Cтраница 1
![]() |
Инактивация вируса табачной мозаики. [1] |
Метод определения активности животного вируса может быть иллюстрирован на примере оценки активности вируса вакцины. Если суспензия этого вируса вводится под кожу кролика с помощью иглы, через несколько дней на месте укола появляется красная опухоль. Для сравнения активности препаратов вируса со спины и боков кролика обстригается шерсть и на коже намечаются квадраты, например шесть рядов по восемь квадратов в каждом. Каждый ряд служит для испытания одного препарата вируса. Приготовляется серия из восьми различных концентраций суспензии ( десяти - или трехкратных по отношению друг к другу), и определенный объем суспензии каждой концентрации инъецируется кролику. Суспензия наименьшей концентрации ( наибольшего разбавления) не содержит вируса и не вызывает реакции, более же высокие концентрации вызывают ее. Наименьшая концентрация, при которой еще появляются признаки реакции, служит показателем силы препарата вируса. В каждом ряду суспензия наивысшей концентрации инъецирована ближе к голове животного и вызывает наибольшую реакцию. Крайняя точка в этом опыте была достигнута на пятом разбавлении. [2]
В случаях полицистронных РНК растительных и ряда животных вирусов эукариотические рибосомы могут инициировать трансляцию лишь первого цистрона, а последующие цистроны читаются после специфической фрагментации РНК, открывающей новые 5 -концы. В других случаях, например РНК вируса полиомиелита, цистроны транслируются непрерывно в виде единой полипептидной цепи-предшественника ( полибелка), которая затем нарезается на функционально активные цепи вирусных белков. [3]
При полном расщеплении ДНК мутант-ного штамма этого же животного вируса рестриктирующими эндонуклеазами Есо RI и Нра I образуются только три фрагмента с мол. [4]
Установлено, что лишенная белка РНК, экстрагированная из некоторых животных вирусов, действует как инфекционное начало и обладает поэтому свойствами генетического детерминанта. [5]
Для проведения экспериментов по инактивации вирусов облучением необходимо получить количественную оценку активности вируса. Поскольку вирусы нельзя разводить на искусственной среде, определение их активности связано с заражением соответствующих восприимчивых организмов, и потому методы определения различны для растительных вирусов животных вирусов и бактериофагов. В случае бактериофагов количественная оценка наиболее точна. Для оценки используется следующий метод. На пластинку твердой питательной среды, подходящей для роста данных бактерий, наносится капля суспензии, содержащая несколько миллионов этих организмов, и определенного размера капля суспензии фага. С помощью стеклянного шпателя жидкость равномерно распределяется по поверхности питательной среды. После инкубации густо засеянной бактериями пластинки на ее поверхности образуется сплошная бактериальная пленка со светлыми участками в местах размножения отдельных частиц фага, которые вызывают лизис бактерий в непосредственной от них близости. [6]
Это само собой очевидно в случае экспериментов, проводимых с сухими вирусами, а также для опытов с растворами, так как имеются указания, что ионные выходы при инактивации являющейся результатом ионизации самого белка вируса, значительно превосходят ионные выходы при непрямой инактивации в результате ионизации воды. Поэтому, если размер вируса определен методом, подобным методу фильтрации, дающему размеры гидратированных частиц, необходимо, исходя из этих размеров, определить размеры негидратированных частиц. Мы сделали произвольное допущение, что в сухом состоянии они имеют плотность 1 35, типичную для сухих растительных и животных вирусов, которые были получены в достаточно чистом виде для определения их плотности. [7]