Трансаминаз
Cтраница 3
Превращение префеновой кислоты в тгора-оксифенилпиро-виноградную осуществляется дегидрогеназой префеновой кислоты, которая требует присутствия НАД в качестве кофактора ( Schwink, Adams. Другой фермент - ароматаза префеновой кислоты - превращает префеновую кислоту в фенилпировиноградную. При участии пиридоксальфосфата и трансаминазы ( Диксон, Уэбб, 1961, стр. [31]
Средство Ралли для мытья сильно загрязненных рук, разработанное на основе анионоактивных ПАВ, не оказывает раздражающего и сенсибилизирующего влияния на кожу животных и человека. ОМС-5 аналогичного назначения, содержащее кремнийорганический пенорегулятор КЭП-1 и полиэтилсилоксановую жидкость ПЭС-4, не вызывает раздражений кожи, но, всасываясь в организм животных, вызывает их гибель. При этом резко изменяется активность каталазы и трансаминазы, что является признаком нарушения ферментативной функции печени. Применение средства в представленной рецептуре нами не рекомендовано. [32]
Большое количество экзогенных ядов вмешивается в метаболизм клетки печени, ингибируя ферментные системы, либо может повредить или уничтожить паренхиматозные клетки, мешая выделению конъюгированного билирубина и вызывая желтуху. Ущерб, наносимый тетрахлорметаном, может быть взят в качестве модели прямого гепатотоксич-ного воздействия. При умеренном отравлении желтухи может не быть, однако повреждение печени определяется присутствием избыточного количества уробилиногена в моче, повышением уровней концентрации амино-трансферазы ( трансаминазы) в сыворотке крови и нарушением процесса выделения бромсульфталеина. При более серьезных случаях отравления клинические симптомы заболевания напоминают симптомы при остром инфекционном гепатите. Потеря аппетита, тошнота, рвота и боли в животе сопровождаются болезненными проявлениями печени и ее увеличением, а также желтухой, с бледным стулом и темной мочой. Важной биохимической особенностью является уровень содержания амино-трансферазы ( трансаминазы) в сыворотке крови, обнаруживаемый в данных случаях. Тетрахлорметан находил широкое применение при химической чистке одежды, в качестве компонента составов огнетушителей и в качестве промышленного растворителя. [33]
В первой реакции поглощается кислород, а во второй - выделяется двуокись углерода. Отношение энантиомеров аминокислот может быть определено путем измерения радиоактивности продукта ферментативной реакции, если использованные субстраты содержали радиоизотопы. Для этого о - или ь - 14С - аланин превращали в пировиноградную кислоту под действием оксидазы о-аминокислот ( ЕС 2.61.2) или под действием системы трансаминаза - L-глутаминовая кислота - пировиноградная кислота [ схема (8.15) ]; соотношение энантиомеров в аланине было определено путем измерения радиоактивности в образующемся пирувате. [34]
 |
Схема субстратного торможения. показаны различные типы субстратного ингибирова-ния. 1 и 2 - различные функциональные группы субстрата. А - акцептор, D - донор. [35] |
Знание величины SonT необходимо при изучении ферментативных реакций для проведения исследований в оптимальных условиях: Ферментативная реакция может ингибироваться продуктами реакции. Во-первых, накопление продуктов реакции может вызывать сдвиг равновесия в обратную сторону у обратимых реакций. Во-вторых, продукт реакции может связываться с ферментом или компонентами ферментной системы ( активатором, коэнзимом) и этим снижать скорость реакции. Трансаминазы ( аминотрансферазы) - ферменты, катализирующие реакции транс-аминирования - перенос - аминогруппы аминокислот к - углеродному атому таких а-кетокислот, как пировиноградная, а-кетоглутаровая или щавелевоуксус-ная, в результате чего образуется а-кетокислота исходной аминокислоты, а а-ке-токислота превращается в соответствующую - аминокислоту. [36]
Путем переаминирования большинство аминокислот может превращаться одна в другую или заменяться соответствующей кетокислотой. Особенно легко переаминируются глутаминовая и ас-парагиновая кислоты. Соответствующие им трансаминазы ( глутаматокса-лацетаттрансаминаза и глутаматпируваттрансаминаза) имеют очень высокую активность. Кетокислоты, получающиеся из этих аминодикарбоновых кислот ( а-кетоглутаровая и щавелевоуксусная кислоты), осуществляют связь углеводного и белкового обмена. [37]
Под трансаминированием ( переаминиро-ванием) подразумевают реакции межмолекулярного переноса аминогруппы от аминокислоты на а-кетокислоту без промежуточного образования аммиака. По меньшей мере 11 аминокислот способны вступать в реакции трансаминирования. Основными кетокислотами, принимающими участие в трансаминировании, являются пируват, ЩУК и а-кетоглутарат. Трансаминирование катализируют ферменты аминотрансферазы ( трансаминазы), которые содержатся в цитозоле и митохондриях клеток. В процессе катализа пиридоксальфосфат обратимо связывает аминогруппу, превращаясь в пиридоксаминфосфат. Схема реакции трансаминирования между глутаминовой кислотой и пируватом ( фермент - глутамат-пируват-аминотрансфераза или аланинаминотрансфераза, АлАТ): глутамат пируват - а-кетоглутарат аланин. [38]
