Ход - выделение
Cтраница 3
Метод Холли [14], включающий дополнительную депротеинизацию смесью фенол - додс-шшсульфат натрия, считается одним из лучших. Если РНК в ходе выделения подверглась действию нуклеаз или горячей разбавленной щелочи ( как это делается при выделении РНК но методу Крестфильда 15 ]), то при последующем хроматографировании с колонки перед первой фракцией тРНК будет выходить большое количество материала, поглощающего в УФ-свето. Если же тРНК выделяли в присутствии многовалентных катионов ( Mg, стрептомицин, полиамины), то перед хроматографированием такие препараты рекомендуется предварительно обессолить путем гель-фильтрации на сефадексе G-25 в присутствии 0 01 М № 2 - ЭДТА. При высокой концентрации этих катионов тРНК может элюироваться с колонок преждевременно. [31]
 |
Схема образования трещин под действием сип поверх-постного натяжения. [32] |
Образование и распространение в коксовом пироге всех продольных трещин Н. С. Грязнов и Е. М. Тайц объясняют двумя факторами. Первый их них - это различная скорость усадки смежных слоев полукокса. Различный темп усадки непосредственно связан с ходом выделения летучих веществ. [33]
Важной характеристикой методов детекции является их селективность. Большие возможности повышения селективности описанных выше методов открывает использование ферментативных реакций. Следует рассмотреть два основных случая. Первый - это определение присутствия и количества фермента по его ферментативной активности, например его содержания во фракциях по ходу выделения. Очевидно, что регистрация ферментативной активности в некоторых фракциях дает существенно более значимую информацию, чем простое определение присутствия белка, даже если обнаруживаемый фермент обладает специфическими особенностями, например является флавопротеином с характерным для флавиновых нуклеотидов спектром йоглощения. Такое поглощение будет наблюдаться и в случае смеси нескольких флавопротеинов с разными биологическими функциями. В большом же числе случаев фермент состоит только из белка и по своим спектральным характеристикам существенно не отличается от других белков, находящихся в этом же самом материале. [34]
С другой стороны, при работе с металлосодержащими производными тетрапиррола необходимо избегать условий, благоприятствующих деметаллированию этих комплексов. Большинство металлопорфиринов с трудом подвергается деметаллированию, однако это правило имеет и некоторые исключения. Например, магнийсодержащие порфирины теряют ион металла в присутствии даже следовых количеств соляной кислоты, которые содержатся в хлороформе, а также под воздействием сульфата магния, иногда используемого в качестве осушителя. Легкость деметаллирования магнийсодержащих хлорофиллов и бактериохлорофиллов с образованием соответствующих феофи-тинов создает одну из основных проблем, с которой приходится сталкиваться в ходе выделения и хроматографического разделения пигментов фотосинтезирующих клеток. [35]
Сведения об этих величинах немногочисленны. Поэтому уравнения (8.2.21) и (8.2.22) невозможно интегрировать в общей форме. Данные уравнения удобны тем, что основные их параметры характеризуют не отдельные фазы системы, а всю систему в целом. Это дает возможность судить о сокристаллизации по изменениям, которые происходят в окружающей среде в ходе выделения твердой фазы. Энергии GT и G, характеризующие отдельные фазы системы, входят в уравнения (8.2.21) и (8.2.22) в виде вторых производных, что также удобно, если анализируется поведение небольших количеств примеси. [36]
Казаны выполняются клепаными или сварными из трехмиллиметрового железа с геометрической емкостью 0 68 ж3, в которую помещается 0 5 - 0 55 ж3 ( 75 - 80 кг) бересты. Казаны обмурованы в простейшем печном устройстве, обогреваемом колосниковой топкой. Охлаждается парогазовая смесь в трубчатом холодильнике. Для приема конденсата имеется небольшой сборник, для отстаивания деревянный чан-отстойник. Запрессованную бересту пакетами вертикально ставят в казан через загрузочную дверку. В первый период, до появления капель дистиллята, процесс ведут интенсивно, далее до окончания - умеренно, по ходу выделения сырого дегтя. [37]
Щелочный раствор, полученный в результате промывки эфирного экстракта, подкисляют и затем извлекают эфиром. После отгонки эфира получается небольшое количество маслянистого вещества, которое нагревают с абсолютным спиртом в течение 1 часа в колбе с обратным холодильником. После отгонки спирта остается очень небольшое количество масла, которое медленно затвердевает. Полученное вещество обрабатывают раствором соды, и после перекристаллизации из спирта получают тонкие, красивые иглы, которые плавятся при 65 - 66 и не дают понижения точки плавления в смеси с Ф - эфиром бензальдегид-о-карбоновой кислоты, приготовленной другим способом с целью идентификации нашего продукта. Щелочный раствор, полученный в результате обработки продукта, остающегося после отгонки спирта, подкисляют соляной кислотой и вновь извлекают эфиром. После отгонки эфира получается 0 68 г бензойной кислоты ( 1 4 % от теории), несколько загрязненной фталевой кислотой. Ход выделения и разделения продуктов электролиза представлен на приведенной выше схеме. [38]
Страницы: 1 2 3