Cтраница 2
Выделение в чистом виде продукта облучения эргостерина, обладающего противорахитическо. Первые из выделенных в кристаллическом состоянии вещества2, супрастерины I и II, оказались физиологически неактивными продуктами, образовавшимися в результате слишком длительного облучения. Как в том, так и в другом случае кристаллические вещества оказались в дальнейшем неоднородными; в октябре 1931 г. появилось сообщение3253 о том, что выделен совершенно чистый препарат, обладающий высокой биологической активностью; за несколько недель до этого появилось сообщениеаав о выделении чистого витамина, однако высокая активность полученного препарата в то время еще не была доказана. [16]
При хроматографии в тонких слоях работают стандартным методом ( стр. К адсорбенту добавляют 2 % светящегося вещества ZS-cynep, вследствие чего слои в УФ-свете в области 254 мц флуоресцируют. Пластинки с нанесенными на них слоями должны обладать одинаковой активностью, должны иметь слой одинаковой толщины и одинакового состава, поскольку уже небольшое различие слоев может привести к искажению и смещению пятен. Аналогичные эффекты могут быть вызваны также сопутствующими веществами или слишком концентрированными растворами, вследствие перегрузки слоев. Для соблюдения стандартных условий камеры, оклеенные фильтровальной бумагой ( насыщение камеры), для каждого хроматографи-ческого анализа насыщаются свежим растворителем. Поскольку величины Rf, которые следует рассматривать как ориентировочные, могут сильно колебаться, в экстракт для сравнения необходимо добавить чистый витамин. Перед опрыскиванием хроматограммы рассматривают в коротковолновом УФ-свете ( 254 мц) на поглощение, в длинноволновом УФ-свете ( 365 мц) на флуоресценцию и с помощью лампы дневного света для установления собственной окраски. [17]
При хроматографии в тонких слоях работают стандартным методом ( стр. К адсорбенту добавляют 2 % светящегося вещества ZS-cynep, вследствие чего слои в УФ-свете в области 254 мц флуоресцируют. Пластинки с нанесенными на них слоями должны обладать одинаковой активностью, должны иметь слой одинаковой толщины и одинакового состава, поскольку уже небольшое различие слоев может привести к искажению и смещению пятен. Аналогичные эффекты могут быть вызваны также сопутствующими веществами или слишком концентрированными растворами, вследствие перегрузки слоев. Для соблюдения стандартных условий камеры, оклеенные фильтровальной бумагой ( насыщение камеры), для каждого хроматографи-ческого анализа насыщаются свежим растворителем. Поскольку величины Rf, которые следует рассматривать как ориентировочные, могут сильно колебаться, в экстракт для сравнения необходимо добавить чистый витамин. Перед опрыскиванием хроматограммы рассматривают в коротковолновом УФ-свете ( 254 м и) на поглощение, в длинноволновом УФ-свете ( 365 мц) на флуоресценцию и с помощью лампы дневного света для установления собственной окраски. [18]
Вещество имело кислый характер, реагировало с нитрофенилгидразшюм с, образованием дпнитрофе-нплгидразона и легко восстанавливало кислые растворы йода. На основании этого Сцент-Гьорги предположил, что он имеет кетокислоту, близкую по строению к сахарам, и назвал ее гоксуро-нопой кислотой. Вскоре им было показано, что то же самое вещество находится во многих овощах и плодах; особенно много его в соке лимонов. В начале 1932 г. Сцент-Гьорги сообщил I2J, что ранее им выделенная гексуроновая кислота излечивает морских свинок, больных цингой, и им было предложено назвать ее поэтому аскорбиновой кислотой. Кар-рер с сотрудниками показали, что при кристаллизации аскорбиновой кислоты все фракции кристаллов обладают одними и теми же физическими и химическими свойствами и все они в одинаковой степени излечивают цингу. Таким образом, было установлено, что аскорбиновая кислота является индивидуальным веществом и представляет собой чистый витамин С. В это же время было найдено, что разновидность венгерского красного перца ( Capsicum annum) содержит аскорбиновую кислоту не только в относительно больших количествах, но и изолирование ее оттуда чрезвычайно просто. [19]
Как теперь известно, в одной тонне урановой смоляной руды, использовавшейся Кюри, содержится всего лишь 140 мг радия. Однако если сравнить этот ставший классическим пример очистки с более поздними исследованиями по получению в чистом виде природных биорегуляторов, станет ясно, насколько сложнее новые задачи. Основные трудности связаны даже не с тем, что эти вещества нередко содержатся в исходном сырье в еще меньших количествах, чем радий в руде. Конечно, низкое содержание, например, биотина в куриных яйцах, когда для получения первых 1 1 мг чистого витамина пришлось обработать 250 кг сухих яичных желтков, или гормона с таким длинным и сложным названием, как 11-дезокси - 17а - оксикортикостерон ( содержание которого на 1 голову крупного рогатого скота не превышает 0 013 мг), само по себе очень затрудняет их накопление. Однако главные трудности связаны все же с двумя другими обстоятельствами. [20]