Cтраница 2
При выборе температурного режима работы колонки следует учитывать общее количество неподвижной жидкости, поскольку оно при заданной величине потерь определяет время жизни колонки. [16]
Этот процесс, названный радиальным сжатием, по мнению изготовителей, удобен, позволяет получать воспроизводимые гомогенные слои для препаративной ЖХ, а также удалять пустоты, образующиеся в процессе работы, увеличивая тем самым время жизни колонки. Более того, использование картриджей позволяет быстро перепаковывать колонки или соединять колонки с различной селективностью для последовательных ступеней в методе ЖХ-разделения. [17]
Время жизни колонки для ЖЖХ зависит и от системы, и от условий, при которых колонка работает. Чтобы увеличить время жизни колонки, следует предварительно насыщать подвижную фазу неподвижной, удалять кислород из системы и использовать соответствующую предварительную колонку. Если все эти условия будут тщательно выполняться, колонка может работать месяцами без значительных изменений в характеристиках. [18]
Стоимость становится важным моментом при увеличении масштабов разделения, особенно когда возрастают факторы трудности, требования к чистоте и степени извлечения или минимальному времени разделения. При увеличении стоимости растворителей и насадки следует принимать во внимание время жизни колонок и процессы регенерации и рецикла подвижной фазы. Очевидно, на стоимость значительно влияет оплата рабочей силы. В настоящее время для продуктивности академических исследовательских программ и коммерческих операций важным фактором является общее время разделения. [19]
Колонки с обращенной фазой ли-хросорб хибар - П RP-8 ( диаметр частиц 10 мкм) в сочетании с элюирующей смесью тетрагидрофуран - ацетонитрил - вода ( 3: 67: 30), содержащей 0 1 % уксусной кислоты, являются лучшей системой для разделения близких по свойствам карбоновых кислот. В последнее время применяют предколонки с пораси-лом А для насыщения подвижной фазы соединениями кремния, что позволяет продлить время жизни колонки. Установлено, что использование чистого тетрагидрофурана в качестве компонента подвижной фазы ухудшает разделение пиков. В заключение следует отметить, что с помощью хроматографии на колонке RP-8 не удается разделить 18: 2 А9 ( цис), 12 ( транс) - и 18: 2, А9 ( транс), 12 ( цис) - жирные кислоты. [20]
Для оптимальной стабильности колонки подвижная фаза, предварительная колонка и хроматографическая колонка должны иметь одну и ту же температуру. Желательно, чтобы температура в системе поддерживалась с точностью более чем 0 1 С. Кроме того, оказывая влияние на время жизни колонки, изменения в температуре могут приводить также к значительным изменениям во времени удерживания, а это затрудняет качественную идентификацию и влияет на точность количественных измерений. [21]
В некоторых случаях время жизни колонки оказывается меньше предполагаемого. Причинами тому могут быть сама хроматографическая система, оборудование и используемая методика. Высокая взаимная растворимость жидких фаз обычно уменьшает время жизни колонки из-за увеличения трудностей в достижении равновесия. [22]
Системы с обращенной фазой обычно менее эффективны, чем другие жидко-жидкостные системы, ввиду более медленной диффузии растворенного вещества в более полярных ( и более вязких) подвижных фазах. Кроме того, эффективность колонки также снижается из-за неоднородного покрытия полимерной неподвижной фазой твердого носителя. Чтобы повысить эффективность системы с обращенной фазой, следует отбирать подвижные фазы с наименьшей вязкостью; например, в качестве модификатора предпочтительней использовать метанол, а не изопропанол. Чтобы улучшить массоперенос, температуру колонки, если возможно, также следует поддерживать выше комнатной. К сожалению, повышение температуры при использовании жидких или несвязанных полимерных неподвижных фаз приводит к уменьшению времени жизни колонки. [23]