Распределительная жидкостная хроматография
Cтраница 1
Распределительная жидкостная хроматография имеет один немаловажный недостаток. [1]
 |
Бумажная хроматография. [2] |
Распределительную жидкостную хроматографию с применением колонок называют распределительной хроматографией на колонках или распределительной колоночной хроматографией. [3]
Термин обратнофазовая распределительная жидкостная хроматография, или, как принято говорить, хроматография в обращенных фазах ( ХОФ; по-английски RFC - reverse phase chromato-graphy), подразумевает обратную картину. Неподвижная жидкая фаза представлена в этом случае органическим растворителем или малополярной водно-органической смесью, а подвижной фазой служит водный раствор буфера или аналогичная смесь, но с большей полярностью, чем у неподвижной фазы. Очевидно, что такая система предназначена для хроматографии веществ, в целом гидрофобных, и фракционирование компонентов смеси идет по степени их гидро-фобности. [4]
В распределительной жидкостной хроматографии обе фазы - подвижная и неподвижная - жидкие, несмешивающиеся друг с другом. Разделение веществ основано на различии в их коэффициентах распределения между этими двумя фазами. Для того, чтобы зафиксировать неподвижную жидкую фазу в колонке ( или в тонком слое), применяют тонкоизмельченный твердый пористый носитель, который удерживает эту фазу на своей поверхности. Подвижная фаза движется через колонку и вступает в контакт с неподвижной фазой. Поскольку поверхность раздела между двумя фазами очень большая, то имеет место быстрое установление равновесия распределения компонентов смеси между этими двумя фазами. Если компоненты имеют хотя бы небольшое различие в коэффициентах распределения между подвижной и неподвижной фазами, то они движутся в колонке с неодинаковой скоростью и при достаточной длине колонки происходит их полное разделение. [5]
 |
Влияние размывания полос на разделение пиков. [6] |
В распределительной жидкостной хроматографии коэффициент разделения называют коэффициентом распределения, в хроматографии исключения ( ситовой хроматографии) - коэффициентом исключения, в адсорбционной жидкостной хроматографии - коэффициентом адсорбции, в ионообменной хроматографии и гель-проникающей хроматографии - коэффициентом разделения. [7]
 |
Влияние размывания полос на разделение пиков. [8] |
В распределительной жидкостной хроматографии коэффициент разделения называют коэффициентом распределения, в хроматографии исключения ( ситовой хроматографии) - коэффициентом исключения, в адсорбционной жидкостной хроматографии - коэффициентом адсорбции, в ионообменной хроматографии и гель-проникающей хроматографии - коэффициентом разделения. [9]
Число носителей, пригодных для распределительной жидкостной хроматографии, крайне ограничено. Более или менее удовлетворительными качествами обладают такие носители, как особым образом приготовленный силикагель, очищенный крахмал, целлюлоза. Особое место в качестве носителя занимает фильтровальная бумага. Получение бумажных хроматограмм в распределительной хроматографии рассматривается как особый вид хроматографического анализа и носит название бумажной хроматографии. [10]
Как выполняется количественный анализ методом распределительной жидкостной хроматографии на бумаге. [11]
Тонкослойная хроматография является одним из видов распределительной жидкостной хроматографии. Быстрота разделения смесей, относительная простота и универсальность обеспечили быстрое распространение этого метода, а использование гранулированного сорбента дает ему преимущества перед бумажной хроматографией из-за меньшего размывания пятен в направлении разделения. [12]
По-видимому, в этом случае имеет место не распределительная жидкостная хроматография, а гидрофобное взаимодействие молекул тРНК с самой матрицей агарозы ( вспомним сужение пори проявлениегидрофобности агарозы при кислых значениях рН в крепких солевых растворах - см. гл. Высокая концентрация соли связывает воду, снижает растворимость тРНК в элюенте и способствует ее гидрофобному связыванию с матрицей. Постепенное снижение концентрации СА обеспечивает поочередный в порядке возрастания гидрофобности переход молекул различных тРНК в элюент. [13]
 |
Определение Rf. [14] |
В методе тонкослойной хроматографии в качестве носителя для распределительной жидкостной хроматографии вместо бумаги используют тонкий слой сорбента, нанесенный на небольшую стеклянную пластинку. В качестве сорбентов применяют окись алюминия марки для хроматографии, ештакагель, гипс, кизельгур, целлюлозу. В тонкослойной хроматографии используют растворители, обладающие разной полярностью, в разных соотношениях. [15]
Страницы: 1 2