Cтраница 3
Зеленые светофильтры увеличивают контраст препаратов, имеющих красную окраску, и полезны при работе с апохроматами, у которых недостаточно хорошо исправлен хроматизм для синих лучей. Они применяются также с фазово-контрастными устройствами и при фотографировании, так как они задерживают синие лучи, повышая контрастность изображения. [31]
Разнообразные принадлежности к микроскопам предназначены либо для расширения возможностей исследования, либо для улучшения условий работы наблюдателя. Например, конденсоры темного поля и фазово-контрастные устройства повышают контраст изображения; объект-микрометры, окулярные микрометры и интеграторы позволяют проводить измерения; люминесцентные принадлежности помогают исследовать специальные препараты; спектральные и фотометрические насадки дают возможность выделить малые участки препарата и провести спектрофотометриче-ский анализ; фотографические насадки, рисовальные аппараты и насадки сравнения служат целям документальных исследований; бинокулярные насадки и препаратоводители создают лучшие условия наблюдения и удобства в работе. Большинство принадлежностей, выпускаемых отдельно, входит в комплекты больших и универсальных моделей микроскопов. [32]
Для исследования с помощью биологических микроскопов прозрачных, малоконтрастных объектов, невидимых при обычных методах наблюдения, применяется также фазово-контрастное устройство МФА-2. Это устройство по принципиальной схеме и конструкции аналогично фазово-контрастному устройству КФ-4 и отличается от него лишь способом нанесения фазовых колец в объективах и их размером. [33]
Детали объекта, которые не изменяют яркость и цвет лучей, но в отличие от обычной отражающей поверхности вызывают при отражении смещение световой волны по фазе, не воспринимаются глазом и светочувствительным слоем на фотопластинке. С этой целью на пути лучей устанавливают кольцевые диафрагмы и фазово-контрастное устройство. [34]
По первому способу, например, выполнено фазово-контрастное устройство фирмы Лейтц. В нем опак-иллюминатор с пластинкой Бека имеет апертурную диафрагму кольцевого вида. Отечественное фазово-контрастное устройство КФ-3 применяется в металлографических микроскопах и рассчитано на работу с обычными объективами. [35]
![]() |
Принципиальная схема фазово-контрастного метода. [36] |
Здесь помещена фазовая пластинка /, представляющая собою фазовое кольцо, нанесенное на поверхности линзы вблизи заднего фокуса объектива. Свет, рассеянный, диафрагмированный, препаратом ( пунктирные линии), проходит мимо фазового кольца и не претерпевает дополнительного сдвига фазы. Таким образом фазово-контрастное устройство ослабляет интенсивность и задерживает яркий нулевой дифракционный спектр, не внося каких-либо изменений в остальные спектры, благодаря чему в неокрашенных прозрачных объектах становится хорошо видна их структура. Темные и светлые места в фазово-конт-растном изображении соответствуют различной толщине или оптической плотности препарата. Для преобразования невидимого фа-зового изображения препарата в обычное видимое изображение применяются фазово-контрастное приспособление КФ-4 и фазово-темнопольное приспособление МФА-2, которые устанавливают на микроскопах вместо обычного конденсора. [37]
Для исследований методом фазового контраста между микроскопом и фотокамерой вместо фототубуса устанавливается фазо-во-контрастное устройство, как это показано на фиг. Визуальное наблюдение в этом случае производится через окуляр 3, который при настройке освещения заменяется вспомогательным микроскопом. Работа с фазово-контрастным устройством не требует применения специальных объективов. [38]
Зеленые светофильтры используют для увеличения контраста при изучении препаратов, имеющих красную окраску. Кроме того светофильтры полезны при работе с ахроматическими объективами, у которых недостаточно хорошо исправлена хроматическая аберрация для синих лучей. Эти светофильтры применяются также при работе с фазово-контрастными устройствами. [39]
Конденсоры служат для осуществления различных методов освещения препарата, исследуемого под микроскопом, проходящим светом. Конденсоры применяются с рабочими, лабораторными и дорожными моделями биологических и поляризационных микроскопов, а также и с некоторыми другими. Конденсор для наблюдения по методу фазового контраста входит в фазово-контрастное устройство, которое описано в отдельной группе. [40]
Фазово-контрастное устройство с одной кольцевой диафрагмой применяют в тех микроскопах, где имеется конденсор с панкрати-ческой системой. Изменяя фокусное расстояние панкратической системы осветителя, находят такое положение, при котором размер изображения кольцевой диафрагмы становится равным размеру фазового кольца. Для наблюдения структур препарата с большим градиентом оптической толщины применяют фазово-контрастное устройство КФ-5, характерное тем, что используемые в-его объективах фазовые пластинки представляют собой два концентрических фазовых кольца. [41]
Richards, Krabek ( 1954) использовали фазово-контрастную микроскопию для подсчета общего числа бактерий, предварительно сконцентрированных на мембранном фильтре. После высушивания мембранного фильтра ( без окрашивания) готовят препарат и просчитывают бактерии под микроскопом с помощью фазово-контрастного устройства. При подсчете бактерий используют зеленый светофильтр, благодаря которому получается поле зрения спокойного зеленого цвета. Бактерии на зеленом поле выглядят довольно контрастно, как черные точки или палочки различных размеров. [42]
Хотя здесь говорилось о прозрачных объектах, исследуемых в проходящем свете, метод фазового контраста может быть применен и к непрозрачным объектам, исследуемым в отраженном свете. Например, полированные шлифы металлов подвергают предварительному травлению, чтобы можно было различать структуру поверхности. Но если отдельные элементы поверхности создают разные запаздывания фазы отраженного от них света, то с помощью фазово-контрастного устройства эти элементы поверхности могут наблюдаться и без предварительного травления. [43]
Richards, Krabek ( 1954) использовали фазово-контрастную микроскопию для подсчета общего числа бактерий, предварительно сконцентрированных на мембранном фильтре. После высушивания мембранного фильтра ( без окрашивания) готовят препарат и просчитывают бактерии под микроскопом с помощью фазово-контрастного устройства. При подсчете бактерий используют зеленый светофильтр, благодаря которому получается поле зрения спокойного зеленого цвета. Бактерии на зеленом поле выглядят довольно контрастно, как черные точки или палочки различных размеров. [44]
![]() |
Металлографический микроскоп ПМФ фирмы Олимпус. [45] |