Толщина - слой - адсорбент
Cтраница 2
 |
Зависимость площади пика от толщины слоя сорбента и метода измерения. [16] |
Ошибки при денситометрии могут возникнуть также в процессе самой хроматографии в тонких слоях, например при измерении объемов опытного вещества при нанесении его на пластинку. Точность определения зависит и от толщины слоя адсорбента на пластинке, влажности слоя, присутствия посторонних веществ, характера растворителей и ряда других факторов. [17]
Можно также сухой адсорбент в смеси со связующим материалом равномерно с помощью стеклянной палочки наносить на пластину. Целесообразно с двух концов пластины приклеить полоски, толщина которых соответствует толщине выбранного слоя адсорбента ( адсорбент надо намазывать, а не раскатывать. [18]
 |
Схема поглотителя с активированным углем. [19] |
Основной недостаток угольно-адсорбционного метода, использующего неподвижный слой активированного угля, заключается в том, что эффективность его зависит от скорости прохождения через поглотитель очищаемого газа. Эта скорость должна быть невелика ( до 0 2 м / сек), а толщина слоя адсорбента значительна. [20]
При обработке хроматограммы определяют величины RF всех соединений смеси [ см. уравнение ( А. Воспроизводимость значений RF с данным элюентом определяется прежде всего постоянством активности адсорбента, насыщения в камере ( см. ниже), толщины слоя адсорбента и температуры камеры. Для идентификации надежнее всего параллельно на той же пластине хроматографировать определяемое вещество и аутеничный образец - свидетель, проверив совпадение iRp в двух системах растворителей. [21]
Существенный недостаток количественных методов анализа тонкослойных хроматограмм, основанных на измерении пропускания света, был связан с нелинейной зависимостью сигнала оптического детектора от количества вещества в хроматографи-ческом пятне. Эта нелинейность обусловлена специфическим законом прохождения света в рассеивающей среде, описываемым уравнением Кубелки - Мунка, и неоднородностью пластины по толщине слоя адсорбента. Последнюю можно учесть, измеряя оптические свойства подложки непосредственно в хроматографиче-ском пятне. Использование двухволнового метода спектрофото-метрического детектирования, когда излучение одной волны К поглощается и веществом, и адсорбентом, а другой волны Я2 - только адсорбентом, позволяет выделить сигнал, связанный с поглощением излучения только анализируемым веществом. Дальнейшая обработка сигнала детектора в соответствии с уравнением Кубелки - Мунка позволяет линеаризовать зависимость оптического сигнала от количества вещества в ТСХ. Поглощение света адсорбентом может быть учтено также при спектрофото-метрическом сканировании пластины на просвет и отражение. Эти принципы реализованы в лучших современных зарубежных денситометрах - флуориметрах. [22]
Существенный недостаток количественных методов анализа тонкослойных хроматограмм, основанных на измерении пропускания света, был связан с нелинейной зависимостью сигнала оптического детектора от количества вещества в хроматографи-ческом пятне. Эта нелинейность обусловлена специфическим законом прохождения света в рассеивающей среде, описываемым уравнением Кубелки - Мунка, и неоднородностью пластины по толщине слоя адсорбента. Последнюю можно учесть, измеряя оптические свойства подложки непосредственно в хроматографиче-ском пятне. Использование двухволнового метода спектрофото-метрического детектирования, когда излучение одной волны К поглощается и веществом, и адсорбентом, а другой волны Ki - только адсорбентом, позволяет выделить сигнал, связанный с поглощением излучения только анализируемым веществом. Дальнейшая обработка сигнала детектора в соответствии с уравнением Кубелки - Мунка позволяет линеаризовать зависимость оптического сигнала от количества вещества в ТСХ. Поглощение света адсорбентом может быть учтено также при спектрофото-метрическом сканировании пластины на просвет и отражение. Эти принципы реализованы в лучших современных зарубежных денситометрах - флуориметрах. [23]
Как обычно, наиболее существенны смачиваемость пластинок, тщательная гомогенизация ( в смесителе Уоринга) и дегазация смеси адсорбентов и использование специального прибора для нанесения слоя. Рекомендуется следующий состав исходной смеси: 2 rDEAE - целлюлозы, 15 г целлюлозы и 100 мл воды; этого достаточно для приготовления 8 пластинок размером 20 2и см с толщиной слоя адсорбента 0 25 мм. [24]
Необходимость наблюдения спектров адсорбированных веществ при низких заполнениях поверхности требует помещения на пути пучка достаточно большого количества адсорбента с достаточно большой удельной поверхностью. Однако увеличение толщины слоя адсорбента приводит к возрастанию интенсивности полос поглощения объема частиц адсорбента и рассеяния ими инфракрасного света. Поэтому толщина слоя адсорбента не может быть большой. Этот предел, конечно, сильно зависит от чувствительности применяемого спектрометра. [25]
Денситометрический способ измерения количества вещества заключается в определении интенсивности проходящего через пластинку света. Для этой цели используют специальные приборы - денситометры, например БИАН-170. Точность определения зависит от толщины слоя адсорбента и его влажности, присутствия посторонних веществ и других факторов. [26]
Прей-сман и др. [121] сумели разделить на силикагеле алкил - и арил-нитрозамины, а также циклические нитрозамины. При разработке микроанализа этих веществ в продуктах питания Айзенбранд и др. [122] установили 4 основных положения, которыми следует руководствоваться: а) при нанесении проб необходимо пользоваться хорошо осушенным дихлорметаном; б) чтобы избежать потерь летучих нитрозаминов, разбавленные экстракты нужно концетри-ровать в испарителе Кудерна-Даииша; в) проводить разделение необходимо в темноте при 4 С; г) толщина слоя адсорбента должна быть не менее 0 6 мм. Айзенбранд и соавторы также отмечают, что нитрозамины можно количественно извлечь с адсорбента отгонкой с ларом. [27]
Общее количество вещества целесообразно определять при помощи предварительного опыта. Слишком высокая концентрация разделяемых веществ приводит к появлению хвостов на хроматограмме. Увеличение активности и толщины слоя адсорбента способствует хорошему разделению. [28]
Согласно первому способу, адсороент вместе со связывающим веществом суспендируют в хлороформе, наливают суспензию на ластинку, равномерно распределяя по поверхности. После испа - ения растворителя ( в сушильном шкафу) пластинки готовы к Употреблению. Согласно второму способу приготовления пластн - ок сухой адсорбент без связывающего вещества равномерно с - Помощью стеклянной палочки наносится на пластинку. На оба рсонца стеклянной палочки приклеены полоски, толщина которых Соответствует толщине выбранного слоя адсорбента ( намазывать, не раскатывать. Перед нанесением адсорбент очищают от Крупных частичек, которые при хроматографнческом разделении шогли бы давать неровности на поверхности адсорбента. [29]
В соответствии с одним из них пипетку с пробой перемещают по краю пластинки, при этом проба вытекает на пластинку. Однако если поток пробы и скорость движения пипетки не регулируются очень тщательно, проба может быть нанесена неравномерно. Хонеггер [9] наносил пробы в V-образный желоб шириной 1 - 2 мм, глубина которого была равна половине толщины слоя адсорбента. Следует следить за тем, чтобы при нанесении пробы со стеклянной пластинки не удалялся адсорбент, так как это нарушит движение элюента. [30]
Страницы: 1 2 3