Cтраница 2
Среда LIT для культивирования Trypanosoma cruzi имеет следующий состав ( г / л): печеночного экстракта, хлоридов натрия и калия - по 4 0, фосфата натрия - 8 0, триптозы ( триптона) - 5 0, глюкозы - 2 0 г, бычьей крови - 200 мл. Среду инактивируют в течение 1 ч при 62 С. После охлаждения добавляют 20 мл гемоглобина ( 10 мл осажденных эритроцитов быка 90 мл дистиллированной воды), доводят рН среды до 7 2 и стерилизуют фильтрацией через фильтр Зейца под давлением. Готовую среду разливают в пробирки или колбы Эрленмейера по 10 мл, куда засевают по одной капле исследуемого материала и инкубируют при 26 - 28 С, оберегая посевы от высыхания. [16]
![]() |
Схема установки для приготовления газонасыщенной испытательной среды. [17] |
Для увеличения скорости насыщения среды увеличено время нахождения капли в газовой фазе - для этого реактор имеет вытянутую форму. Через один час работы установки берется контрольная проба на проверку концентрации сероводорода в среде. После достижения заданной концентрации сероводорода в растворе установка выключается. Слив готовой среды производится через сливной вентиль 2, подача газа при этом не прекращается. [18]
Для подавления сопутствующей флоры в готовую среду рекомендуют добавлять 15 - 25 ЕД пенициллина. [19]
Содержимое колбы тщательно смешивают и после растворения всех ингредиентов проверяют среду на буферную способность. Для этого 1 - 2 капли среды наносят на стекло, дают ей застыть. Затем на один край застывшей среды наносят каплю 10 % раствора соляной кислоты, а на другой - каплю 10 % едкого натра. Если от кислоты среда желтеет сразу, а от щелочи краснеет, то она приготовлена правильно. Если пожелтение наступает медленно, то надо среду сразу же подкислить и снова проверить ее буферность. Цвет готовой среды должен быть коричнево-красным. [20]