Внесение - образец
Cтраница 4
 |
График зависимости намагниченности. Образец удален из поля, повторно внесен в поле, подвергнут воздействию 90 -ного импульса после чего происходит спад свободной индукции. [46] |
В и произойдет резонансный обмен энергией, вызывающий рандомизацию протонов. Процесс рандомизации часто называют увеличением спиновой температуры системы. В результате рандомизации протонной спиновой системы из-за переходов в ядрах В намагниченность, восстанавливающаяся при повторном внесении образца в магнитное поле, имеет меньшую величину, чем в противном случае. В результате наблюдается и меньший СИС. Если частота, вызывающая квадрупольные переходы, не подходит для резонанса, то ядро В не рандомизуется, и большая часть намагниченности восстанавливается. Путем систематического увеличения частоты излучателя В спектры квадрупольных переходов системы В наносятся на схему в зависимости от влияния на СИС протонной спиновой системы. [47]
Принцип действия установки заключается в том, что свет люминесценции исследуемого образца разлагается кварцевым моно-хроматором и затем направляется на входное отверстие приемника излучения. На подставке 1, две стороны которой размещены параллельно оптической оси А-А, проходящей в направлении входного окошка СФ-4, устанавливается кювета 2 с анализируемым раствором. Для предотвращения облучения образца нефильтрованным светом ртутной лампы, а также для защиты от постороннего рассеянного света подставка с кюветой закрыта кожухом 3, имеюдим отверстия для входа ультрафиолетового света 4, выхода света люминесценции 5 и дверку для внесения образцов. [48]
Принцип действия установки заключается в том, что свет люминесценции исследуемого образца разлагается кварцевым моно-хроматором и затем направляется на входное отверстие приемника излучения. На подставке /, две стороны которой размещены параллельно оптической оси А-А, проходящей в направлении входного окошка СФ-4, устанавливается кювета 2 с анализируемым раствором. Для предотвращения облучения образца нефильтрованным светом ртутной лампы, а также для защиты от постороннего рассеянного света подставка с кюветой закрыта кожухом 3, имеющим отверстия для входа ультрафиолетового света 4, выхода света люминесценции 5 и дверку для внесения образцов. [49]
Что касается полифункциональных аминокислот, то дипептиды, содержащие Глу, Лиз и Орн, не представляют трудностей ни для получения производных, ни для хроматографии. Дополнительные функциональные группы защищают в ходе обычного получения производных. Возможно, при прямом внесении образца в колонку подобных реакций удалось бы избежать. Трипептиды, в которые входят указанные выше аминокислоты, до сих пор не исследованы. Сер и Тре из-за термического р - элиминирования во время внесения образца при высокой температуре могут давать несколько сигналов. [50]
Более точно эта прочность определяется испытанием образцов, отобранных из горизонтальных швов кладки. Для этого в подоконных ее участках снимают 2 - 3 ряда и из средней части горизонтального шва берутся пластинки раствора. Из последних изготовляются ( по 18 - 24 шт. Через 2 - 3 часа после внесения образцов в теплое помещение они испытываются на сжатие плашмя до разрушения. [51]
Обычный картофельный крахмал промывают несколько раз дистиллированной водой путем декантации и затем тщательно насыщают тем буферным раствором, который будет использован в опыте. Густую суспензию крахмала в буфере вливают в лоток со съемными боковыми стенками, сделанными из стекла или пластмассы. Предварительные опыты обычно ставят с блоком размером 40x5x0 7 ел; на более толстые блоки шириной 50 см можно наносить до 1 г белка в виде полосы шириной 2 см. Когда частицы крахмала осядут, избыток буфера отсасывают при помощи толстой фильтровальной бумаги, наложенной на оба конца блока. Оптимальная влажность блока должна быть такой, чтобы можно было аккуратно вырезать и удалить из него узкую полосу крахмала для внесения образца. [52]
