Cтраница 2
В этой реакции электрон, однако, переносится на перекись не с восстановленного глутатиона, а с селенола, который при этом переходит в селенистую кислоту, а затем последняя регенерируется в селенол восстановленным глутатионом. [16]
Глутатион играет большую роль в окислительно-восстановительных процессах в организмах, так как он может служить промежуточным переносчиком водорода. От двух молекул восстановленного глутатиона может отщепляться два атома водорода с образованием молекулы окисленного глутатиона. [17]
SH-группу, как иодацетат, иодозобензоат, n - меркурибензоат. Добавление ци-стеина или восстановленного глутатиона реактивирует фермент. [18]
Элдьярн и Пил [563] рассчитали константы скорости реакции тиол-дисульфидного взаимодействия для восстановленного глутатиона с ци-стамином и N, N - диацетилцистамином. Оказалось, что с восстановленным глутатионом цистамин реагирует в 300 раз быстрее, чем его диацетильное производное. [19]
Аскорбиновая кислота и глутатион - Сильные восстановители и могут восстанавливать - S - S - связи белков, а также функционируют как промежуточные переносчики водорода при окислении некоторых органических кислот в процессе дыхания. Окислительно-восстановительные превращения аскорбиновой кислоты в растениях тесно связаны с ферментативными превращениями окисленного и восстановленного глутатиона. [20]
Фермент глюкозо-6 - фосфатдегидрогеназа ( G6PD) играет критическую роль в образовании и поддержании NADPH. Низкий уровень или отсутствие активности G6PD может привести к тяжелому гемолизу, вызванному лекарствами или ксенобиотиками из-за отсутствия нормального уровня восстановленного глутатиона ( GSH) в эритроците. Дефицит G6PD отмечается у более 300 миллионов людей во всем мире. Более 10 % афро-американских мужчин обладают менее сильным фенотипом, в то время как у некоторых групп населения Сардинии отмечается более сильный средиземноморский тип с частотой один житель из каждых трех. [21]
Для его получения используют ферментативные процессы с культурой Streptomyces fradiae [164]; КоА из кислого куль-турального раствора адсорбируют на активированном угле, элюируют ацето-ноаммиачной смесью, восстанавливают цинком и соляной кислотой для расщепления дисульфидной связи, осаждают солями ртути [158] и после удаления ионов ртути сероводородом очищают хроматографированием на диолите - CSlOO. Для получения КоА с чистотой 75 % используют также дрожжи [157] с применением адсорбции на активированном угле [158, 164] и переосаждения с восстановленным глутатионом. [22]
В организме трансформируется около 20 % адсорбированной дозы. Последний занимает центральное место в метаболизме Ч. У. Его дальнейшее превращение идет по трем путям: через одноэлектронное восстановление при участии цитохрома Р-450 до радикала СС12, который под действием Н2О переходит в НС1 и СО; через окислительные превращения с образованием радикала О-О - СС1, затем НО-ОСС13, который взаимодействует с восстановленным глутатионом и дает НО-СС13, переходящий в фосген; через восстановление до хлороформа. [23]
Присутствующая в цистеине тиольная группа сообщает ему ряд характерных свойств. Цистеин образует меркаптиды с ионами тяжелых металлов, и медные комплексы широко применяются при осаждении цистеина ( или цистина) из белковых гидролизатов. Пептиды цистеина ( восстановленный глутатион) также дают нерастворимые меркаптиды с тяжелыми металлами. [24]
Процесс дегидрохлорирования протекает с участием микросомаль-ных ферментов, ответственных за разрушение и других хлорорганиче-ских соединений. Пентахлорциклогексен быстро расщепляется до малотоксичных и более простых продуктов, поэтому остатки его в тканях отравленных насекомых найти трудно. Реакции образования тиофенолов идут в присутствии восстановленного глутатиона и играют основную роль в процессе детоксикации - у-изомера гексахлорциклогек-сана. [25]
Цистеин не может быть оттитрован меркуриметрически в смесях с глутатионом или белком. Сульфит также мешает определению, и поэтому титрование дисульфида в присутствии сульфита нужно проводить на КРЭ. Вообще меркуриметрическое титрование дает более крутые линии, соответствующие избытку реагента, и, следовательно, более четкие конечные точки, чем аргентометрическое титрование. Меркуриметрическое титрование особенно удобно для определения восстановленного глутатиона, где аргентометрическое титрование дает заниженные результаты, а также для определения биологических материалов, когда необходимо избежать денатурации. [26]
Другой часто встречаемый тип активации состоит в устранении возможного ингибирования фермента в результате добавления определенных веществ. Многие ферменты теряют свою активность при мягком окислении, например кислородом воздуха в присутствии случайно находящихся следов ионов тяжелых металлов. К ним относятся папаин, катепсин и янтарная дегидраза. Ферментативная активность возвращается, однако, под влиянием таких восстановительных агентов, как восстановленный глутатион, цистеин или даже HaS или HCN. Последние являются именно характерными реактивами превращения групп 8 - S в SH. Таким образом, кажется вероятным, что для проявления активности фермента необходимо наличие групп SH, причем их исчезновение в результате окисления в мягких условиях сопровождается потерей ферментативной активности. [27]
Поступает в организм ингаляционно, в / ж и через неповрежденную кожу. При вдыхании животными 71 мг / м3 через 3 ч обнаруживается в крови, головном мозге, печени; через 6ч - в почках, селезенке, брыжейке. После в / ж однократного введения наибольшее содержание - в жировой ткани и печени, наименьшее - в головном мозге и селезенке. Происходит дозозависимое снижение уровня восстановленного глутатиона в печени. Дальнейшие превращения глутатионовых коньюгатов протекают с образованием меркаптуровой кислоты. [28]
Затем приливают 0 05 М раствор HgCl2 в количестве, на 6 - 8 % превышающем необходимое для завершения реакции с восстановленным глутатионом. Через 5 мин избыток удаляют, добавляя 0 6 мл свежеприготовленного 2 % - ного раствора тионалида в ледяной уксусной кислоте. При продувании азота через раствор приливают 5 мл о-ди-хлорбензола. Через 5 мин вводят КРЭ и снимают полярограмму между - 0 7 и - 1 2 в. Хорошие результаты для анализа цистина в присутствии глутатиона вплоть до 0 001 М дает экстраполяция остаточного тока. Количество HgCl2, необходимое для завершения реакции с восстановленным глутатионом, определяют титрованием отдельного образца 0 05 М раствором HgCl2 в том же фоновом электролите, используя КРЭ при потенциале - 0 3 в. Дно сосуда для титрования должно быть покрыто хлороформом, чтобы металлическая ртуть не реагировала со ртутью, находящейся в растворе. [29]
Этот фермент отщепляет от ну-клеотидов фосфатную группу, находящуюся в положении 3, а остатки фосфорной кислоты - в положениях 2 или 5 не затрагивает. Найдено, что З - нуклеотидаза отщепляет от ну-клеотида А 1 моль фосфорной кислоты и что этот процесс протекает примерно с такой же скоростью, как и гидролиз аденозин - З - фосфорной кислоты. В этой реакции кофермент должен находиться в дисульфидной форме, что достигается его перемешиванием или встряхиванием при рН 7 5 до исчезновения запаха меркаптана. Если этого не сделать, то сульф-гидрильная группа ингибирует действие З - нуклеотидазы. В соответствии с этим было найдено, что цистеин и восстановленный глутатион также сильно ингибируют действие этого фермента. [30]