Инокулюм

Cтраница 4

Патогенная фаза делится на три стадии: инокуляция, инкубация и инфекция. Инокуляция - передача некоторой формы патогена ( инокулюма) в растение. Патогены могут переноситься самостоятельно ( насекомые) или с помощью переносчиков. У галло-образующих насекомых переносчиком служит взрослая форма; яйцо является инокулюмом. Наиболее действенна борьба с болезнями в стадии инокуляции и инкубации. При наступлении инфекционной стадии растению уже нанесено поражение. [46]

Так как антибиотические вещества являются вторичными ме-тоболитами, то биосинтез их сопряжен с переходом культуры продуцента в идиофазу. Следовательно, здесь целесообразно лимитирование роста продуцента. Таким лимитирующим ингредиентом ( фактором) при биосинтезе пенициллина выступает глюкоза, тогда как при биосинтезе антибиотиков стрептомицетами - фосфаты. Все это важно при компановке питательных сред, подкормке штамма - продуцента в процессе биосинтеза антибиотика. Так, среда для продукции пенициллина ( она же пригодна для накопления инокулюма) включает глюкозу - 1 5 %, лактозу - 5 % ( лактоза снимает катаболитную репрессию глюкозы), аммония сульфат и фосфаты - 0 5 - 1 %, кукурузный экстракт - 2 - 3 %, предшественники антибиотика - фенокси - или фенилуксусная кислота - 0 3 - 0 6 %, мел - 0 5 - 1 %, пеногаситель - 0 5 - 1 %; температуру ферментации поддерживают на уровне 22 - 26 С при рН от 5 0 до 7 5 и аэрации 1 м3 воздуха на 1 м3 среды в 1 минуту; продолжительность ферментации - 4 суток. [47]

Бенлат и TBZ, примененные до заражения стебля, полностью защищали растения. TBZ был более фитотоксичным, чем бенлат, особенно для молодых растений. В другом аналогичном опыте TBZ в концентрации 50 мг на горшок ( рис. 5) тормозил вертициллезный вилт 1 5-месячных растений. Эти опыты показывают, что как бенлат, так и TBZ способны замедлить болезнь или препятствовать ее развитию. Многочисленные опыты, в которых концентрация прививочного материала была повышена до 107 / мл, показывают, что действие бенлата не уменьшалось с повышением концентрации инокулюма. [48]

Смертность гусениц яблонной плодожорки от опы-ливания 1 % - ным препаратом. [49]

Для выделения чистой культуры используют гемолимфу больных насекомых. Предварительно поверхностные части личинок стерилизуют 0 5 % - ным раствором хлорного натрия ( 3 раза по 15 минут), встряхивая их в колбе, с последующей промывкой в дистиллированной воде. Затем фильтровальной бумагой с личинки удаляют оставшуюся воду и прокалывают ее иглой. Вытекающую гемолимфу собирают стерильным тампоном и наносят на поверхность агара. При работе со спорами бактерии каплю гемолимфы наносят на предметное стекло, дают ей растечься по стеклу и после высыхания, до посева спор на среду, пастеризуют инокулюм при 75 С в течение 15 минут. [50]

Особенно хорошо заметны гранулы в период образования спор. Спорангии палочковидные, не вздувшиеся, с закругленными концами. Возбудитель для роста нуждается также в щелочной вытяжке из листьев яблони. В анаэробных средах культура растет под поверхностной окисленной зоной в очень ограниченном слое сильного помутнения, ниже которого в глубь пробирки бактерии проникают лишь в слабой концентрации. На твердой среде в анаэростате образуются небольшие колонии неправильной, хлопьевидной формы, с контуром, напоминающим косу волос, бесцветные, размером 50 - 150 мк. Большинство клеток инокулюма на твердой среде автолизируется и колоний не образует. Колонии образуются главным образом в местах, где оканчивалось растирание инокулюма и агар остался ненарушенным. Рост заметен в течение 3 - 4 дней после посева и продолжается 7 - 10 дней, после чего рост прекращается. Культуры на искусственной питательной среде никогда не образуют спор, однако введением насекомым вегетативных клеток можно вызвать болезнь с характерным укорачиванием тела гусениц. [51]

Это свидетельствует против предположения о токсическом действии включений. В личинках Melolontha melolontha, по данным Юрпэна [101], продуцируется от 2 до 27 млрд. спор на особь. С, получал от одной личинки 6 4 млрд. спор штамма popilliae и 12 - 13 млрд. спор штамма fribourgensis. При этом разные дозы инокулюма, от 10 до 100 млн. спор, давали практически одинаковый средний выход биопродукции. Таким образом, приспособленность возбудителя к определенному виду хозяина имеет очень большое значение. [52]

Для производства биопрепарата следует использовать хорошо спорулирующий штамм гриба, испытанный на основном вредителе, против которого планируется применять препарат. В цитируемой работе автор использовал штамм, эффективный против колорадского ( картофельного) жука. Штамм поддерживается в лаборатории на агаре с суслом. Перед использованием такого материала для инокуляции его следует вынуть из холодильника за несколько дней. Споры с хорошо спорулирующей культуры смывают стерильной дистиллированной водой и полученную суспензию используют как инокулюм. [53]

Страницы: 1 2 3 4