Cтраница 1
Липидный фосфор: 0 5 - 1 0 мл бензольного фильтрата ( содержащего 1 - 4 мг Р) отмеривают в пробирку 16 X 160 мм, бензол отгоняют, погружая дно пробирки в воду при 60 и слегка продувая воздух. Сжигают с 0 5 мл концентрированной серной кислоты и 2 каплями 10 % - ной перекиси водорода. Сжигание ведут сначала с одной серной кислотой 5 минут, потом дают остыть, прибавляют 1 каплю перекиси водорода и снова нагревают. Повторяют добавление перекиси и сжигание. [1]
Нормальное содержание липидного фосфора в сыворотке крови взрослого человека обычно колеблется в пределах от 6 1 до 14 5 мг / дл. [2]
Для минерализации липидного фосфора в видоизмененную колбу Кьельдаля ( Жуков, Верещагин, 1970) пипеткой на 5 мл вносили точный объем ( содержащий 10 - 20 мг) раствора липи-дов, шлиф колбы смывали хлороформом и растворители выпаривали на кипящей водяной бане в течение 5 - 10 мин. [3]
Растворитель отгоняют, как при липидном фосфоре - можно отгонять сразу в 6 пробирках. Слишком долго не нагревать, чтобы не изменились жирные кислоты. Когда растворитель отогнан, досушивают в эксикаторе с серной кислотой и высоким вакуумом. После этого можно хранить несколько часов без изменений. [4]
Общее содержание фосфолипидов определяют по концентрации липидного фосфора. Полученное число и есть содержание общих фосфолипидов. [5]
В схеме предусмотрено одновременное определение в анализируемом материале кислотораствори-мого и липидного фосфора. [6]
Фосфатидилинозит присутствует почти во всех животных тканях ( 5 - 10 % липидного фосфора), многих растительных тканях и в ряде микроорганизмов. Больше всего полифосфоинозитидов содержится в нервных тканях. В мозге млекопитающих они составляют около половины фракции инозитсодержащих фосфолипидов. [7]
При ежедневном в течение первого полугодия отравлении по 4 мг / кг и по 8 мг / кг в течение второго полугодия - у крыс изменилась активность пероксидаз и холиа-эстераз в крови, уменьшилась печень и снизилось в ней содержание гликогена и липидного фосфора. [8]
Определение фосфора в крови делается очень часто, особенно в детских учреждениях. Фосфор содержится в крови в нескольких формах: 1) неорганические фосфаты; 2) органический фосфор, растворимый в кислотах; 3) липидный фосфор; 4) органический, не растворимый в кислотах ( белковый), фосфор. [9]
Для этих целей возможно использовать многие методы, поскольку липиды во всех случаях подвергаются минерализации. Существенным моментом является лишь трудность минерализации образцов, в которых фосфо-пипиды составляют лишь небольшую долю в сравнении с триглицеридами. Часто для ускорения минерализации используют хлорную кислоту [2], однако, увеличив время минерализации, можно применять и серную. Полученные величины содержания липидного фосфора умножают на усредненный лецитиновый коэффициент 25 и находят суммарное количество фосфолипидов. [10]
Остаток в пробирке снова суспензируют с 10 мл метанола в течение 5 - 6 минут, добавляют 10 мл хлороформа и кипятят с обратным холодильником на водяной бане в течение 30 мч-нут. Затем центрифугируют при 3000 об. мин в течение 15 м и-нут. Центрифугаты ( 1 - й и 2 - й) соединяют в мерной колбе и доводят экстрагентами до метки. В двух параллельных пробах по 20 - 30 мл после сжигания определяют липидный фосфор. [11]
При проведении препаративных работ хроматография на окиси алюминия имеет ряд преимуществ по сравнению с хроматографией на силикагеле: требуются меньшие объемы растворителей, скорость тока через колонку выше. Для хроматографии фосфолипидов используют окись алюминия IV степени активности. При выделении больших количеств фосфолипидов используют стеклянные колонки с отношением диаметра к длине, равным 1: 2 5, в которые помещают до 1000 г адсорбента. Нагрузка колонки не должна превышать 0 5 мг липидного фосфора на 1 г адсорбента. [12]