Cтраница 1
Фактор инициации IF-2 и фактор терминации RF тоже конкурируют как с EF-TU, так и с EF-G за место посадки. [2]
Все факторы инициации, кроме eIF - 4A и eIF - 4D, по-видимому, РНК-связывающие белки в том смысле, что имеют неспецифическое сродство к любой высокомолекулярной РНК и способны образовывать с ней более или менее стабильные комплексы. [3]
Относительно тех факторов инициации, сродство которых к структуре 5 -концевой последовательности мРНК является решающим для избирательной дискриминации, сведения очень противоречивы. Часто обсуждается возможная роль eIF - 4A, eIF4B и eIF4E, особенно в связи с их вероятным участием в образовании кэпсвязывающего 8 - 10S комплекса СВР-П. [4]
Функционирование факторов терминации, так же как факторов элонгации и одного из факторов инициации, зависит от ГТФ. Для эукарио-тических систем это показано достаточно четко: ГТФ, так же как и его нерасщепляемый аналог, стимулирует кодонзависимое связывание RF с рибосомой, с другой стороны, RF на рибосоме обладает ГТФазной активностью, которая, видимо, нужна для расщепления ГТФ с целью освобождения RF с терминировавшей рибосомы. [5]
С одной стороны, в системах in vitro довольно удовлетворительную инициацию с участием факторов инициации можно получить, используя некоторые N-блокированные аминоацил-т РНК, например, N-ацетилфенилаланил-т РНК ( N-Ac-Phe - tRNAPhe) в системе с поли ( Щ Блокирование NH2 - rpynnbi аминоацильного остатка аминоацил-т РНК необходимо, по-видимому, для взаимодействия с IF-2 и для большей вероятности правильного попадания и ориентации в Р - участке рибосомы, а также для последующей хорошей реактивности с очередной аминоацил-т РНК в А-участке. Однако и это требование не является совсем абсолютным: любая аминоацил-т РНК без факторов инициации может сесть в Р - участок вакантной рибосомы в соответствии с кодоном матричного полинуклеотида, после чего другая аминоацил-т РНК может занять А-участок, и между ними произойдет реакция с образованием первой пептидной связи. Именно так начинается трансляция поли ( и) с участием Phe - tRNA в простейших бесклеточных системах. [6]
У эукариот трансляция инициируется связыванием специфической нагруженной инициа-торной тРНК ( Met-TPHKMet) и факторов инициации с малой рибосомной субъединицей. [8]
Кроме рибосомных белков существуют еще три необходимых для инициации белка, известных под названием факторов инициации: IF-1, IF-2 и IF-3. Последний существует по меньшей мере в двух формах: IF-За и IF-Зр. Роль фактора инициации IF-3 состоит, по-видн-мому, в образовании инициационного комплекса мРНК - 16S - PHK ( рис. 15 - 15, стадия а) и в его стабилизации. Связыванию IF-2 комплекса каким-то образом помогает третий инициирующий фактор IF-1, роль которого до конца не выяснена. [9]
Остальные белки, о которых достоверно известно, что ни взаимодействует с ДНК ( РНК) представлены фактором инициации рансляции ( ir - з), гистидил-т РНК-синтетазой и сигма 1а субъ-диницей РНК-полимеразы. Вероятности отбора этих после-овательностей по случайным причинам приведены в Таблице 2, ни тоже малы. [10]
В 1971 г. в сборнике Methods in Enzymology была опубликована серия статей, посвященных методам очистки и фракционирования факторов инициации, элонгации и терминации белкового синтеза. В них описано использование для этих целей оксиапатита - как в варианте ступенчатой элюции с колонки, так н в объеме. [11]
Далее фиксированная на ини-циаторном кодоне малая рибосомная субчастица присоединяет к себе большую рибосомную субчастицу; это событие сопровождается гидролизом ГТФ на факторе инициации ГР-2 или еГР - 2, уходом этого фактора и гуанозиндифосфата ( ГДФ) с рибосомной частицы. [12]
Осуществлению этого процесса, который требует участия гуанозинтрифосфата ( GTP), способствуют три специфических белка, присутствующие в цитозоле и называемые факторами инициации. [13]
Цинк является составной частью большого числа ферментов нуклеинового обмена, в частности ДНК - и РНК-полимераз, обратной транскриптазы, терминальной дезоксинуклеотидтранс-феразы, тРНК - синтетазы, фактора инициации трансляции и некоторых других [ Vallee В. В состав ряда этих ферментов, кроме цинка, входят также магний и марганец. Целостность рибосом, связывание тРНК и сохранение их структуры также требуют наличия ионов металлов. [14]
На второй стадии процесса инициации ( рис. 29 - 14) размер комплекса, состоящего из 308-субчастицы, IF-3 и мРНК, увеличивается в результате соединения с фактором инициации IF-2, уже связанного с GTP и с инициирующей К-формилметионил-т РНК, которая попадает точно на инициирующий кодон. [15]