Исследование - флуоресценция
Cтраница 2
При изучении кинетики молекулярной фосфоресценции, обычно характеризующейся временем затухания в диапазоне 10 - 3 - 10 с, используют, как правило, импульсные методы. Для исследования флуоресценции в пикосекундном и наносекундном ( 10 - 12 - 10 - 7 с) диапазонах используют импульсные и фазово-модуляционные методы. [16]
При изучении кинетики молекулярной фосфоресценции, обычно характеризующейся временем затухания в диапазоне 10 - 3 - 10 с, используют, как правило, импульсные методы. Для исследования флуоресценции в пикосекундном и наносекундном ( 10 - 12 - 10 - 9 с) диапазонах используют импульсные и фазово-модуляционные методы. Фазовый метод удобен для измерения спектров испускания продуктов реакций, протекающих в возбужденном состоянии. [17]
До сих пор не обращали внимания на то, что кооперативные переносы электрона не обязательно сопровождаются появлением новой полосы в спектре поглощения. При исследовании флуоресценции растворенных веществ часто приходится предполагать, что молекулы, которые в основном состоянии слабо взаимодействуют между собой, образуют комплекс, если одна из них возбуждена. [18]
Первый фактор влияет на заселение возбужденного синглетного состояния. На основании исследований флуоресценции дифенилметанового красителя Остер и Нисидзима [126] пришли к выводу, что процесс внутренней конверсии из первого возбужденного синглетного состояния в основное состояние требует по крайней мере двух степеней свободы вращения одного фенильного кольца по отношению к другому. Понижение температуры увеличивает время жизни возбужденного синглетного состояния в результате подавления этой внутренней конверсии. [19]
 |
Схема лазерной спектральной установки для исследования двойного резонанса. [20] |
Лазерная спектроскопия на основе двойного резонанса и флуоресценции обеспечивает очень высокое разрешение по энергии, например в процессах обмена колебательной энергией между селективно возбужденными и невозбужденными изотопными компонентами смеси в молекулярных газах. В описанных выше экспериментах по исследованию флуоресценции и двойного резонанса роль лазера как источника когерентного излучения состоит в создании селективного возбуждения молекул до определенных энергетических состояний. [21]
Книга Люминесценция органических и неорганических веществ [223] содержит доклады, сделанные на конференции в 1962 г. Исследования органических твердых тел представлены статьями: Времена затухания флуоресценции Шмиллена, Замедленная флуоресценция и фосфоресценция Шпо-нер, Исследования переноса энергии методом тушения Брауна, Ферста и Каллмена и Первичная фотохимическая стадия фотосинтеза Франка, Розенберга и Вайса. Кроме того, в книге имеется много других статей-описывающих результаты исследования флуоресценции и переноса энергии в растворе. Заслуживает внимания отличающаяся новизной статья Лича Спектры люминесценции некоторых замороженных органических радикалов. Рассмотрены спектры флуоресценции радикалов бензила, дейтери-рованного бензила и трифенилметила в низкотемпературных твердых стеклах. Переход из низшего электронного состояния у ароматических молекул часто проявляется слабо. Поэтому для измерения поглощения требуются сравнительно высокие концентрации радикалов. Регистрация же флуоресценции возможна при значительно меньших концентрациях. Спектры люминесценции могут дать полезную информацию о колебательных частотах основного состояния замороженных радикалов. Это важно, так как еще не доказана возможность проведения исследования инфракрасных спектров и спектров комбинационного рассеяния радикалов органических молекул. Интересна также возможность фосфоресценции при переходах из низшего квартетного состояния, которое является аналогом триплетного состояния стабильных молекул. [22]
Qu Qs - 2лд 2лд Gu С нашей точки зрения, большие перспективы в этом направлении открывают исследования флуоресценции молекул красителей, адсорбированных на поверхности ДП-структур. В [72-75] обнаружено, что при заряжении ловушек диэлектрического слоя структур Д - П - адсорбированные молекулы возникают два интересных эффекта. [23]
Одновременно были усовершенствованы также методы макроскопического наблюдения флуоресценции растений, и первоначальные результаты Стокса были подтверждены и дополнены. Особо следует отметить работы Дере и его сотрудников [48, 55], которые выполнили многочисленные спектрофотографи-ческие исследования флуоресценции растений: бурых, зеленых и синих водорослей [26, 32, 37], диатомовых водорослей [28] и зеленых листьев. Целый ряд работ других исследователей [29-31, 35, 36, 40, 41, 44, 46, 47, 54, 56, 58, 59, 61, 63, 66-68] посвящен главным образом изменениям интенсивности флуоресценции, которые сопровождают изменения скорости фотосинтеза. [24]
 |
