Cтраница 2
Тип геля выбирают так, чтобы пептид появлялся на выходе колонки вблизи свободного объема. Для этой цели наиболее всего подходят сефадексы G-10, Q-15, G-25 и биогели Р-2 и Р-6. Элюиро-вать удобно летучими буферными растворами, хотя выбор буфера зависит от растворимости пептида. В случае необходимости обессоливание ведут в дистиллированной воде, однако при этом происходит расширение зон, которое может привести к их перекрыванию. Для достижения полного обессоливания необходимо увеличить столбик геля. Пептиды обнаруживают в элюате колориметрически, спектрофото-метрически, а выделяют упариванием при пониженном давлении или лиофилизацией. [16]
К счастью, для каждого конкретного фильма максимальный размер дорожки ( в смысле рис. 7.18) можно сосчитать заранее и выбрать буфер точно такого размера. Однако может случиться, что в дорожке максимального размера будет 16 1-кад-ров, тогда как следующая по размеру дорожка будет содержать всего 9 1-кадров. Возможно, более разумная стратегия заключается в выборе буфера по второй по размеру дорожке. Такая стратегия означает усечение самой большой дорожки при игнорировании одного кадра для некоторых потоков. [17]
Применение ЭВМ для обработки и расчета далных анализаторов аминокислот описано выше. В настоящее время серийно выпускается анализатор аминокислот ( Durrum, D 500), в котором контроль за работой оборудования, а также обработка данных возложены на цифровую вычислительную машину. ЭВМ фирмы Digital Equipment, модель PDP8 / L, программируется либо телетайпом, либо перфорированной бумажной лентой, содержащей кодированные инструкции. Емкость программы составляет 30 стадий на весь процесс разделения и до 16 операций на стадию. После загрузки проб в патроны ( их может быть до 80) ЭВМ контролирует весь процесс анализа: ввод проб, выбор буферов, регенерацию колонки и изменение температуры. Управляющая ЭВМ позволяет сократить длительность отдельных операций приблизительно до секунды, что почти на порядок меньше, чем наименьшая длительность операций в более ранних приборах. При этом, естественно, улучшается и воспроизводимость анализов. Для каждой отдельной аминокислоты, элюируемой с колонки, ЭВМ рассчитывает молярное количество аминокислоты. На печать выводятся также номера пиков и названия аминокислот. Неизвестные пики, т.е. те, времена запаздывания которых не соответствуют аминокислоте, перечисляются наряду с точками вне шкалы или ниже кулевой линии. [18]