Cтраница 1
Найденное количество азота ( за нычетом его содержания п фильтре) умножают на пересчетный коэффициент ( 6 25; 6, 8 или 5 7, н зависимости от продукта, который подвергается исследованию), получая таким образом содержание белковых веществ. [1]
Из найденного количества азота в пробе вычитают количество азота в глухой пробе. [2]
Если исследуемое вещество содержит аммиак, его надо предварительно определить обычным способом, например перегонкой в присутствии окиси магния, и вычесть количество азота, соответствующее его содержанию, из найденного количества азота, связанного с формальдегидом. [3]
Следует ожидать, что количество амидного азота, найденное с помощью этого метода, должно быть близким к теоретически вычисленному. При анализе аспарагина и других трудно гидролизуемых амидов, экспериментально найденное количество азота всегда более занижено по сравнению с теоретически вычисленным - чем при анализе глутамина, ацетамида, а также других малоустойчивых веществ. Имеются указания, что это относится также к анализу белков. Если анализируемый образец содержит большое количество мочевины, желательно предварительно выделить ее из раствора или ввести в результат анализа соответствующую поправку, которую вычисляют, определяя аммиак, образующийся в контрольном растворе, имеющем приблизительно такую же концентрацию мочевины. Вероятно, мочевину следует разлагать с помощью уреазы и удалять аммиак из раствора, пропуская через него пузырьки воздуха. Перед гидролизом раствор должен быть сделан щелочным путем добавления буры. Если в анализируемом образце содержится аммиак в виде ионов аммония, следует определить содержание азота аммиака и вычесть это количество из результата определения амидного азота. Кроме того, от аммиака, содержащегося в растворе в виде аммонийных солей, можно освободиться, добавляя к раствору щелочь и пропуская через него перед гидролизом струю воздуха. При этом следует иметь в виду, что при длительном нахождении амида в щелочной среде может иметь место также и его гидролиз, поэтому эту операцию следует проводить как можно быстрее и избегать избытка щелочи. [4]
Эта реакция была использована Ван-Слайком для разработки метода количественного определения аминокислот. Измерив объем выделившегося азота в определенных стандартных условиях и разделив найденное количество азота на два ( исходя из того, что аминокислотам принадлежит лишь половина выделившегося азота), можно определить количество аминного азота, имевшегося в растворе. [5]
Эта реакция была использована Ван-Слайком для разработки метода количественного определения аминокислот. Измерив объем выделившегося азота, в определенных стандартных условиях и разделив найденное количество азота на два ( исходя из того, что аминокислотам принадлежит лишь половина выделившегося азота), можно определить количество аминного азота, имевшегося в растворе. [6]
Если при осаждении цианамида аммиачным раствором нитрата серебра осадок имеет не ярко-желтый цвет, а с примесью черного, и если осадок не полностью растворим азотной кислотой ( 1: 10), проба содержит тиомочевину или сульфидную серу. В этом случае определяют тиомочевину и вносят поправку на ее содержание в найденное количество цианамидного азота. [7]
Кьельдаля и определяют содержание азота обычным методом. Полученный процент азота выражают в процентах белка, умножая на коэффициент 6 25, так как чистое белковое вещество содержит в среднем 16 % азота. Не всегда умножение найденного количества азота на 6 25 приводит к правильным результатам. Такое колебание в величине множителя зависит от содержания азота в растительных белках. Результат определения белкового азота может получиться несколько завышенным вследствие частичного осаждения с белками других азотсодержащих веществ. [8]
Под конец реакционную колбу встряхивают в течение 5 мин. Выделившийся газ промывают, пропуская его несколько раз через раствор перманганата калия, и измеряют объем азота, освобожденного от окислов азота. Параллельно проводят в этих же условиях контрольное определение. Количество монометиламина вычисляют, вычитая из найденного количества азота количество азота, эквивалентное содержанию аммиака. [9]
