Передний фронт - пик
Cтраница 2
 |
Очистка шлазмид-ной ДНК от РНК гель-фильтрацией на колонке сефакрила S-300. [16] |
Еще более крупнопористую жесткую матрицу - сефакрил S-1000 - недавно было предложено использовать для быстрой препаративной очистки ДНК плазмид от примеси ДНК бактерии-хозяина. Последняя при гель-фильтрации на указанной матрице выходит на переднем фронте высокомолекулярного пика ДНК, и ее можно отбросить. [17]
Эффективность колонки была равна 171 000 теоретических тарелок при расчете по пику метил-бегената. При перегрузке колонки передний фронт пиков размывался, а задний становился крутым. [18]
Ко) должны диффундировать с большей скоростью, чем более тяжелые компоненты. На скорость диффузии влияет и плотность газа-носителя. Чтобы перенести сквозь колонку не абсорбирующееся в ней соединение, такое, как воздух, требуется определенный объем газа-носителя. Высокочувствительные детекторы, необходимые для большинства незаполненных колонок, не чувствительны к воздуху, поэтому величину tM обычно оценивают по переднему фронту хро-матографического пика метана, поскольку при умеренных температурах метан характеризуется пренебрежимо малым значением KD. Величину tM можно вычислить и по параметрам удерживания трех членов гомологического ряда ( см. разд. [19]
Появление асимметричных пиков может вызываться не только нелинейностью изотермы сорбции, но и другими причинами: экспоненциальным вводом пробы, адсорбцией на твердом носителе, энтальпий-ной перегрузкой. При малых концентрациях вещества выделяется незначительное количество тепла, что не вызывает заметных изменений температуры насадки. При больших концентрациях эти изменения становятся значительными и искажают форму пика. В адиабатических условиях температурная кривая совпадает по форме с кривой распределения концентраций: увеличение температуры, вызванное адсорбцией вещества, точно равно снижению температуры при его десорбции на заднем фронте пика. Однако выделяющееся тепло частично теряется в окружающую среду, и при десорбции температура опускается ниже первоначальной; на термограмме возникает отрицательная область, площадь которой пропорциональна тепловым потерям. Поскольку в области максимума пика наблюдается наибольшая температура, его движение ускоряется. В результате передний фронт пика обостряется, а задний размывается - пик делается асимметричным. [20]
Страницы: 1 2