Cтраница 2
Водородные связи между аденином и тимином ( а и между гуанином и цитозином ( б в спирали ДНК. [16] |
В 1957 году Корнберг осуществил синтез ДНК в бесклеточной системе, содержавшей нуклеотиды всех четырех типов, фермент полимеразу и ДНК для затравки. Оказалось, что ДНК, образовавшаяся в процессе ферментативного синтеза, всегда идентична ДНК, использованной в качестве затравки. [17]
Если действовать ферментом Корнберга на смесь мономеров, содержащую только Г и Ц, то результат оказывается несколько другим: получаются в равном количестве гомополимеры поли - Г и поли - Ц, образующие двойные спирали путем комплексообразова-ния. [18]
Существенные отличия синтеза Корнберга от синтеза Очоа и Гринберг-Манаго заключаются ( кроме субстрата и фермента) в следующем. [19]
Существенные отличия синтеза Корнберга от синтеза Очоа и Грин-берг - Манаго заключаются ( кроме субстрата и фермента) в следующем. Синтез Очоа и Гринберг-Манаго может быть осуществлен с индивидуальным пирофосфатом нуклеозида или со смесью таких пирофосфатов. [21]
Робертсон, Хартвелл и Корнберг [35] нашли, что диэтил-дигептилеульфид, а также иприт окисляются до соответствующих сульфоксидов кислородом воздуха в присутствии ненасыщенных жирных кислот и их производных. В качестве последних применялись высыхающие масла, как, например, льняное и оливковое. Образовавшаяся перекись окисляет сульфид до сулъ-фоксида, реакция завершается менее чем за час. В присутствии избытка перокоидированного эфира жирной кислоты, например этиллинолеата, окисление сульфидов протекает приблизительно стехиометрически - один моль перекисного кислорода расходуется на моль сульфида. Если же сульфид взят в избытке, то сульфида исчезает значительно больше, чем имеется перекиси. Авторы предполагают, что в этих случаях либо газообразный кислород не был полностью удален из реакционной смеси, или же образовывался менее окисленный продукт, чем сульфоксид. Специальными опытами было установлено, что иприт в отсутствие ненасыщенной кислоты не образует продуктов окисления в течение года. Эти данные могут иметь значение при выяснении характера действия сульфидов как ингибиторов окисления. [22]
ДНК-нуклеотидилтранс-фераза, или фермент Корнберга ( ДНК-полимераза I), осуществляющий полимеризацию дезоксирибонуклеозидтрифосфатов на ДНК-матрице в присутствий ионов Mg2 - Выделенный из кишечной палочки после тщательной очистки фермент представляет собой препарат, гомогенный по критериям седиментации, хроматографии и электрофореза в крахмальном геле. Наряду с полимеразной активностью фермент обладает также экзонуклеазной активностью. [23]
Этот цикл был впервые предложен Корнбергом и Кребсом в 1957 г. для объяснения роста ряда микроорганизмов ( дрожжей, многих плесеней, Escherichia coli и Pseudomonas) на среде, содержащей в качестве единственного источника углерода такое дву-углеродное соединение, как уксусная кислота. [24]
Упрощенна схема механизма репликация ДНК по Корнбергу. [25]
В дальнейшем было установлено, что полимераза Корнберга является скорее репаразой - медленно действующим ферментом, заполняющим бреши в полинуклеотидных блоках. In vivo работает истинная полимераза. Мы еще мало знаем об этих ферментах. [26]
Для осуществления этой реакции пригоден фермент, названный Корнбергом ДНК-полимеразой. В настоящее время подобный фермент получен из многих бактерий п из тканей высших животных. [27]
Таким образом, глиоксилатный цикл ( или цикл Кребса - Корнберга) представляет собой пример анаплеротической цепи реакций. [28]
Очень интересные и весьма важные результаты были получены в лаборатории Корнберга по синтезу ДНК. В этой лаборатории был выделен новый фермент полимераза, который оказался способным in vitro ( вне организма) катализировать синтез полинуклеотидов типа ДНК. Этот фермент вызывает полимеризацию нуклсотидиых единиц только дезоксирибозной природы. Синтезируемые в лабораторных условиях с помощью фермента полидезоксирибонуклеотиды по своим физическим и физико-химическим свойствам не отличались от природных, пативных ДНК, что говорило об общности их макромолекулярной структуры. [29]
Известно [65], что для синтеза тимидина необходима фолевая кислота; в работах Корнберга и других исследователей, о которых речь будет ниже, подчеркивается участие в этом процессе окси-метилтетрагидрофолевой кислоты ( СН2ОН - ТГФ), формула которой приведена на фиг. [30]