Под конец реакционную колбу встряхивают в течение 5 мин. Выделившийся газ промывают, пропуская его несколько раз через раствор перманганата калия, и измеряют объем азота, освобожденного от окислов азота. Параллельно проводят в этих же условиях контрольное определение. Количество монометиламина вычисляют, вычитая из найденного количества азота количество азота, эквивалентное содержанию аммиака. [10]
В мерную колбу вместимостью 50 мл вливают выбранный ( от 1 до 50 мл) объем разбавленного конденсата, добавляют безаммиачную воду до метки на колбе, прибавляют 1 мл реактива Несслера и раствор выливают в цилиндр Генера. Через 30 мин в другой цилиндр Генера наливают подходящий постоянный эталон и просматривая слои жидкости в цилиндрах сверху вниз, уравнивают окраски, изменяя высоту столба жидкости в том или другом цилиндре с помощью крана внизу. Когда достигнуто полное совпадение интенсивностей окрасок в обоих цилиндрах, замечают высоту столба жидкости в каждом цилиндре. Холостой опыт, в котором вместо анализируемой пробы берут безаммиачную воду и добавляют все реактивы в том же количестве, как описано выше, проводят для определения аммиачного азота, содержащегося в реактивах. Найденное количество азота учитывают при вычислении результатов анализа. [11]
Потребность в количественном определении белков, особенно в биологических жидкостях, возникает весьма часто. Наиболее простой способ основан на свертывании белка при кипячении. Осадок белка собирают на взвешенном фильтре, промывают, высушивают и взвешивают. В большинстве случаев предпочитают количество белка в осадке вычислять на основании содержания в нем азота, определяемого по методу Кьельдаля. Этот способ, часто применяемый на практике, дает собственно лишь белее или менее приближенное содержание белка, поскольку при этом определяется азот не только белков, но и других азотсодержащих веществ, определяемых по Кьельдалю. Между тем при пересчете весь найденный азот принимается за белковый азот. Встречаются, однако, случаи, когда содержание азота в белке настолько отклоняется от указанной цифры, что умножение найденного количества азота на 6 25 приводит к совершенно неправильным результатам. [12]
В бюретку [2], имеющую двухходовой кран и снабженную сосудиком для введения жидкости, наливают 1 - 2 мл 1 / 100 мол. Смесь помешивают стеклянной палочкой для равномерного выделения брома, что узнается по интенсивному желтому окрашиванию раствора. Затем добавляют 1 мл 40 % раствора NaOH, не содержащего карбонатов, и смесь опять перемешивают. Приготовленный таким образом раствор гипобромита натрия осторожно вводят в бюретку. Тотчас же начинается реакция, которая продолжается 3 - 5 мин. Для ускорения выделения азота бюретку встряхивают легкими ударами руки. После конца выделения определяют объем азота, установив ртуть в обоих коленах прибора на одном уровне. Найденное количество азота равно половине всего азота навески аргинина. [13]
Затем смешивают с 20 - 30 г кварцевого порошка, переносят все количественно в прибор для экстракции и извлекают в течение 3 час. К экстракту прибавляют 1 0 г твердого парафина, отгоняют четыреххлористый углерод, извлекают остаток один раз 50 мл и три раза по 25 мл кипящей воды. Охлажденную водную вытяжку фильтруют через влажный фильтр, стараясь, чтобы ни одна частица парафина не попала на фильтр. Фильтр промывают горячей водой и фильтрат после охлаждения обрабатывают 10 мл 1-процентного раствора перманганата калия. Смесь нагревают в течение 15 мин. Фильтрат выпаривают в чашке на водяной бане, остаток высушивают в обогреваемом паром сушильном шкафу в течение 30 мин. Хлороформный раствор фильтруют, упаривают во взвешенной чашке, высушивают остаток кофеина в течение 30 мин. Чистота полученного кофеина проверяется по содержанию в остатке азота, определяемого методом Кьельдаля. Найденное количество азота, умноженное на 3 464, отвечает содержанию кофеина. [14]