Cтраница 2
Растворимость, хроматографическая подвижность, большинство спектральных характеристик и другие физические свойства кетоз сходны со свойствами альдоз. Поэтому для определения конфигурации гликозидного центра кетоз неприменимы методы ИК - и ЯМР-спектроскопии, что сильно осложняет решение этой задачи. [16]
Восстановление или окисление карбонильной группы позволяет идентифицировать моносахарид, расположенный на восстанавливающем конце молекулы. Последовательность моносахаридных остатков и конфигурации отдельных гликозидных центров определяют при расщеплении О. [17]
Все известные методы синтеза ацилгалогеноз предполагают использование в качестве исходных соединений производных Сахаров с закрепленной циклической системой, причем последующая обработка обычно исключает изменение размера окисного цикла сахара. Поэтому в получаемых ацилгалогенозах необходимо установить лишь конфигурацию гли-козидного центра. Этот вопрос решается обычно на основании общих правил, связывающих вклад гликозидного центра в величину молекулярного вращения соответствующего производного с конфигурацией этого центра ( см. стр. Поскольку атом галоида при гликозидном центре делает абсолютную величину вклада весьма значительной, установление конфигурации гликозидного центра ацилгалогеноз таким способом обычно не составляет сложной задачи. [18]
В молекуле простого нуклеотида тот или иной из перечисленных выше гетероциклов связан с рибозой ( в ДНК - с дезоксирибозой) и фосфорной кислотой, этерифицирующей сахарную часть нуклеотида. Таким образом, нуклеотиды - мономеры, поликонденспцией которых ( с отщеплением вицы) образуются полинуклеотиды ( полимеры) - представляют собой фосфорные эфиры нуклеозидов. Поскольку продукты гидролиза нуклеозидов - пиримидиновые и пуриновые гетероциклы ( а также рибоза или дезоксирибоза), идентифицируются сличением с известными образцами, остается установить место связи гетероцикла с сахаром, характер их циклизации, конфигурацию гликозидного центра и, наконец, место фосфорилирования углеводной части молекулы нуклеиновых кислот обоих типов. [19]
В молекуле простого нуклеотида тот или иной из перечисленных выше гетероциклов связан с рибозой ( в ДНК - с дезоксирибозой) и фосфорной кислотой, этерифицирующей сахарную часть нуклеотида. Таким образом, нуклеотиды - мономеры, поликонденсацией которых ( с отщеплением воды) образуются полинуклеотиды ( полимеры), - представляют собой фосфорные вфиры нуклеозидов. Поскольку продукты гидролиза нуклеозидов - пиримиди-новые и пуриновые гетероциклы ( а также рибоза или дезоксирибова), идентифицируются сличением с известными образцами, остается установить место связи гетероцикла с сахаром, характер их циклизации, конфигурацию гликозидного центра и, наконец, место фосфорилирования сахарной части молекулы. [20]
Структура NAD установлена в результате комбинации методов деградации и синтеза. В результате гидролиза минеральными кислотами были получены аденин, никотинамид и 2 моль D-ри-бозо - 5-фосфата. Щелочной гидролиз давал аденозиндифосфат, структура которого хорошо известна, а ферментативный гидролиз нуклеотидпирофосфатазой приводил к количественному образованию аденозин-5 - фосфата и 5 -фосфата Л - рибозилникотинамида. Шленком, суммировавшим эти данные [6], была определена грубая структура NAD как Р1, Р2 - диэфира пирофосфорной кислоты. Конфигурация другого гликозидного центра следовала из выделения производных аденозина, представляющих собой, как известно, р-рибозиды. [21]
Несомненным преимуществом использования метилгликози-дов в качестве летучих производных для ГЖХ частично метилированных Сахаров является возможность изучения с помощью этого метода метилированных производных уроновых кислот в виде сложных метиловых эфиров метилгликозидов. Однако для этих производных, содержащих свободные гидроксильные группы в молекуле, характерна необратимая адсорбция на колонках, и поэтому предпочтение отдается их ацетилированным аналогам. В этом случае прекрасные результаты разделения были получены на полибутан-диолсукцинатной фазе ( 5 % на газохроме Z) при 190 С. Разделение метилированных Сахаров в виде их метилгликозидов имеет недостаток, связанный со сложностью получаемых хромато-грамм, что обусловлено возможностью существования Сахаров в изомерных формах, отличающихся размером оксидного цикла и конфигурацией гликозидного центра. Однако в том случае, если исследуемая смесь содержит небольшое количество метилированных гликозидов, недостаток метода можно расценивать как его преимущество: наличие нескольких пиков, относящихся к одному моносахариду, облегчает его идентификацию. [22]
Возможность отщепления гетероциклического основания от углевода в условиях мягкого кислотного гидролиза позволяла предположить, что нуклеозиды представляют собой N-гликозиды, причем в образовании гликозидной связи участвует один из гетероциклических атомов. С помощью спектральных и химических методов анализа было установлено, что основание соединено с углеводом своим N-9 атомом в случае пуринов и N-1 в случае пиримидинов. В состав нуклеотидов входят только два остатка сахара - D-рибоза и 2-дезокси - D-рибоза. С помощью периодатного окисления было показано, что оба углевода находятся в форме фураиозы. Наличие в циклической форме углевода асимметрического ( С-1) атома углерода обусловливает возможность ее существования в виде двух различных стерео изомеров. В соответствии с принятий номенклатурой стереоизомеры, отличающиеся только конфигурацией гликозидного центра, называются аномерами. [23]