Cтраница 1
Навеску ДЦГА-ооли Вос-аминокислоты суспендируют в делительной воронке в зтилацетате, используя 400 мл последнего на 20 г соли. Водный нижний слой отделяют и дважды экстрагируют этил-ацетатом. Соединенные вытяжки промывают водой и насыщенным раствором хлориотого натрия, сушат безводным сульфатом магния, и растворитель удаляет в вакууме. [1]
Бели раствор Вос-аминокислоты в зтилацетате плохо отмыт от кислоты, то при его дальнейшем промывании раствором хлористого натрия в осадок начинает выпадать слабо растворимая соль хлоргидрата дициклогексиламина. [2]
Получение гидразидов Вос-аминокислот достаточно отработано [4], хотя многие из них - низко плавкие соединения и существует некоторая трудность в их очистке. [3]
Для использования в синтезе пептидов их необходимо перевести в свободные Вос-аминокислоты. [4]
Бенуатон и Чен сообщили [361], что при определенных условиях из Вос-аминокислот и карбодиимида вопреки существовавшему мнению образуются 2-алкоксиоксазолоны. Последние, однако, в противоположность оптически лабильным 2-алкилоксазолонам гораздо более устойчивы и конденсируются с аминокомпонентами без рацемизации. [5]
С этой целью силикагель пропитывается полярным растворителем ( ДМФ, ацетонитрил, гексаметилтри-амид фосфорной кислоты ( ГМТАФ) и др.) и адсорбционио нагружается аминокомпонентом. Фиксированный на силикагеле аминокомпонент взаимодействует далее с пентафторфениловыми эфирами Вос-аминокислот, суспендированными в гексане или петролейном эфире. Пептидный синтез происходит в тонком слое полярного растворителя на поверхности силикагеля, в котором реакционные партнеры находятся в высокой концентрации. Избыток активированного эфира удаляют промыванием диэтиловым эфиром. После отщепления Вос-группы с помощью НС1 в дибутиловом эфире проводят следующую стадию конденсации. [6]
Согласно Ребеку [428], ДЦГК-конденсация в условиях твердофазного синтеза протекает через стадию симметричного ангидрида, в то время как в гомогенной фазе в качестве промежуточного соединения доминирует О-ациллактим. Образующаяся дициклогексилмочевина препятствует диффузии внутрь набухшей смолы. Из этих соображений предложен метод Хаге-мейера [429], по которому сначала из Вос-аминокислоты и ДЦГК ( в соотношении 2: 1) получают активированное производное в растворе и после отделения дициклогексилмочевины вводят его в реактор. [7]
Обратное превращение таутомера ( 1106) в азлактон происходит нестереоселектив-но и приводит к рацемизации аминокислотного остатка. Это особенно опасно при твердофазном синтезе, так как в этом случае не используются промежуточные стадии очистки и происходит постоянное накопление диастереомеров в растущей полипептидной цепи. Не существует способов, позволяющих целиком избежать рацемизации. Однако ряд активирующих процедур позволяет снизить степень рацемизации. Наилучшие результаты достигаются использованием ДЦК в смеси с нуклеофильным катализатором, например гидроксибензотриазолом. В этом случае N-ацетиламинокислота ( чаще всего Вос-аминокислота) превращается in situ в активированный эфир, который существенно меньше склонен к образованию азлактона. [8]