Флуоресцентная спектроскопия
Cтраница 2
Несмотря на то что эта интенсивность мала, чувствительность метода значительно выше, чем при измерении поглощения света. Таким образом, флуоресцентная спектроскопия относится к числу Важных аналитических методов ( см., например, гл. [16]
При анализе фенолов в концентрациях до 4 - 10 - 5 % Волькоф и Лароз [2 ] предложили добавлять в хроматографическую систему сульфат церия ( IV), который взаимодействует с фенолами в элюенте. Образующийся Се ( Ш) определяют с помощью флуоресцентной спектроскопии. [17]
В настоящей статье рассмотрены некоторые возможности анализа состава естественных водных сред оптическими методами. Современная оптика располагает достаточно большим арсеналом спектроскопических методов, причем наибольшие возможности представляют флуоресцентная спектроскопия и спектроскопия комбинационного рассеяния. [18]
Для каталитической активности имеют значение остатки гистидина метионина и триптофана, расположенные на поверхности фермента. В процессе переноса фосфата происходят конформационные изменения белка, что было обнаружено методом флуоресцентной спектроскопии. [19]
Важная роль, которую играют лазеры в аналитической химии, связана с высокой монохроматичностью и большой интенсивностью излучения. Среди прочего следует упомянуть об использовании лазера в качестве источника локального нагрева поверхности и источника возбуждения в рамановской и флуоресцентной спектроскопии. [21]
Представляется целесообразным применение комбинированных методов с использованием лазеров как атомизаторов, так и источников излучения, например в атомно-абсорбционной или флуоресцентной спектроскопии ( см. также гл. [22]
Примеры использования природной флуоресценции полипептидов для описания их конформационного поведения приведены в предыдущих разделах. В развитие этого подхода предложено вводить ковалентно связанные информирующие группы ( флуорофо-ры [64, 65] или спиновые метки [66] - группировки, содержащие локализованные неспаренные электроны), что позволяет исследовать соседние с этими группами участки с помощью флуоресцентной спектроскопии и электронного парамагнитного резонанса ( ЭПР), соответственно. [23]
В ряду энергоемких производных этиленгликоля стабильным оказался бис ( адамантилиден) - 1 2-диоксетан ( БАДЕ), разложение которого с образованием адамантанона сопровождается испусканием света. При комнатной температуре БАДЕ стабилен; при температуре 164 С он плавится и разлагается ( выделяется энергия порядка 250 - 400 кДж / моль) с испусканием света, что позволяет следить за процессом разложения с помощью флуоресцентной спектроскопии. [24]
Интенсивность света, испускаемого флуоресцирующим раствором, при определенных условиях находится в простой зависимости от концентрации растворенного вещества и, следовательно, может быть использована для анализа. Трудно, однако, измерить абсолютную интенсивность флуоресценции, и обычно измерения проводят по отношению к разведениям правильно выбранного стандартного образца. Общая схема флуоресцентной спектроскопии состоит в возбуждении флуоресценции излучением при длине волны максимума поглощения и в измерении или сравнении интенсивности флуоресцирующего света с флуоресценцией определенного стандартного раствора. Флуоресцирующий свет должен быть тщательно отделен от рассеянного света, падающего на вещество. [25]
Как уже упоминалось, присутствие во фракции ароматических углеводородов вносит существенную погрешность в расчеты по схеме [11] пз-за взаимовлияния поглощения ароматических и алифатических связей. Более селективное определение ароматических соединений возможно с привлечением УФ - и флуоресцентной спектроскопии. [26]
К биохимическим способам получения биологически активных веществ в последнее время привлечено внимание ученых различных высокоразвитых стран. Проведено получение биологически активных соединений ( пептиды, порфирины, их конъю-гаты с аминокислотами и пептидами, карборанилпорфирины, геминпептиды, витамины, ненасыщенные жирные кислоты и их производные) методами химического синтеза и биосинтеза, осуществлено изучение их свойств и взаимодействий для проявления биологической активности. Продолжено исследование по направленному биосинтезу гюлиненасыщенных жирных кислот микромицетами и изучение механизмов воздействия на него на модельных системах, проведен синтез аминокислотных, пептидных и карборанильных производных порфиринов природного строения ( дейтеропорфирин IX, протопорфирин IX), аминокислотных и пептидных производных гемина, производных пептидов, осуществлено изучение их химико-физических свойств и биологических свойств. Для липидов, полученных методом регулируемого биосинтеза, установлен фракционный и жирнокислотный состав с использованием хроматографических методов ( ТСХ, КХ, ГЖХ), модельные системы регуляции метаболизма природных липидов изучены методами УФ - и флуоресцентной спектроскопии, хроматографического анализа. Работа по геминпептидам проведена с использованием методов классического твердофазного пептидного синтеза. Показано, что 3-гидрокси-оксилипины играют важную роль в морфогенезе и активации инфекции Candida albicans. Установлено, что аспирин ингибирует образование данного класса соединений и может служить лекарственным средством при комплексной терапии кан-дидозов. [27]
 |
Классификация флуоресцентных зондов. флуоресцентные метки ( а, интенсомет-рические зонды ( Ь, рациометрические зонды ( с. [28] |
Главным недостатком интенсометрических зондов есть их неприменимость в условиях, когда невозможно точно определить анализируемый объем объекта - ситуация, часто встречаемая при работе с биоклетками. Кроме того, существует ряд задач, которые в принципе невозможно решить при помощи одноканальных зондов. В спектре флуоресценции они имеют две полосы, интенсивности которых изменяются при изменении отдельных параметров микроокружения. Очевидно, что многоканальные зонды являются наиболее совершенными устройствами. Они позволяют увеличить поток информации от объекта и этим упростить ее интерпретацию. Однако в настоящее время существуют лишь единичные примеры таких молекулярных устройств для флуоресцентной спектроскопии. Основной причиной сложившейся ситуации являются законы флуоресценции: подавляющее большинство химических соединений могут иметь лишь одну полосу флуоресценции в спектре. [29]
В основе фотосинтетического преобразования солнечной энергии лежит фотоиндуцируемый перенос электрона. В этом процессе роль донора и первичного акцептора электрона играют восстановленные тетрапир-рольные системы - хлорофилл и феофитин, имеющие макроциклическую конъюгированную систему л-электронных облаков. Функцию вторичного акцептора электрона выполняет молекула хинона. Порфирин-хиноновые диады широко используются в исследованиях фотоиндуцируемого переноса электрона в качестве биомиметических донорно-акцепторных модельных систем. Введение в их состав аминокислотных заместителей может имитировать присутствие аминокислотных остатков белкового окружения хромофоров в природных реакционных центрах. Для изучения воздействия присоединенной аминокислоты на фотохимические свойства пигмента были также получены ди - и монопроизводные дейтеропорфирина IX с теми же аминокислотами. Также были синтезированы аминокислотные производные замещенного тетрафенилпорфирина с целью выяснения характера влияния типа замещения порфиринового макроцикла и места присоединения аминокислоты на энергетику системы. Методами электронной и флуоресцентной спектроскопии изучены фотохимические свойства полученных модельных систем. Введение аминокислотного заместителя практически не влияет на положения максимумов полос поглощения и флуоресценции, однако, приводит к увеличению их интенсивности. Этот эффект зависит от места присоединения и природы аминокислоты, а также от конформации молекулы. [30]
Страницы: 1 2