Воспроизводимость пиков на газовой хроматограмме определяется поведением компонентов на колонке. Несомненно, что именно здесь кроется одна из самых серьезных проблем количественной ГХ. Об аналогичных наблюдениях, касающихся производных аминокислот, мы уже упоминали [19, 53, 78]; измерения Крукшенка и Шиэна [16] также не дали удовлетворительных результатов. Следует отметить несомненное преимущество прямого внесения образца на колонку, использованного этими авторами. Впоследствии Шталлинг и др. [83] описали количественный ГХ-анализ всех природных аминокислот. [53]
В реальных веществах ЯМР наблюдается не строго на одной частоте, как это следует из ур-ния ( 4), а в нек-ром интервале частот. Конечная ширина линии обусловлена различием условий прецессии соседних магнитных ядер в веществе. Эти условия определяются структурой, агрегатным состоянием вещества и рядом других факторов. Пока образец находится вне магнитного поля, ориентации векторов и, отдельных ядер хаотически распределены по всем направлениям вследствие теплого движения атомов и молекул. При внесении образца в поле Я0 часть векторов л ориентируется по полю, а часть ( меньшая) - - против поля, за счет избыточной тепловой энергии. Переход к распределению в поле Я0 требует нек-рого времени. Такие процессы установления носят название релаксационных и проходят через взаимодействие релаксирующих частиц между собой и с окружающей средой. В теории ЯМР рассматривается два механизма релаксации. Встречающиеся в экспериментах значения 7 лежат в интервале от 10 - 4 до 10 сек. Для твердых тел Tt больше, чем для жидкостей и газов. Релаксация ограничивает время жизни ядра в данном состоянии. [55]
Для заполнения колонки гранулы гидратированного геля в виде разбавленной суспензии помещают в колонку и оставляют оседать. Мелкие частицы предварительно удаляют повторной декантацией Заполнение колонок мягкими сортами геля ведут при пониженном давлении Для этого нижний конец гибкого шланга, которым оканчивается колонка, помещают на 10 - 30 см ниже уровня жидкости в резервуаре с суспензией. Такой способ позволяет, оказывая незначительное давление на гранулы, создавать необходимую скорость потока. Последующее элюиро-вание также осуществляется при пониженном давлении. Мягкий гель защищают сверху фильтровальной бумагой или слоем ( 2 см) более жесткого геля. В противном случае возникает опасность взмучивания слоя при внесении образца. [56]
Что касается полифункциональных аминокислот, то дипептиды, содержащие Глу, Лиз и Орн, не представляют трудностей ни для получения производных, ни для хроматографии. Дополнительные функциональные группы защищают в ходе обычного получения производных. Возможно, при прямом внесении образца в колонку подобных реакций удалось бы избежать. Трипептиды, в которые входят указанные выше аминокислоты, до сих пор не исследованы. Сер и Тре из-за термического р - элиминирования во время внесения образца при высокой температуре могут давать несколько сигналов. [57]
Стеклянную трубку ( внутренний диаметр 2 - 3 см, высота 20 - 50 см) с оттянутым концом располагают вертикально; в узкую часть помещают тампон из стеклянной ваты, а затем надевают резиновый шланг с зажимом. Готовую колонку заполняют на одну треть 0 5 % - ным раствором поваренной соли. Предварительно замачивают на 30 мин 17 г сефадекса G-25 ( тонкий), добавляя порошок к избытку 0 5 % - ного, раствора поваренной соли. Его используют в качестве растворителя на протяжении всего опыта. Сливают избыток растворителя с набухшего геля, а суспензию количественно переносят в подготовленную колонку. Через 5 мин открывают зажим. Частицы геля начинают оседать в потоке; вытекающий из колонки растворитель постоянно пополняют. В итоге формируется готовый к работе слой геля объемом около 87 мл. Чтобы при внесении смеси не нарушить верхний слой геля, зажим закрывают и избыток растворителя удаляют пипеткой. На гель затем осторожно наносят раствор 20 мг крахмала и 30 мг глюкозы в 2 мл солевого раствора. Зажим вновь открывают, чтобы дать раствору впитаться в гель. Аналогичным образом еще раз промывают верхний слой 2 мл растворителя, после чего наполняют им колонку и начинают элюирова-ние. С момента внесения образца элюат собирают в мерный цилиндр, содержащий 1 мл раствора Ь KI. После того как с колонки сойдет 32 мл раствора, элюат начинает окрашиваться в синий цвет, что свидетельствует о появлении в нем крахмала. Положительную реакцию на крахмал дают 12 - 13 мл элюата, затем она быстро исчезает. [58]
Страницы: 1 2 3 4