствор а-оксиизомас-ляной кислоты. Редкоземельные элементы анализируют на фоне 0 2 - 0 8 М раствора а-оксиизомасляной кислоты. [4]
Иммуноэлектрофорез представляет собой сочетание электрофореза с реакцией преципитации. Сначала проводят электрофорез белков в тонком слое геля. [5]
Высокоэффективным методом разделения является сочетание электрофореза на бумаге с обычной хроматографией. При этом сначала через влажную бумагу, на которую нанесена смесь, пропускают ток высокого напряжения, а затем смесь хроматогра-фируют с помощью подходящего растворителя в направлении, перпендикулярном направлению электрофореза. В результате достигается разделение первоначальной смеси в двух измерениях. Применение такого метода к продуктам ферментативного расщепления белков позволяет получить двухмерную картину, которую называют пептидной картой. Каждый белок дает характерную для него при каждом конкретном способе расщепления картину. Локализацию отдельных компонентов во многих случаях определяют с помощью специфических красителей. При определении аминокислот и пептидов в качестве такого красителя используют, например, нингидрин. Если производится элюция адсорбированных компонентов, то удобнее всего устанавливать их присутствие в элюате спектрофотометрически. Вероятно, наиболее тонким методом разделения белков следует считать имму-ноэлектрофорез, при котором эффект достигается за счет использования различий в двух свойствах: электрофоретической подвижности и иммунологической специфичности. [6]
![]() |
Прибор Тизелиуса для электрофореза. [7] |
Более прост экспериментальный метод, представляющий собой сочетание электрофореза с хроматографией. [8]
Более прост экспериментальный метод, представляющий собой сочетание электрофореза с хроматографией. Он назван зональным электрофорезом. В нем одновременно используются различие зарядов и различие сорбционной активности разделяемых веществ. [9]
Одномерный или двухмерный электрофорез в сочетании с хроматографией на бумаге является наиболее эффективным из известных методов изучения сложной смеси небольших количеств пептидов. Чтобы проиллюстрировать, насколько широк тот круг вопросов, изучение которых осуществляется сочетанием электрофореза и хроматографии, ниже кратко изложены некоторые методики, разработанные в ходе подобных исследований. [10]
Методы электрофоретиче-ского разделения основаны на различной подвижности заряженных частиц в электрическом поле. Из различных методов для исследования красителей наиболее приемлем электрофорез на бумаге. При анализе очень сложных смесей необходимо сочетание электрофореза с хроматографией. [11]
Заряженные частицы, движущиеся в электрическом поле, могут участвовать одновременно в процессе миграции и в адсорбционных или ионообменных взаимодействиях с носителем буферного раствора, поэтому возможно сочетание двух различных механизмов разделения действующих в противоположных направлениях. Подобные варианты повышают факторы разделения близких по свойствам элементов что было показано ранее в работах [1-3] на примере использования в качестве носителя бумаги, которой путем специальной обработки придавались ионообменные свойства. С целью повышения избирательности разделения нами была предпринята попытка сочетания электрофореза с экстракцией. [12]