В названиях трансаминаз, катализирующих обратимые реакции, также указываются обе аминокислоты, являющиеся субстратами, например глутамат-аланин-трансаминаза. Если в реакцию могут вступать не две, а несколько аминокислот, то применяются такие обозначения, как глутамат-валин, лейцин, изолейцин-трансаминаза. Но если фермент катализирует реакции между любой из аминокислот, входящих в группу субстратов, и аналогичными а-кетокислотами, то наименования всех субстратов следует соединять дефисами, например глутамат. Эта номенклатура в данное время представляется удобной; после того как трансаминазы будут получены в высокоочищенном состоянии, возможно, окажется желательным и даже необходимым пересмотреть терминологию. [39]
В этом приборе используется пропорциональный насос Р с 12 пластмассовыми трубками различного диаметра. Разделение белков происходит в колонке / С. F и затем используется после окончания анализа. В процессе хроматографирования от основного потока элюата отделяется очень небольшая часть, которая поступает в три аналитические секции, где проводится определение основной фосфатазы, трансаминазы и всех белков. После определения основной фосфатазы часть элюата поступает через трубку 2 вместе с пузырьками воздуха, введенными через трубку 3, и субстратом из трубки 4 в аналитическую систему. В короткой стеклянной спирали М происходит тщательное смешивание водных растворов, полученная смесь проводится через термостат /, в котором при определенных условиях происходит расщепление субстрата. Чтобы реакция прервалась, к смеси через трубку 5 добавляется раствор соответствующего реагента. Через смесительную спираль результирующая смесь вводится в проточную кювету колориметра С - и затем идет на оброс. На абсциссу наносятся номера фракций. Определение трансаминазы проводится аналогичным образом. Через трубки 6 - 9 подаются образец, воздух, субстрат и реагент соответственно. Результирующая концентрация трансаминазы пропорциональна кривой III записываемой самописцем. Третья аналитическая система, регистрирующая суммарное содержание белков, несколько проще, чем две другие. [40]
Хотя две описанные выше группы ферментов катализируют реакции переноса, их не называют трансферазами, так как по определению трансферазы это ферменты, которые осуществляют перенос части молекулы донора, за исключением водорода и электронов, на молекулу акцептора, причем ни донором, ни акцептором не является вода. В нее входят фосфотрансферазы, обычно называемые киназами, которые катализируют перенос остатка фосфата от одного соединения на другое. Например, гексокиназа катализирует перенос концевого фосфатного остатка аденозинтрифосфата на глюкозу с образованием глюкозо-6 - фосфата. Трансаминазы осуществляют перенос аминогруппы от - аминокислоты на а-кетокислоту. [41]
В сыворотке крови здоровых людей скорость реакции между аспарагиновой и а-кетоглутаро-вой кислотами очень незначительна; реакцию можно проследить путем внесения в реакционную систему дегидрогеназы яблочной кислоты и восстановленного дифосфопиридиннуклеотида и наблюдения за уменьшением оптической плотности при 340 ми. Через один-два дня после появления клинических признаков инфаркта миокарда активность трансаминазы в сыворотке оказывается повышенной в 2 - 10 раз по сравнению с нормальной. Активность трансаминазы возвращается к нормальному уровню примерно через 5 дней, если поражение не распространяется на новые участки миокарда. Ввиду широкого распространения глутамат-аспартат-трансаминазы можно ожидать повышения активности этой трансаминазы в сыворотке и при повреждении других органов. Такое повышение было отмечено при заболеваниях печени и других патологических состояниях. Тем не менее определение активности трансаминазы в сыворотке крови при сопоставлении с другими данными клинического исследования представляет практический интерес. [42]
Большое количество экзогенных ядов вмешивается в метаболизм клетки печени, ингибируя ферментные системы, либо может повредить или уничтожить паренхиматозные клетки, мешая выделению конъюгированного билирубина и вызывая желтуху. Ущерб, наносимый тетрахлорметаном, может быть взят в качестве модели прямого гепатотоксич-ного воздействия. При умеренном отравлении желтухи может не быть, однако повреждение печени определяется присутствием избыточного количества уробилиногена в моче, повышением уровней концентрации амино-трансферазы ( трансаминазы) в сыворотке крови и нарушением процесса выделения бромсульфталеина. При более серьезных случаях отравления клинические симптомы заболевания напоминают симптомы при остром инфекционном гепатите. Потеря аппетита, тошнота, рвота и боли в животе сопровождаются болезненными проявлениями печени и ее увеличением, а также желтухой, с бледным стулом и темной мочой. Важной биохимической особенностью является уровень содержания амино-трансферазы ( трансаминазы) в сыворотке крови, обнаруживаемый в данных случаях. Тетрахлорметан находил широкое применение при химической чистке одежды, в качестве компонента составов огнетушителей и в качестве промышленного растворителя. [43]
Страницы: 1 2 3