Cтраница 1
Питательная среда увлажняется, а также обычно пастеризуется и доводится до кондиции. После размножения мицелий выращивается на лотках и полках, в специальных контейнерах и пластиковых мешках. Плодоношение имеет место после того, как концентрация окружающего углекислого газа снижается посредством вентиляции или открытием контейнера либо мешка. [1]
Питательные среды, используемые на подготовительном этапе, могут несколько отличаться от среды, применяемой на втором этапе. Так, например, при пересеве лиофильно высушенной маточной культуры обычно рекомендуют обогащенные питательными ингредиентами жидкие среды. Последующие пересевы осуществляют вначале на агаризованную ферментационную среду, а затем - на жидкую. [2]
Питательные среды для них достаточно сложные и включают источники углерода, азота, витаминов, микроэлементов, специальных стимуляторов ( гидрол, кукурузно-соевая мука, растительные масла, керосин, 3-ионон или изопреновые димеры, и пр. [3]
Питательная среда разливается в чашки Петри, после ее застывания на поверхности делаются мазки исследуемой культуры. Чашки помещают в термостат. Когда на засеянных чашках развиваются бактерии, поверхность агара заливается Люголевским раствором. Посинение агара указывает на присутствие крахмала. При диастатическом действии бактерий около их колоний или во всей чашке крахмал осахаривается и агар от иода не синеет. [4]
Питательная среда в трех пробирках плавится на водяной бане. Исследуемая смесь культур, как и в приведенном выше случае, переносится в три пробирки с водой. Из этих пробирок смесь культур пересевается в пробирки с расплавленной питательной средой - из каждой пробирки с водой в отдельную пробирку со средой. Содержимое пробирок с засеянной питательной средой разливают в чашки Петри. [5]
Питательные среды подбирают с таким расчетом, чтобы они обеспечивали хороший рост и развитие продуцента и способствовали максимально возможному биосинтезу антибиотика. [6]
Питательная среда, аппаратура, воздух должны быть тщательно стерилизованы. Процесс ферментации заключается вначале в нарастании биомассы продуцента, после засева в питательную среду посевного материала, выращенного в отдельном небольшом аппарате, а затем клетки гриба, переходя в продуктивные физиологические фазы развития, образуют пенициллин и выделяют его в среду. [7]
Питательная среда, применяющаяся в производстве, состоит в основном из глюкозы, пепто. Наиболее важной и не нашедшей еще хорошего заменителя составной частью среаы является мясной экстракт. Питательная среда предварительно стерилизуется в ферментере нагреванием до 120 затем охлаждается и засевается культурой Streptomyces griseus. Приготовление последней обычно проводится в несколько стадий: вначале стерильной культурой заражается пластинка агара, которая через некоторое время переносится в склянки с питательной средой, где и продолжается ее дальнейшее развитие. Подращенной культурой засевают питательную среду в первом ферменторе, после чего процесс ферментации проводится последовательно в четырех ферменторах увеличивающгйся емкости. Каждый ферментор рассчитан таким образом, чтобы давать необходимое количество микроорганизмов для следующего по величине ферментера. Процесс ферментации дтится несколько дней. Поскольку Streptomyces griseus подобно PeniciHium notat m является аэробным организмом, нуждающимся в кислороде, через ферментор во время процесса ферментации продувается стерильный воздух со скоростью около 0 2 л в минуту на каждый литр жидкости. Одновременно необходимо проводить энергичное размешивание и добавлять вещества, уменьшающие вспенивание. [8]
Питательные среды, на которых выращивают плесневые грибы, должны содержать все вещества и элементы, необходимые грибу для синтеза составных частей клетки и для поддержания жизнедеятельности. Для изучения потребностей грибов в питательных веществах обычно применяют синтетические среды, состав которых точно известен и может быть легко изменен. [9]
Питательные среды для выращивания микроорганизмов разливают в пробирки, флаконы, колбы, бутыли, которые перед стерилизацией закрывают ватными пробками, предохраняющими среду или культуру от попадания в них посторонних микроорганизмов из воздуха. Воздух, проходя через ватную пробку, стерилизуется, так как вата задерживает микроорганизмы. [10]
Питательные среды, предназначенные для культивирования клеток млекопитающих, готовятся на основе сбалансированных глюко-зо-солевых растворов строго определенного состава, изменять который можно лишь в узких пределах, Поэтому без предварительной оценки границ интервала, в котором изменение концентрации бикарбоната натрия в среде не отражается на свойствах культуры, применять этот метод регулирования нежелательно. [11]
Питательные среды, пригодные для культивирования грибов Deute-romycetes, непригодны для грибов семейства Entomophthoraceae. Для выделения грибов используют обычно желтковые среды, с которых затем для изоляции чистой культуры переносят возбудителя на агар Сабуро или другую питательную среду. [12]
Питательная среда стерилизуется в небольших колбочках, уда ее наливают слоем около 2 см. После стерилизации среду оставляют стоять на воздухе несколько дней, чтобы она насытилась кислородом и углекислотой. Затем в каждую колбу добавляют приблизительно 0.05 г стерильной железной проволоки и заражают посевным материалом. [13]
Питательная среда для ферментации представляет собой разбавленный водный раствор, который содержит 1 % глюкозы, 0 5 % пептона, 0 5 % мясного экстракта и 0 5 % соли. Этот раствор тщательно стерилизуется и перед прививкой охлаждается. [14]
Питательная среда засевается в ферментатор через штуцер со строгим соблюдением стерильности при минимальном движении воздуха в цехе. После загрузки ферментатора через пробоотборник стерильно отбирают пробу среды на проверку ее стерильности, а затем давление в ферментаторе снижают до нуля, прекращают подачу воздуха и одновременно закрывают вентиль на выхлопной линии. Вокруг штуцера, через который осуществляется посев, зажигают факел, открывают штуцер и через зону огня вносят посевную культуру из колбы. После этого штуцер быстро закрывают, включают подачу воздуха и приоткрывают вентиль на выхлопной линии. [15]