Cтраница 2
Кривая титрования, которую получают добавлением кислоты ( до рН 2) или щелочи ( до рН 12) к нейтральному раствору ДНК, необратима. Эту необратимость можно объяснить тем, что водородные связи, разорванные в результате ионизации оснований, три обращении титрования восстанавливаются неопецифи-ческим образом. Если большая часть водородных связей между комплементарными основаниями порвана, то при их восстановлении вместо исходной двойной спирали со специфически спаренными основаниями образуются какие-то менее упорядоченные структуры. Очевидно, исходная двойная спираль необратимо разрушается, превращаясь в какую-то двухцепочечную структуру с большей энтропией. [16]
Независимо от затравки в синтезированном продукте количество аденина и тимина одинаковое. Полимер содержит чередующиеся последовательности только А и Т, последовательность АфА и ТфТ в. В зависимости от условий реакции мол масса синтетического полимера колеблется между 2 и 8 млн. При 71 С наблюдается гиперхромный эффект ( 37 %) при 260 им. Процесс плавления полимера полностью обратим при постепенном охлаждении. Эти данные, а также результаты рентгеновской дифракции указывают на то, что молекулы полимера представляют собой длинные нитевидные двухцепочечные структуры, в которых полинуклео-тидные цепи удерживаются между собой водородными связями между адениновыми и тиминовыми азотистыми основаниями. Такой полимер встречается и в биологических объектах. [17]
Физические свойства продуктов ( молекулярный вес - 5 106) были сходны со свойствами двухцепочечной ДНК, а тимидин-5 - трифосфат в них мог быть замещен 5-бром - 2 -дезоксиуридин - 5 -трифосфатом. Сополимер тимидиловой и дезок-сиадениловой кислот действует как затравка при синтезе такого же полимера без индукционного периода. Результаты этих исследований указывают на автокаталитический характер процесса, причем после начальной стадии de novo, в течение которой синтезируются несколько первых молекул полимера, происходит быстрая редупликация. Связывание матрицы и продукта было показано при использовании А - Т - сополимера как затравки для образования аналогичного сополимера 5-бром - 2 -дезоксиуридиловой и дезок-сиадениловой кислот. Из реакционной смеси можно было выделить гибридный полимер, содержащий 5-бромурацил только в одной гибридной цепи. Продукт второго типа был получен из дезоксигуано-зин-5 - и дезоксицитидин-5 - трифосфатов; он состоит из двух гомо-полимеров, связанных водородными связями в двухцепочечную структуру. [18]