Изотерма - связывание
Cтраница 1
 |
Концентрационная зависимость. [1] |
Изотерма связывания показывает, что связывание олигоадениловой кислоты происходит кооперативно и поэтому наблюдаемая константа диссоциации не постоянна. В соответствии с типом связывания кривые элюирования, полученные при 5 и 10 С и различных концентрациях олигоадениловой кислоты, изменяются, как показано на рис. 3.10. С другой стороны, известно, что при некооперативном связывании кривая элюирования сохраняет форму гауссовой, максимум которой не зависит от концентрации. Применяя теорию тарелок, Окада и др. [11] изучили кооперативную адсорбционную хроматографию, пренебрегая эффектом гель-фильтрации, поскольку олигоме-ры очень малы по сравнению с размером пор геля. Первое условие состоит в том, что концентрация свободного олигомера должна быть одинаковой в подвижной фазе и фазе геля. [2]
В данном случае изотерма связывания вещества В веществом А может иметь особенность ( например, точку перегиба), тогда как при равенстве обеих констант эта изотерма плавно идет к насыщению подобно изотерме Лэнгмюра. S-образность кривой связывания, как правило, свидетельствует о кооперативности системы ( см. ниже гл. [3]
Где / ( - константа изотермы связывания денатуранта полипеп гидом, T t - температура перехода в отсутствие денатуранта, at - активность, при которой происходит переход, Tt - фактическая температура перехода. [4]
Кривые элюирования очень близки к изотермам связывания элюируемого вещества с иммобилизованным аффи-нантом, и, следовательно, из хроматограммы можно получить термодинамические параметры молекулярных взаимодействий. Метод эквивалентен повторяющемуся диализу и имеет много преимуществ по сравнению с обычным равновесным диализом. Например, он требует намного более низких концентраций и небольших количеств образца, несколько образцов разных молекул можно наносить одновременно и обнаруживать небольшие различия в связывающих способностях при хорошем разделении. [5]
Полагая известным кооперативный параметр Ъ ( 0 1 - 0 001), можно смоделировать изотерму связывания и кривые элюирования; при этом полученные кривые элюирования будут иметь прямоугольный вид, поскольку при некоторой концентрации олиго-мера изотерма связывания резко стремится к нулю, что отражает влияние энтропии образования петли из двух цепей полимера. [6]
Полагая известным кооперативный параметр Ъ ( 0 1 - 0 001), можно смоделировать изотерму связывания и кривые элюирования; при этом полученные кривые элюирования будут иметь прямоугольный вид, поскольку при некоторой концентрации олиго-мера изотерма связывания резко стремится к нулю, что отражает влияние энтропии образования петли из двух цепей полимера. [7]
Длина лигаида а может быть определена из экспериментальных: значений пЭф и гшах. Из изотерм связывания этидиумбромида, спермина, актиномицина и нетроисина двойной спиралью ДНК получены значения а, равные соответственно 2, 4, 5 и 5 парам оснований. Эти значения близка к ожидаемым на основе молекулярных размеров лигандов. [8]
 |
Электродные функции додецилсульфатного (. и натриевого ( 2 электродов в растворах додецилсульфата натрия ( ( С Elsevier Publishing. [9] |
Исследование процесса взаимодействия ионов ПАВ с веществом с помощью такого электрода имеет то преимущество, что определение несвязанного ПАВ в растворе производится быстро и in situ. Полученные данные позволяют сразу же построить изотермы связывания поверхностноактивных ионов, на которых изломы кривой находятся в тех же областях концентраций, что и на изотерме, полученной косвенными методами. Таким способом были исследованы такие неионогенные полимеры, как декстран Т-70 ( мол. Полученные данные были сопоставлены с результатами измерений pNa натрий-селективным стеклянным электродом ( L. GEA 33), а данные по белку - с опубликованными в работах [425, 426] результатами измерения равновесия при диализе. [10]
Ряд термодинамических параметров был получен из экспериментальных изотерм связывания. Член ( х 2) 1 был определен исходя из концентрации свободного олигомера в точке перегиба изотермы связывания, а член ( 4у2Уа) - исходя из тангенса угла наклона изотермы связывания в этой точке. [11]
К сожалению, - с, от которой зависит удовлетворительное соотношение сигнал - шум для кривой элюирования, недостаточно мала, чтобы можно было ограничиться двухчленным приближением. В результате траектория пика - вогнутая и оба значения нельзя определить с достаточной точностью, однако они очень приближенно соответствуют величинам, получаемым из изотермы связывания. [12]
Ряд термодинамических параметров был получен из экспериментальных изотерм связывания. Член ( х 2) 1 был определен исходя из концентрации свободного олигомера в точке перегиба изотермы связывания, а член ( 4у2Уа) - исходя из тангенса угла наклона изотермы связывания в этой точке. [13]
Страницы: 1