Cтраница 1
Гранулированный гель, применяемый в ГПХ, должен обладать однородной структурой пор, частицы должны иметь сферическую форму и минимальные размеры. Это позволяет малым молекулам свободно диффундировать внутрь геля и обеспечивает быстрое установление диффузионного равновесия. Крупные молекулы остаются во внешнем объеме ( растворителе) и перемещаются по колонке, заполненной гелем, с большей скоростью. Этот эффект приводит к тому, что при элюировании колонки растворителем компоненты полимолекулярной смеси, введенные в колонку, элюируются в порядке уменьшения молекулярного веса. В жидкостной хроматографии наблюдается обратная картина. [1]
Агарозные гранулированные гели применяют для выделения и фракционирования очень крупных молекул, в том числе вирусов, бактериофагов, субклеточных частиц ( например рибосом), белков, нуклеопротеидов, нуклеиновых кислот, полисахаридов. Ог других мягких гелей агарозы отличает более широкие интервалы фракционирования. Агарозы используют также в качестве носителей б иоспецифических сррбентов для аффинной хроматографии ( см. разд. [2]
Поперечносшитые гранулированные гели получают сополимеризацией винил-ацетата СН3СООСНСН2 и бутандиол-1 4-дивинилового эфира СН2СН - О - - ( СН2) 4 - О - - СНСН2 или дивиниладипината в различных соотношениях ( Н е - 11 z W. Широкопористые гели с пределом эксклюзии 20 000 и выше синтезируются в присутствии разбавителя. [3]
Агарозные гранулированные гели ( см. разд. Одно из существенных преимуществ агарозных гелей как носителей для БСС является их практически неограниченная проницаемость для высокомолекулярных веществ. [4]
Разделение пептидов на гранулированных гелях является важным аналитическим методом. Для фракционирования и обессоливания пептидов применяют гели сшитого декстрана, се-фадексы ( Pharmacia, Uppsala, Sweden), и полиакриламидные гели ( Bio-Rad Labs. USA), которые поставляются в виде сферических гранул различного размера и пористости под названием биогель ( Bio-Gel) P ( гл. [5]
В конце восстановления полимер образует гранулированный гель, который может быть легко отфильтрован. [6]
Рейдола [423, 424] использовал для электрофокусировки гранулированные гели, например сефадекс G-75 сверхтонкий или G-200 сверхтонкий фирмы Pharmacia и биогель Р-60 ( - 400 меш) фирмы Bio-Rad Laboratories. [7]
Любая теория, касающаяся поведения на слое гранулированного геля веществ с различными размерами молекул, должна учитывать эти результаты. При экспериментальной проверке каждой новой теории с помощью стандартов следует иметь в виду, что результаты, не прошедшие статистической обработки, нельзя считать достаточно точными. В следующих разделах коротко рассмотрены различные подходы к созданию теории гель-хроматографии и дана их оценка в свете имеющихся экспериментальных данных. [8]
Химический департамент военного министерства САСШ сообщает601, что гранулированный гель ( 8 - 14 отверстий) не меняй своих свойств после 63 адсорбции и испытаний на активность двуокисью азота, причем каждая адсорбция продолжалась 2 - 3 часа. Вслед за этим было произведено 19 опытов по адсорбции и активаций с азотной кислотой; каждая адсорбция продолжалась 16 час. В последнем случае выявилось небольшое падение производительности, что может быть объясняется ошибкой при проведении опыта. Во всяком случае силикагель производит впечатление замечательно стойкого материала. Весьма возможно, что способ, подобный описанному, может быть настолько усовершенствован, что его удастся применить для промышленного производства жидкой двуокиси. [9]
Разделение становится гораздо более эффективным в случае применения гранулированного геля; при этом благодаря значительно большей поверхности диффузионное равновесие устанавливается быстрее. [10]
В 1959 г. в Швеции было освоено промышленное производство гранулированных гелей. [11]
Примерно в это же время было освоено промышленное производство гранулированных гелей, разделение на которых наиболее эффективно. [12]
Метод фракционирования веществ по размерам молекул на колонках с гранулированными гелями часто называют гелевой фильтрацией. Поскольку в данном случае имеет место хроматографический процесс, представляется логичным использовать в названии метода слово хроматография. Термин эксклюзионная хроматография [22] обладает тем недостатком, что в этом случае постулируется еще недоказанный механизм процесса, заключающийся в различной способности веществ в соответствии с размерами молекул проникать в гранулы геля. Крупные молекулы вообще не проникают в набухшие гранулы. [13]
На кривых титрования этой кислоты в отличие от кривых титрования гранулированных гелей не наблюдается перегибов, а после продолжительной промывки в растворе обнаруживается только фосфат-ион, что указывает на медленно протекающий гидролиз данного соединения. Переход из Н - формы в Cs - форму сопровождается потерей 2 5 ммоль воды на 1 мг-экв каждой обменной емкости. Протекание этого процесса подтверждается следующими данными: при нагревании до 250 Н - форма теряет 11 ммоль воды, а Сз - форма - 8 ммоль соответственно на 1 мг-экв емкости. [14]
Па кривых титрования этой кислоты в отличие от кривых титрования гранулированных гелей не наблюдается перегибов, а после продолжительной промывки в растворе обнаруживается только фосфат-ион, что указывает на медленно протекающий гидролиз данного соединения. Переход из Н - формы в Cs - форму сопровождается потерей 2 5 ммоль воды на 1 мг-экв каждой обменной емкости. Протекание этого процесса подтверждается следующими данными: при нагревании до 250 Н - форма теряет 11 ммоль воды, а Сз - форма - 8 ммоль соответственно на 1 мг-экв емкости. [15]