Cтраница 1
Действие эстераз, вероятно, стало в какой-то степени ясным, как и действие любого фермента, благодаря работе Уилсона, Нахмансона и др. Хотя мнения могут различаться по поводу точной природы реакционного пути, представление о циклическом активированном комплексе при учете мезомерного сдвига электронов от донорной к акцепторной группам белка, является теперь распространенным. Вполне вероятно, что такие циклические активированные комплексы встречаются и в других ферментативных реакциях. Если мы постулируем существование в белке проводящего электронного пути между донорными и акцепторными группами, как это сделал, например, Гайз-ман [65], то тогда можно будет ожидать высокой степени резонансной стабилизации активированного комплекса и низкой энергии активации. [1]
Наиболее характерные реакции протекают при действии эстераз, реакции имеют значение при гидролизе фосфорорганических соединений, токсический эффект повышается. [2]
Большое распространение в качестве асимметризующего катализатора получили соединения камфоры, способные моделировать асимметризующее действие эстеразы и альдокетомутазы. [3]
Большое распространение в качестве асимметризующего катализатора получили соединения камфоры, способные модели-ровать асимметризующее действие эстеразы и альдокетомутазы. [4]
В рассмотренных примерах алкалоиды моделировали асиммет-ризующес действие оксинитрилазы, кроме того, они способны воспроизводить действие эстеразы и некоторых других ферментов. [5]
Помимо этого, алкалоиды хины, а также бруцин, никотин и стрихнин способны воспроизводить действие эстеразы и других ферментов. [6]
Несколько иной метод использован Уилсоном и Бергманом [28], которые сравнивали скорость гидролиза диметилами-ноэтилацетата под действием эстеразы угря при рН 6, когда эфир присутствует более чем на 95 % в аммониевой форме, и при рН 10, когда в растворе присутствует одно свободное основание. [7]
Исследования показали, что состав и строение аминоал-канолов существенным образом отражаются на скорости гидролиза эфиров. По мере удаления от холиновых эфиров стойкость препаратов к гидролизу под действием эстераз значительно повышается. Было установлено, что удлинение и разветвление углеродной цепи аминоэтанола задерживает гидролиз под действием эстераз, что имеет место в случае четвертичных производных эфиров я-метил - - амииопропано-ли пли 2, З - диметнл - - пмпиопропапола. [8]
После 30-минутного стояния при комнатной температуре отщепленный и окисленный гваякол определяют колориметрически тем же способом, что и в случае пероксидазы, - окислительная система прибавляется одновременно с раствором крови, чтобы окислять гваякол по мере его отщепления, так как в противном случае действие эстеразы прекращается, вероятно, вследствие тенденции к установлению равновесия. Если употреблять достаточно разбавленный раствор пероксидазы, то в контрольной пробе окрашивания не появляется. [9]
Это, однако, не относится к веществам вроде иодуксусной кислоты или трехвалентного мышьяка, которые соединяются с - SH-группами в любом белке независимо от того, обладает ли он энзиматической активностью. Способность фосфорорганических соединений активироваться эстеразами, вероятно, обусловлена аналогией электронных конфигураций у фосфора и у карбоксильного углерода в субстрате. Было высказано предположение, что действие эстеразы на сложный эфир или на соединение фосфора вклю. [10]
Исследования показали, что состав и строение аминоал-канолов существенным образом отражаются на скорости гидролиза эфиров. По мере удаления от холиновых эфиров стойкость препаратов к гидролизу под действием эстераз значительно повышается. Было установлено, что удлинение и разветвление углеродной цепи аминоэтанола задерживает гидролиз под действием эстераз, что имеет место в случае четвертичных производных эфиров я-метил - - амииопропано-ли пли 2, З - диметнл - - пмпиопропапола. [11]
Если водородная связь с G2 слабая, то гидролитический процесс совершенно не зависит от рН в щелочной области. В последнем случае ароматическое ядро уменьшает электронную плотность у спиртового кислорода в эфирной группе и таким путем способствует уменьшению его сродства при образовании водородной связи. Большое значение имеет тот факт, что эфиры, которые расщепляются под действием одного имидазола, как, например, тиоловые и феноловые эфиры [43], в то же самое время оказываются очень устойчивыми к активирующему влиянию G2 при гидролизе под действием эстеразы угря. С другой стороны, гидролиз эфиров алифатических спиртов, которые не подвергаются катализу под действием имидазола, зависит от водородной связи с G2 - Водородный мостик уменьшает электронную плотность при эфирном кислороде. При разрыве связи С-OR во время расщепления связи ацил-кислород последний атом приобретает отрицательный заряд, тогда как недостаток электронов у атома углерода может быть восполнен путем обобществления электронов с карбонильным кислородом. [12]
В настоящее время в номенклатуре эстераз царит беспорядок главным образом потому, что большинство эстераз чаще всего неспецифично. Так, хотя мы могли бы ( но не будем) определить ароматические эстеразы, как эстеразы, обладающие высоким сродством преимущественно к субстратам, спиртовая часть которых является фенолом, мы допустили бы ошибку, если бы квалифицировали расщепление фенилацетата гомогенатом печени как результат действия ароматической эстеразы. Вероятно, в этом случае небольшая группа ароматических эстераз работала бы совместно с другими ферментами, хотя их специфические субстраты могли быть совершенно иными. [13]
Все соединения, обнаруживающие положительное отклонение от кривой на рис. 1 - 10, являются полифун кциональными ( например, гистамин, 4-окси - 6-аминобензимидазол, 4-оксибензими-дазол, метиловый эфир гистидина), и повышенные - скорости реакций в таких случаях объясняются участием второй функциональной группы в механизме гидролиза эфира. Из соединений, приведенных в табл. 1 - 11, привлекает внимание 4-оксиметилимидазол. Это соединение содержит кислую алифатическую гидроксильную группу, расположенную рядом с имидазольным ядром. Один из наиболее предпочтительных механизмов действия сериновых эстераз включает нуклеофиль-ную атаку сериновым гидроксилом эфирной или амидной карбонильной группы субстрата, в то время как имидазол выступает в роли обобщенного основания. [14]
При этом было показано, что эстеразная активность ферментов весьма мало зависит от природы С-концевого аминокислотного остатка. В то же время эфиры пептидов с С-концевой D-аминокислотой, а также ш-эфиры не способны к ферментативному гидролизу. Протеолитическое расщепление пептидных связей в условиях гидролиза сложных эфиров под действием эстераз очень незначительно ( ср. [15]