Алкогольоксидаза

Cтраница 1

Алкогольоксидаза катализирует окисление первичного алифатического спирта с небольшим числом атомов углерода. [1]

Алкогольоксидаза не содержит марганца, но содержит железо. Она чувствительна к кислотам и окисляет 4 % - ный раствор спирта лучше всего в присутствии мела. [2]

Алкогольоксидаза растворима в воде. [3]

Животная алкогольоксидаза окисляет не только этиловый, но и другие спирты. Легче всего она окисляет этиловый, труднее всего бензиловый спирты. При окислении этилового спирта образуется наряду с уксусной кислотой также и уксусный альдегид. Количество образовавшегося альдегида зависит от условий опыта. Больше всего его образуется при окислении оксидазой спирта в 0.1 % - ном щелочном растворе. Повидимому, окси-даза может также окислять уксусный альдегид в уксусную кислоту. [4]

Иммобилизованную алкогольоксидазу распределяют по поверхности платинового электрода ( Бекман 39273) под найлоновой пленкой, прикрепленной к корпусу электрода эластичными кольцами; электрод хранят в буферном растворе ( 0 1 М фосфатный буфер, рН 8 2) при комнатной температуре. [5]

Электроды с алкогольоксидазой обратимы не только к спиртам, но и к альдегидам, и карбоновым кислотам. [6]

Весьма перспективны такие ферменты микроорганизмов, как холестеринок-сидаза, для определения холестерина в крови, алкогольоксидаза для обнаружения спирта и др. Ферменты используют также для изучения первичной структуры высокомолекулярных соединений: нуклеиновых кислот, белков, полисахаридов. [7]

Изменение силы тока ферментного электрода ( с алко-гольоксидазой, связанной глута-ровым альдегидом во времени в присутствии этанола ( Elsevier Publishing Co. Ltd.. [8]

На рис. 7.1 показано изменение тока ферментативного электрода во времени. Добавленный в буферный раствор этанол диффундирует в слой химически связанной алкогольоксидазы и под Действием растворенного кислорода превращается к перекись водорода и ацеталь-дегид. [9]

Изменение силы тока ферментного электрода ( с алко-гольоксидазой, связанной глута-ровым альдегидом во времени в присутствии этанола ( Elsevier Publishing Co. Ltd.. [10]

Кривая 1 на рис. 7.1 описывает поведение электрода через 7 дней после изготовления, при потенциале 0 6 В по нас. Характер кривой явно свидетельствует об образовании перекиси водорода на иммобилизованной алкогольоксидазе. Однако через 12 дней ферментный электрод не реагирует на присутствие этанола при 0 6 В по нас. [11]

Гюилъбо и Любрано [252] применили алкогольоксидазу для анализа таких спиртов, определяя амперометрически Н2О2, образовавшуюся в результате реакции. Вследствие низкой активности фермента, иммобилизованного методом, применявшимся для иммобилизации глюкозо-оксидазы [253, 254], такая алкогольоксидаза оказалась непригодной для создания ферментного электрода. [12]

Против выводов Виланда Бах4 возразил, что опыты были произведены не с изолированными ферментами, а со всем составом тела бактерий или с цельным молоком. Доказательными опыты Виланда были бы лишь тогда, если бы удалось посредством изолированной алкогольоксидазы окислить спирт в уксусную кислоту как действием метиленовон сини, так и действием кислорода, если бы удалось посредством изолированной пергидридазы окислить альдегиды в соответственные кислоты как действием метиленовой сини, так и действием кислорода. [13]

Большой интерес представляет приведенное Бухнером и его сотрудниками21 доказательство, что уксуснокислое брожение спирта определяется деятельностью оксидазы. Эту оксидазу, которая была названа алко-гольоксидазой, можно получить из убитых ацетоном колоний уксуснокислых бактерий. Указанные авторы нашли в обработанных ацетоном уксуснокислых бактериях оксигеназу, пероксидазу и каталазу, и считают возможным, что алкогольоксидаза не является индивидуальным ферментом. Сок, получающийся при отжатии уксуснокислых бактерий под прессом, не оказывает никакого окисляющего действия на спирт в присутствии воздуха. Таким образом, алкогольоксидаза либо разрушается при приготовлении сока, либо, как нерастворимое вещество, остается в остатке после прессования. [14]

Этот электрод успешно применялся для определения этанола в крови. Ошибка при определении этанола в сыворотке крови может быть обусловлена, во-первых, непосредственной реакцией фермента с другими субстратами и, во-вторых, расходом кислорода на неферментативные реакции, например с аскорбиновой кислотой или цистеи-ном. В первом случае некоторые карбоновые кислоты и оксикислоты ( уксусная, муравьиная, молочная, оксимасляная, пировиноградная и хлоруксусная кислоты) окисляются алкогольоксидазой и тем самым мешают определению спирта в крови. [15]

Страницы: 1 2