Фильтрат - кровь
Cтраница 1
Фильтраты крови, не содержащие метилового спирта, дают слабый коричневый оттенок. В связи с этим перед проведением исследования целесообразно проделать определение с образцами крови ( или мочи - если исследуется моча), заведомо лишенными метилового спирта и содержащими его. [1]
В безбелковом фильтрате крови глюкозу окисляют желе-зосинеродиетым калием. Избыток железосинеродистого калия, не вступивший в реакцию с глюкозой, восстанавливают йодистым калием. Свободный йод, выделившийся в количестве, эквивалентном избытку железосинеродистого калия, оттитровывают гипосульфитом. Количество сахара в крови вычисляют по данным титрования с помощью специальной таблицы. [2]
Так как фильтраты крови всегда обнаруживают некоторую флюоресценцию и без окисления, то, чтобы исключить влияние этих примесей, мы считаем необходимым вести одновременно с указанным такое же параллельное определение, но без окисления красной кровяной солью. К этому извлечению мы и прибавляем по каплям стандарт, все время сравнивая под черной лампой. Количество прибавленного стандарта соответствует количеству связанного и свободного витамина в данной пробе. [3]
Помещают 5 00 мл фильтрата крови в пробирку из стекла пирекс размером 25X200 мм с метками 35 и 50 мл. Добавляют 1 мл рабочей смеси кислот и 3 стеклянных шарика. Интенсивно кипятят при нагревании на микрогорелке до заполнения пробирки густыми белыми парами. Для этого обычно требуется от 3 до 7 мин в зависимости от величины пламени. Уменьшают интенсивность нагревания почти до прекращения кипения, значительно уменьшив высоту пламени. [4]
В пробирку помещают 5 мл мочи или безбелкового фильтрата крови. При желании определить сумму ацетона и ацетоуксусной кислоты следует добавить каплю серной кислоты концентрации 1: 1; для определения только ацетона серную кислоту добавлять не следует. На ватный тампон помещают одну каплю 1 % раствора ванилина и две капли 10 % раствора едкого натра; затем пробирку с исследуемым образцом закрывают ватным тампоном, как пробкой, причем сторона с нанесенными каплями реактивов должна быть направлена вниз. Пробирку в строго вертикальном положении помещают на 5 мин в кипящую воду. В присутствии ацетона реактив на ватном тампоне приобретает желтый, желтовато-красный или красноватый цвет в зависимости от количества ацетона. Этот тест обладает высокой чувствительностью, превосходящей чувствительность предыдущих тестов. [5]
 |
Пробирки, для определения мочевины уреазным способом. [6] |
Прямое определение ( без предварительного перевода аммиака из фильтрата крови в раствор кислоты) мы не рекомендуем, так как фильтрат крови и без обработки уреазой часто дает желтое окрашивание с реактивом Нес-слера, для поправки на которое нужно отдельное определение. Кроме того, необходимо в этих условиях прибавление раствора гуммигатти ( или гуммиарабика), без которых фильтрат крови дает с реактивом Несслера осадок. [7]
Таким же образом поступают с 5 00 мл фильтрата крови ( приготовление см. стр. [8]
Помещают 2 - 3 мл исследуемой мочи или безбелкового фильтрата крови в пробирку, добавляют 200 - 400 мг смеси нитропруссида с сульфатом аммония, тщательно взбалтывают и сверху осторожно наслаивают крепкий раствор аммиака. В присутствии ацетона, а также ацетоуксусной кислоты на границе жидкостей быстро развивается пурпурное окрашивание, достигающее максимальной яркости через 2 - 3 мин. В дальнейшем окраска постепенно переходит в темно-коричневую. В зависимости от количества ацетона пурпурная окраска может принимать различные оттенки от очень слабо пурпурного до темного. [9]
Отмеривают в две пробирки по 0 5 мл безбелкового фильтрата крови и в две другие - по 0 5 мл содержимого контрольных проб. Добавляют во все пробирки по 1 мл концентированной серной кислоты, отмеривая кислоту с помощью мерного цилиндра, и по2 мл антроно-вого реактива. Содержимое пробирок аккуратно перемешивают во избежание разбрызгивания. Смесь при этом сильно разогревается. Пробирки быстро опускают в кипящую водяную баню на 10 мин, предварительно закрыв пробирки кусочками фольги вместо пробок. [10]
Для определения общих кетонов в крови берут 20 мл фильтрата крови, 3 мл серной кислоты и 5 мл сульфата ртути, а при исследовании мочи к 4 мл фильтрата мочи прибавляют 14 мл воды, 3 мл серной кислоты и 5 мл сернокислой ртути. Затем эту смесь в колбочке с пришлифованным холодильником нагревают до кипения. В кипящий раствор вливают 2 мл бихромата и по-сяе этого кипятят еще 30 минут. Затем охлаждают до комнатной температуры и прибавляют 2 мл раствора ацетата, 1 - 2 капли сульфита и 5 мл раствора йодистого калия. Последний должен быть отмерен очень точно и его должен быть избыток, что видно по бесцветности раствора. Тогда устанавливают величину избытка KJ, титруя М / 20 сулемой на темно-синем фоне до появления оодающе-гося красного осадка. К онец титрования зависит - от рН, почему нужно точно сохранять указанные соотношения объемов. [11]
В парные кюветы колориметра ( можно и R одинаковые пробирки) помещают по i мл исследуемого фильтрата крови. [12]
С помощью капиллярной пипетки вводят в колбу А ( см. рис. 86) анализируемый раствор, например фильтрат крови, не содержащий Сахаров и лактата цинка. В колбу добавляют 100 X раствора катализатора. Пипетки промывают 2 - 3 мл дестиллированной воды. Промывные воды вводят в колбу А, заполняя ее приблизительно наполовину. Воздух, предварительно пропущенный для очистки через концентрированный раствор щелочи, поступает под небольшим давлением в трубку Е и проходит через прибор. Скорость пропускания воздуха должна быть такой, чтобы через приемник Д проходил приблизительно один пузырек в секунду. Давление воздуха можно точно устанавливать с помощью регулятора давления, впервые использованного Преглем при определении углерода и водорода. Скорость кипения должна быть такой, чтобы пары конденсировались только в нижней части обратного холодильника на расстоянии 2 - 3 см от конца. После того как скорость кипения и скорость пропускания воздуха установлены правильно, добавляют в приемник Д приблизительно 50 X раствора бисульфита натрия. Затем вводят в воронку В приблизительно 90 X 0 04 М раствора перманганата калия. В течение приблизительно 20 сек. Перегонку и пропускание воздуха продолжают в течение приблизительно 10 мин. После этого прекращают нагревание, продолжая пропускать воздух, для того чтобы предотвратить возможный переброс раствора из приемника Д в колбу А. [13]
 |
Пробирки, для определения мочевины уреазным способом. [14] |
Прямое определение ( без предварительного перевода аммиака из фильтрата крови в раствор кислоты) мы не рекомендуем, так как фильтрат крови и без обработки уреазой часто дает желтое окрашивание с реактивом Нес-слера, для поправки на которое нужно отдельное определение. Кроме того, необходимо в этих условиях прибавление раствора гуммигатти ( или гуммиарабика), без которых фильтрат крови дает с реактивом Несслера осадок. [15]
Страницы: 1 2