Дисперсия монохроматоров в приборах разных типов, ммк / мм. [25] |
Очевидно, к этому прибору, так же как и к длиннофокусным камерам ИСП-51, можно сделать приставки с фотоумножителями, однако данных по исследованию флуоресценции таким способом в литературе пока нет. [26]
При отсутствии флюориметра в качестве источника возбуждения флуоресценции может быть использован аппарат Л-80 завода Красногвардеец, который выпускается для люминесцентного анализа витаминов. Светофильтр аппарата пропускает лучи в области 400 - 320 тц. В этой же области флуоресценция порфиринов возбуждается наиболее интенсивно, что особенно проявляется, когда порфирин находится в 5 % растворе соляной кислоты. Исследование флуоресценции проводят в затемненной комнате. Определение ведут в пробирках из простого стекла, но с одинаковым диаметром и толщиной стенок. Путем последовательного разбавления исследуемого раствора, как это делается при спектроскопии в видимой области, доходят до предельной концентрации, при которой флуоресценция перестает определяться. Устанавливают границы разведения для здоровых и с ними ведут сравнение исследуемых проб. [27]
Одним из наиболее поразительных свойств рецепторов сетчатки позвоночных является их высокая чувствительность по отношению к свету. Фотон зеленого света, поглощенный какой-либо одной из миллионов молекул родопсина в адаптированной к темноте палочке сетчатки человеческого глаза, дает четкий сигнал нервной системе по крайней мере в одном случае из трех. Таким образом, представляется, что почти каждая молекула родопсина прямо связана с чувственным выходом рецептора, в котором она находится. Однако на основании своих измерений поляризации флуоресценции химиката, соответствующего родопсину - витамина А - и исследования флуоресценции, вызванной ультрафиолетовым облучением отбеленных палочек сетчатки, они пришли к заключению, что эффект, вероятно, полностью обусловлен вращением молекул. Поэтому перенос энергии между молекулами родопсина в сетчатке представляется маловероятным. [28]
Приливают 10 мл 15 % - ного раствора роданистого аммония для количественного перевода анализируемого раствора в делительную воронку, а также 2 мл пиридина и перемешивают. Затем добавляют 20 мл изоамилово-го спирта и встряхивают в течение 5 минут. После расслаивания жидкости нижний водный слой сливают и отбрасывают, а в воронку приливают 20 мл раствора для реэкстракции и энергично встряхивают в течение 20 секунд. Реэкстракт сливают в стакан, кипятят в течение 2 5 - 3 минут, количественно переводят в мерную колбу емкостью 25 мл ( при содержании цинка более 0 02 % берут колбу для разбавления емкостью 100 мл, а более 0 08 % - 200 мл), доводят до метки водой и перемешивают. Для анализа отбирают в кварцевую пробирку 2 5 мл полученного раствора, приливают при перемешивании 2 5 мл буферного раствора и 0 2 мл 0 01 % - ного ацетонового раствора 8 - ( п-толуолсульфониламино) - хино-лина. После этого раствор перемешивают и через 15 минут определяют интенсивность флуоресценции. Измерение проводят на объективном флуориметре-абсорбциометре ФАС-1 с камерой для исследования флуоресценции в пробирках. Исходя из спектра поглощения и спектра флуоресценции соединения цинка с 8 - ( я-толуолсульфониламино) - хинолином были выбраны скрещенные светофильтры: первичный светофильтр с К 366 нм, вторичный - № 2 в камере для исследования флуоресценции в пробирках с А, 490 нм. [29]
Приливают 10 мл 15 % - ного раствора роданистого аммония для количественного перевода анализируемого раствора в делительную воронку, а также 2 мл пиридина и перемешивают. Затем добавляют 20 мл изоамилово-го спирта и встряхивают в течение 5 минут. После расслаивания жидкости нижний водный слой сливают и отбрасывают, а в воронку приливают 20 мл раствора для реэкстракции и энергично встряхивают в течение 20 секунд. Реэкстракт сливают в стакан, кипятят в течение 2 5 - 3 минут, количественно переводят в мерную колбу емкостью 25 мл ( при содержании цинка более 0 02 % берут колбу для разбавления емкостью 100 мл, а более 0 08 % - 200 мл), доводят до метки водой и перемешивают. Для анализа отбирают в кварцевую пробирку 2 5 мл полученного раствора, приливают при перемешивании 2 5 мл буферного раствора и 0 2 мл 0 01 % - ного ацетонового раствора 8 - ( п-толуолсульфониламино) - хино-лина. После этого раствор перемешивают и через 15 минут определяют интенсивность флуоресценции. Измерение проводят на объективном флуориметре-абсорбциометре ФАС-1 с камерой для исследования флуоресценции в пробирках. Исходя из спектра поглощения и спектра флуоресценции соединения цинка с 8 - ( я-толуолсульфониламино) - хинолином были выбраны скрещенные светофильтры: первичный светофильтр с К 366 нм, вторичный - № 2 в камере для исследования флуоресценции в пробирках с А, 490 нм. [30]
Страницы: 1 2