Высокоскоростная хроматография

Cтраница 2

Применение быстродействующего хроматографа в качестве контрольного прибора делает ненужными некоторые рабочие пробы, так как при этом можно непосредственно измерять легкий компонент в остаточном продукте или тяжелый компонент в головном продукте. При помощи высокоскоростной хроматографии нарушение в температурном режиме независимо от его причины исправляется немедленно. [16]

ППС с тонким пористым слоем рекомендованы для высокоскоростной хроматографии, тогда как сорбенты с более толстым слоем обладают повышенной емкостью и более высокой разделительной способностью. [17]

Значение k, равное 1, получается, когда удерживание в два раза превышает то, которое наблюдается в случае воздуха, и, поскольку большинство анализируемых соединений выходит позднее, колонки обычно работают в области, лежащей вправо от максимума, показанного на рис. V-2. Значения k между 0 и 1 представляют интерес для высокоскоростной хроматографии, и в связи с этим член GI можно рассматривать как константу времени, которую желательно сделать минимальной и измерять в секундах. [18]

Значение k, равное 1, получается, когда удерживание в два раза превышает то, которое наблюдается в случае воздуха, и, поскольку большинство анализируемых соединений выходит позднее, колонки обычно работают в области, лежащей вправо от максимума, показанного на рис. V-2. Значения k между 0 и 1 представляют интерес для высокоскоростной хроматографии, и в связи с этим член Ci можно рассматривать как константу времени, вторую желательно сделать минимальной и измерять в секундах. [19]

Рефрактометр по отклонению ( фирма Waters Associates. [20]

В жидкостной хроматографии применяется и ряд других детекторов, принцип действия которых основан на различии в свойствах подвижной фазы и растворенного вещества. Все эти детекторы требуют тщательного контроля температуры и скорости потока и ряда других компенсаций. Обычно они недостаточно чувствительны, чтобы детектировать следы веществ в высокоскоростной хроматографии, и большинство из них нельзя применять при градиентной подаче растворителя. [21]

В этой главе мы увидели, что ТСХ является простым методом, использующим дешевое оборудование и материалы. Этот метод позволяет быстро проводить не слишком сложные разделения и при разумном использовании обнаруживающих реагентов и значений RF является хорошим аналитическим методом качественного анализа функциональных групп. Однако при расширении области применения ТСХ для более сложных разделений становятся заметными ограничения этого метода, и он проигрывает при сравнении с недавно развитым методом высокоэффективной высокоскоростной хроматографии в колонках, который позволяет более просто контролировать экспериментальные переменные и который, кроме того, можно автоматизировать. [22]

Обычные иониты не пригодны для высокоэффективной или скоростной хроматографии. Освоено производство наполнителей колонок, которые представляют собой сферические частицы с твердой сердцевиной, покрытые тонкой пленкой ионита. Недостатком новых наполнителей является то. В связи с этим высокоскоростная хроматография может быть эффективно использована только при анализе малых количеств веществу то время как для препаративных целей предпочтительнее ионообменная хроматография в ее классическом варианте. [23]

Хотя на химических заводах и в лабораториях используются насосы самых разных типов, только немногие из них применяются для колоночной хроматографии. Насосы некоторых типов могут подавать жидкость только против относительно низких противодавлений ( до 5 или 1О атм) и поэтому непригодны в тех случаях, когда для опта-1 - мальной характеристики необходимы давления большие по меньшей мере на порядок. Ротационные насосы, которые могут подавать жид - - кости по существу без пульсаций, обычно непригодны для подачи небольших объемов при высоких давлениях; перистальтические насосы, которые также обеспечивают относительно устойчивые потоки жидкос-ги, можно использовать только в системах с низким противодавлением. Таким образом, выбор насоса для высокоэффективной высокоскоростной хроматографии в колонке обычно ограничен различными машинами с принудительным вытеснением, в которых движущая сила создается движением плунжера, диафрагмы или сипьфона. Насосы этих типов создают пульсирующий поток жидкости. Преимущество всех насосных систем над системами с использованием сжатых газов состоит в том, что объем элюента, который можно прокачать через систему без перерыва, неограничен. Поэтому насосы особенно подходят для повторяющегося автоматизированного хроматографиро вания в колонках. [24]

Для заполнения полужесткими гелями предварительно готовят суспензию геля в смеси растворителей с тем, чтобы плотность этой смеси равнялась плотности сухого геля. Примером такой смеси может служить смесь перхлорэтилена и толуола. Полученную пастообразную суспензию вводят в колонку потоком выбранного растворителя, и она оседает в колонке плотным слоем. Такие колонки могут применяться для хроматографирования методом высокоскоростной хроматографии. [25]

Сопротивление на вводе в самописец должно по крайней мере в 100 раз превышать выходное сопротивление детектора; кроме того, самописец должен иметь точный измеритель напряжения. Детектор должен иметь нулевой баланс для компенсации фона, создаваемого подвижной фазой. Короткопериодические шумы подавляются главным образом в выходной цепи детектора. При слишком большом разбалансе возникают резкие пульсирующие пики. В высокоскоростной хроматографии форма пиков не меняется, если постоянная времени всей системы не превышает 0 5 с. Для определения постоянной времени прибора в кювету вводят растворы постепенно меняющейся концентрации. Постоянная времени - это время, которое необходимо, чтобы перо самописца достигло 63 2 % величины пика. [26]

Анализируемые вещества разделяются по колонке с ионообменной смолой, затем проходят через реакционную спираль ( реактор), а флуоресценция регистрируется с помощью флуориметра. Схема модифицированного анализатора аминокислот приведена на рис. 32.11. Для работы на одной колонке необходимо три микронасоса: первый - для подачи буферного раствора на колонку; второй - чтобы довести величину рН элюата до значения 9 и третий предназначен для смешивания элюата с реагентом, представляющим собой раствор флуорескамина в ацетоне. Скорость реакции достаточно высока, что позволяет использовать короткую реакционную спираль. Далее смесь проходит через проточную кювету флуориметра, и интенсивность флуоресценции регистрируется самописцем. Одновременно много внимания было уделено выделению продуктов реакции аминов с флуорескамином, обладающих низкой полярностью, для анализа которых могла оказаться пригодной высокоскоростная хроматография. [27]

Страницы: 1 2