Cтраница 1
Выход аминокислот повышается, если вместо гиппуровой кислоты использовать, например, гидантоин или роданин. [1]
Выход аминокислот повышается, если вместо гиппуровой жислоты использовать, например, гидантоин или роданин. [2]
Порядок выхода аминокислот на этой колонке такой же, как и на длинной колонке, заполненной смолой UR-30 ( см. рис. 6), с той лишь разницей, что содержащиеся в пробе цистеиновая кислота, таурин и мочевина будут элюироваться несколько раньше. В условиях данного анализа цистин выходит между пролином и глицином, а гистидин - до лизина. После лизина вымываются аммиак и аргинин. [3]
Соотношение ( 11) позволяет проводить расчет миграционного переноса аминокислот в растворах и судить о скорости выхода аминокислоты из электродиализуемого раствора в применяемых схемах циклирования или периодического оборота. [4]
Установлено, что при конденсации котарнина и его производных - бен-зоилкотарнина и котарнона, а также бензоилгидрастинина с малоновой кислотой и аммиаком в обычных условиях синтеза родионова реакция идет главным образом в сторону образования непредельных кислот; выход аминокислот сравнительно мал. [5]
Калибровочную кривую строят по лейцину ( 0 05 - 0 250 ммоль / мл) при трех разведениях ( 5, 10 и 15 мл) 60 % - ным этанолом. Выход аминокислот рассчитывают по так называемым лейциновым единицам при помощи соответствующих коэффициентов ( см. стр. Для ускорения расчетов удобно пользоваться соответствующей таблицей. [6]
Далее таким же образом определяются аминокислоты, последовательно выходящие из колонки. Последовательность и время выхода аминокислот для данной колонки и условий опыта постоянны. [7]
Семидневную культуру гриба отделяли от культу-ральной жидкости и осторожно промывали 0 1 М фосфатным буфером с рН 5 0 - 1 г мицелия, помещали в 20 мл фосфатного буфера, содержащего 1 мл нейраминидазы, выделенной в Горьковском НИИЭМ из V. Пробы инкубировали 3 часа на качалках при температуре около 30 С, после чего мицелий отфильтровывали, промывали питательной средой и снова помещали в 20 мл питательной среды ( рН 5 8), содержащей 0 05 % растворы аргинина, орнитина или аланина. Параллельно ставился контроль на самопроизвольный выход аминокислот из мицелия гриба во время инкубации. [8]
Очень хороший результат был получен с применением 40 % - HOI о избытка аммиака при 8-часовом нагревании на водяной бане. В этих условиях выход аминокислоты был доведен до 66 %, а выход побочно возникающей непредельной кислоты понизился до 11 % от теоретического. [9]
Соединенные вместе кислотные вытяжки помещают в 3-литровую круглодоппую колбу и кипятят с обратным холодильником в течение 2 час. Чтобы освободиться от некоторого количества смолистых примесей, выпавших в осадок во время гидролиза, смесь обрабатывают 10 г активированного березового угля и фильтруют через воронку Бюхнера. Желтый фильтрат переносят в 3-литровый стакан и при перемешивании от руки толстой стеклянной палочкой приливают к нему через капельную воронку аммиак ( уд. Смесь разогревается, появляется сильный запах бензальдегида, и аминокислота выпадает в осадок в виде желтых кристаллов. Смесь охлаждают до комнатной температуры и кристаллы отфильтровывают на воронке Бюхнера диаметром 15 см. Для удаления хлористого аммония полученные кристаллы промывают небольшими порциями воды ( всего 1 л), а затем последовательно 150 мл этилового эфира, тремя порциями горячего 95 % - ного этилового спирта по 50 мл и, наконец, 500 мл воды. Кристаллы тщательно отсасывают и отжимают. Окончательное высушивание кристаллов производят в вакуум-эксикаторе над фосфорным ангидридом. Выход неочищенной аминокислоты составляет 102 - 116 г ( 34 - 39 % теоретич. [10]
Такая система позволяет получить более четкое разделение. При нанесении образца ( в объеме 40 л) элюат, не содержащий аминокислот, сливают в трап. Анализ ведут методом бумажной хроматографии. Первую колонку, содержащую основные аминокислоты, соединяют с двумя небольшими колонками ( 2 5x20 см и 1 7x13 6 см), также заполненными полистиролом. Профиль элюирования строят по данным хроматографии на бумаге. Объединяют фракции, характеризующиеся наиболее простым составом и максимальным содержанием аминокислот. Эти уже обогащенные смеси вновь фракционируют на сульфокатионите ( Zeo-Karb - 215) в различных условиях или на дауэксе-2 до получения чистых аминокислот. Не представляющие интереса промежуточные фракции отбрасывают. Условия рехроматографии выбирают с учетом состава смеси. Выход аминокислот составляет около 50 % от веса исходного белка. Важно лишь, чтобы смесь не содержала большого количества полисахаридов. [11]