Cтраница 1
Денатурирующий фактор, если его действие не очень интенсивно, вызывает денатурационное превращение лишь у части молекул белка; одновременно он обусловливает стабилизацию другой части этих молекул. [1]
НК обладают различной устойчивостью к денатурирующим факторам. [2]
Перед окрашиванием этой смесью микроскопический препарат обрабатывают РНК-азой, лишенной про-теолитической активности, после чего подвергают воздействию одним из денатурирующих факторов и окрашивают смесью метиловый зеленый-пиронин. [3]
К способам первого типа относятся: а) высушивание белка; б) понижение температуры; в) изменение рН среды, приводящее или приближающее белок к точке наибольшей устойчивости; г) повышение концентрации белка; д) повышение давления в определенных пределах; е) денатурационная стабилизация - изменение конформации белка, возникающее под влиянием денатурирующего фактора и обусловливающее повышение стабильности макроструктуры. [4]
Студни альбуминов и глобулинов, подобные желатиновым, возникают только после денатурации в резко кислой или в резко щелочной среде. Под влиянием этих денатурирующих факторов внутренние связи, цементирующие глобулу, разрушаются, свернутая в глобулу молекула под влиянием теплового движения развертывается, при этом оголяются гидрофобные боковые цепи. [5]
Изменяется асимметрия глобулярных молекул многих белков. Гинзбург, под воздействием мочевины, как денатурирующего фактора, степень асимметрии молекул некоторых видов растительного белка увеличивается вдвое. Это характерное для денатурации белка явление говорит о существенном изменении структуры белковой молекулы. [6]
Изменяется асимметрия глобулярных молекул многих бел-ков. Гинзбург, под воз-декствием моч евины, как денатурирующего фактора, степень асимметрии молекул некоторых видов растительного белка увеличивается вдвое. Это характерное для денатурации белка явление говорит о существенном изменении структуры белковой молекулы. [7]
ДНК компактной части хроматина извлекается 1 - 2М NaCl. Она плотно упакована белками и более устойчива к денатурирующим факторам. Эта часть ДНК названа нами стабильной. [8]
Весьма интересной в теоретическом отношении, а возможно и в технологическом, является так называемая денатурационная стабилизация. Здесь повышение устойчивости макроструктуры возникает, как это на первый взгляд ни странно, под влиянием денатурирующего фактора. Термин денатурационная стабилизация отражает и то, что стабилизация белка происходит по отношению к денатурирующему воздействию и под влиянием последнего. [9]
Изменяются и молекулярно-кинетические свойства белков, зависящие от величины и формы их частиц. При денатурации таких белков, как сывороточный альбумин и глобулин, яичный альбумин и р-лактоглобулин, под действием различных денатурирующих факторов - крайние значения рН, обработка мочевиной и др. - сильно увеличивается удельная вязкость, наблюдается увеличение коэффициента диссимметрии и величины двойного личепреломления в потоке, а также уменьшение константы диффузии. Все это служит указанием на то, что при денатурации глобулярных белков происходит увеличение асимметрии белковой молекулы, обусловленное переходом от упорядоченной компактной глобулы к беспорядочному клубку. [10]
Свернутые пептидные цепи разворачиваются, а затем снова свертываются. В зависимости от способа денатурации разобщенные цепи могут либо остаться в развернутом состоянии, либо свернуться иным способом с образованием новой конфигурации, либо ( например, при удалении денатурирующего фактора) вновь принять первоначальную специфическую конфигурацию. В настоящее время доказано, что денатурацион-ное изменение молекулы белка при соответствующих условиях полностью обратимо. [11]
В случае РНК, обладающих жесткой вторичной структурой ( содержащих одно - и двухцепочечные участки), электрофорети-ческая подвижность в геле зависит не только от размеров их молекул, но и от их состава и нуклеотидной последовательности. Этот эффект может быть использован в практических целях, особенно при попытке разделить одинаковые по размерам, но различающиеся по нуклеотидному составу виды РНК - В этом случае можно варьировать содержание денатурирующего агента в геле либо даже вообще исключить денатурирующие факторы. С другой стороны, чтобы с помощью гель-электрофореза определить молекулярную массу РНК, необходимо предварительно разрушить ее вторичную структуру. [12]
Денатурирующий фактор, если его действие не очень интенсивно, вызывает денатурационное превращение лишь у части молекул белка; одновременно он обусловливает стабилизацию другой части этих молекул. В основе явления лежит, по-видимому, способность нативной макроструктуры к некоторым конформационным изменениям ( переходам), происходящим при сохранении нативного типа укладки цепей. Можно полагать, что при денатурационной стабилизации в молекуле белка образуется измененная сеть связей повышенной прочности. Под влиянием денатурирующего фактора ( например, нагревания) часть слабых связей разрывается, но так, что основной тип укладки цепей сохранен. [13]
Высокие дозы физиологически активных веществ вызывают лишь кратковременное появление или увеличение количества лабильной ДНК. Вслед за этим наблюдается исчезновение пиро-нинофилии ядра и усиление его метилофилии. При действии гербицида это сопровождается аномальными митозами и амитозами, которые приводят к образованию крупных и фрагментиро-ванных ядер. В дальнейшем ядра активно делящихся клеток деградируют, ядра дифференцированных тканей сохраняются. Их хроматин остается метилофильным и переходит в особо прочное состояние; он богат гистонами; его ДНК можно перевести в пиронинофильное состояние только при сильном воздействии денатурирующими факторами. [14]
Двухцепочечные структуры ДНК при нагревании, экстремальных значениях рН, обработке мочевиной могут переходить в форму неупорядоченных клубков - денатурироваться. Молекулы нуклеиновых кислот максимально поглощают ультрафиолет при 260 нм за счет поглощения азотистых оснований. Раствор натив-ной ДНК имеет при 260 нм оптическую плотность на 40 % ниже оптической плотности смеси нуклеотидов -, гиперхромный эффект. Денатурация обратима, если остались спирализованные участки ДНК. Восстановление структуры ДНК после удаления денатурирующего фактора ( за счет комплементарного спаривания оснований нуклеотидов) называется ренатива-цией ДНК. На явлении денатурации ренативации основан метод гибридизации. [15]