Концентрация - аминокислота
Cтраница 4
Раствор аминокислот микропипеткой наносят на полоску бумаги и проводят хроматографирование, как указано выше ( см. стр. Определив площади пятен или их массу, по калибровочным графикам на ходят концентрации аминокислот в анализируемом растворе. [46]
При интерпретации данных, относящихся к процессу переноса аминокислот, большое значение приобретает вопрос о состоянии аминокислот внутри клетки. Вполне очевидно, что поглощение той или иной аминокислоты клеткой может зависеть от концентрации аминокислоты в окружающей жидкости, от активности системы, переносящей аминокислоту в клетку, и от превращений, которым аминокислота подвергается в реакциях клеточного обмена. Различными способами удается извлечь из клеток свободные аминокислоты; однако не исключено, что в неповрежденных клетках они находятся в связанной форме. Соответствующие связи могут быть сравнительно нестойкими и способными распадаться даже при мягких условиях экстракции. Между тем данные исследований Кристенсена [32-34] и Гайнца [35] указывают на то, что легко экстрагируемые из клеток аминокислоты существуют в клетках в виде свободных аминокислот. Для удержания глицина в тех высоких концентрациях, в которых он поглощается клетками асцитной опухоли, потребовались бы столь же высокие концентрации связывающего агента; данных, указывающих на наличие подобного агента, до сих пор не получено. Наблюдения, показавшие, что вместе с аминокислотами в клетки поступает вода, также говорят в пользу присутствия в клетках свободных аминокислот. Гайнц [35] в опытах на клетках асцитной опухоли исследовал кинетику поступления и выхода глицина в процессе переноса и нашел, что зависимость между скоростью притока глицина в клетки и концентрацией глицина в среде можно описать уравнением Михаэлиса - Ментена. Скорость поступления глицина не снижается и даже возрастает при предварительном насыщении клеток глицином. Автор приходит к выводу, что фактором, ограничивающим скорость поглощения глицина, служит связывание глицина с каким-то компонентом клеточной стенки. Полученные им результаты согласуются с представлением о наличии глицина в клетках в свободном состоянии и указывают на то, что выход глицина происходит главным образом путем диффузии. [47]
Трудность определения аминокислот в природных водах заключается в том, что, наряду с весьма низким их содержанием ( несколько микрограммов аминного азота в 1 л), в воде всегда присутствует сложная смесь неорганических веществ, в той или иной мере мешающих их определению. Следует отметить, что концентрация этих веществ часто может на несколько порядков превышать концентрацию аминокислот. [48]
 |
Зависимость наводороживания стальных катодов ( проволока ПП 0 - 0 55 мм от концентрации аминокислот в 0 1 н. H2SO4 10 мг / л HaSeO3. [49] |
При Дк50 мА / см2 наводороживание исследованными аминокислотами ( за исключением лейцина) не уменьшается. Зависимость ингибирующего действия ( пропорционального числу оборотов, выдерживаемых образцом при скручивании) от концентрации аминокислоты графически изображается кривой, напоминающей изотерму адсорбции. [50]
Поскольку между удельной радиоактивностью и концентрацией аминокислот существует линейная зависимость, то можно сказать, что удельную радиоактивность нефракционированного белка для образца, весящего 100 мкг, или для белковой зоны в микрогеле можно сравнивать с эквивалентными радиоактивностями образцов из идентичных участков мозга другого полушария того же животного, а также с образцами мозга других животных путем деления удельной радиоактивности белка на концентрацию аминокислот, содержащих тритий. Все значения удельной радиоактивности, таким образом, сравнивают при одной и той же концентрации аминокислоты, меченой тритием, названной здесь единичной концентрацией 3Н - лейцина. [51]
Величина оптической плотности раствора при анализе аминокислот зависит в сильной степени от условий хроматографирования ( качества бумаги, числа пропусканий растворителей и др.), поэтому для определения концентрации аминокислоты в анализируемом растворе нельзя пользоваться заранее сделанными калибровочными кривыми. Здесь пользуются установленной зависимостью между концентрацией кислоты и оптической плотностью раствора, которая в пределах концентраций аминокислот от 0 025 до 0 25 мкмоль ( микромолей) имеет линейный характер. [52]
Особо чувствительный метод двойной метки основан на применении меченого [ 3Н ] - дансилхлорида в качестве реагента и меченой [ 4С ] - аминокислоты как внутреннего стандарта. Отношение 3Н: 14С в дансильном производном зависит от отношения количества добавленной [ 14С ] - аминокислоты к концентрации немеченой аминокислоты в пробе. Этот метод особенно подходит для идентификации аминокислот в биологическом материале. [53]
Разработаны высокочувствительные микробиологические методы количественного определения аминокислот, основанные на подборе штаммов микроорганизмов, для которых та или-лная аминокислота становится фактором, лимитирующим рост. Так, например, для Streptococcus pjantarum таким лимитирующим фактором является триптофан, причем рост микроорганизмов существенно замедляется при снижении концентрации аминокислоты на 1 мкг / мл. Зависимость роста от концентрации линейна, что позволяет определить по плотности культуры ( турбиметрически) концентрацию данной аминокислоты. [54]
Стандартная смесь должна, само собой разумеется, по возможности более точно отвечать составу анализируемого образца, поскольку зависимость монаду концентрацией аминокислоты на поверхности и отклонением гальванометра сложна. [55]
Страницы: 1 2 3 4