Аминоацилирование
Cтраница 1
Аминоацилирование карбодиимидным методом такого гидроксила, как гидроксил у Сз в диацетонглкжозе, указывает на применимость нашего метода не только для получения аминоацильных производных Сахаров по первичному гидроксилу, но и производных по вторичному гидроксилу сахара. Таким образом, предлагаемый нами метод имеет, по всей видимости, достаточно общий характер. [1]
Эффективное аминоацилирование нуклеозидов и нуклеотидов может быть осуществлено при действии имидазолидов N-замещенных аминокислот 5859; при использовании грет-бутил-оксикарбонильной и формильной защитных групп реакция может быть проведена в водном растворе. В этих условиях аминогруппа цитидина не затрагивается. С помощью данного метода удалось осуществить аминоацилирование суммарной тРНК из дрожжей60 м, причем 60 - 65 % остатков аминокислоты оказалось соединено с концевой цыс-гликольной группировкой полимера. [2]
Для аминоацилирования пуринового и пиримидинового оснований нуклеозидов применяли хлорангидридный [2397, 2398] и карбодиимидный [2047] методы. [3]
После аминоацилирования специфической тРНК реакцию прекращают, доводя рН до 5 0 и охлаждая смесь до 4 С, а затем добавляют раствор NaCI до конечной концентрации 0 9 М и осаждают аминоацил-т РНК двумя объемами 95 % - ного спирта. [4]
Для аминоацилирования пуринового и пиримидинового оснований нуклеозидов применяли хлорангидридный [2397, 2398] и карбодиимидный [2047] методы. [5]
Для аминоацилирования гидроксильной группы в нуклеозидах и нуклеотидах разработаны четыре основных метода. [6]
Наконец, для специфического аминоацилирования мс-гликоль-ной группировки предложен метод62, основанный на образовании циклических ортоэфиров аминокислот ( см. стр. [7]
Смесь тРНК подвергают ферментативному аминоацилированию и обрабатывают затем периодатом; при этом разрушаются концевые гликольные группировки всех тРНК, не этерифицированные остатком аминокислоты. Продукты их окисления отделяют от амино-ацил - тРНК с помощью рассмотренных выше реакций с аминами или гидразидами кислот. [8]
Такой двустадийный цикл ( удаление защиты - аминоацилирование) может быть, в принципе, повторен столько раз, сколько требуется для наращивания полипептидной цепи заданной длины. [9]
Такой двустадийный цикл ( удаление защиты - аминоацилирование) может быть, в принципе, повторен столько раз, сколько требуется для наращивания полипептидной цепи заданной длины. На завершающей стадии синтеза требуется только кислотная обработка ( обычно сильной безводной кислотой, такой, как HF) для расщепления бензильной сложноэфирной связи и освобождения полипептида с полимера. [10]
Такой двустадийный цикл ( удаление защиты - аминоацилирование) может быть, в принципе, повторен столько раз, сколько требуется для наращивания полипептидной цепи заданной длины. На завершающей стадии синтеза требуется только кислотная обработка ( обычно сильной безводной кислотой, такой, как HF) для расщепления бензильной сложноэфирной связи и освобождения полипептида с полимера. [11]
Модифицированный комплекс фенилаланил - тРНК дрожжей, оканчивающийся З - дезоксиаденозином, присоединяет аминогруппу при помощи фермента, активирующего аминокислоту ( аминоацил-т РНК-синтетазы) [ уравнение ( 11 - 2) ], в то время как фенилаланин-т РНК, оканчивающаяся 2 -дезоксиаденозином, в реакцию не вступает. Это дает основание думать, что местом исходного аминоацилирования служит 2 -гидроксильная группа. [12]
 |
Спонтанная миграция аминоацильного остатка между 2 - и 3 - положениями рибозы концевого аденозина тРНК через образование коротко-живущего промежуточного соединения. [13] |
Между связанными субстратами на ферменте происходит реакция образования амино-ациладенилата с освобождением пирофосфата в раствор. Связывание малых субстратов и образование аминоациладенилата в свою очередь стимулируют связывание тРНК, в результате чего происходит реакция аминоацилирования тРНК на ферменте и освобождение АМФ в раствор. Получается цикл, изображенный на нижней части рис. 28, где в работающем ферменте один из центров связывания тРНК перманентно занят и, следовательно, фермент проявляет реактивность лишь половины своих субстратсвязывающих мест. [14]
Полимерный носитель в методе Меррифилда - это гранулированный сшитый полистирол ( Р), содержащий хлорметильные группы в бензольных ядрах. Эти группы превращают полимер в функциональный аналог бензилхлорида и сообщают ему способность легко образовывать сложноэфирные связи при реакции с карбоксилат-анионами. Аминоацилирование освобожденной аминогруппы N-защищенным производным второй аминокислоты с последующим удалением N-защиты приводит к аналогичному производному дипептида 38, также привязанному к полимеру. [15]
Страницы: 1 2