Флуоресцентный краситель
Cтраница 4
Наибольшее распространение получило использование флуоресцентных красителей, таких, как дихлорфлуоресцеин и родамин. Циклические и некоторые кислородсодержащие монотерпены тушат индуцированную УФ-облучением флуоресценцию, что позволяет отличить их от других соединений. Большинство монотерпенов можно смыть с силикагеля сухим диэтиловым эфиром, при этом флуоресцентный краситель остается связанным с носителем. [46]
Люминесцентная микроскопия в сочетаний с методикой флуоро-хромирования с успехом используется для дифференциации микроколоний на мембранных фильтрах. При этом исследуемая вода фильтруется через мембранные фильтры № 3, которые помещаются на плотные питательные среды, применяемые для выращивания патогенных или санитарно-шжазательных микроорганизмов. С этой целью на крышку чашки Петри наносят 3 - 5 капель раствора флуоресцентного красителя и на них помещают фильтр нижней его поверхностью. [47]
Эти опыты показали, пишет Пикок, что и печень, и почки выделяют флуоресцентный краситель, однако флуоресцеин, выделяемый печенью, с желчью попадает в кишечник, отсюда быстро реабсорби-руется и снова попадает в кровь. Поэтому в конечном счете флуоресцеин удаляется из крови путем выделения его почками. [48]
Некоторые этапы этого процесса недавно были автоматизированы. Во многих случаях праймеры, добавляемые в реакционную смесь в разных пробирках, метят различными флуоресцентными красителями с разной длиной волны флуоресценции. Затем содержимое всех четырех пробирок соединяют и проводят электрофорез на одной дорожке. [50]
Для объяснения этого различия можно предположить, что при фотохимическом образовании кислорода внутри клетки должно создаться высокое внутреннее давление, прежде чем какое-либо количество газа сможет выделиться в атмосферу. Поэтому химическая и фотохимическая потери адаптации могут отвечать одному и тому же внутреннему содержанию кислорода в хлоро-пластах. Гаффрон, однако, полагает, что опыты с кислородным электродом, а также наблюдения со светящимися бактериями и флуоресцентными красителями показывают, что кислород появляется в окружающей среде через 0 01 сек. [51]
Первый представитель азакумаринов - 7-гидрокси - 5-метил - 8-азакумарин был синтезирован в 1934 году по реакции Пехмана. Использование в качестве катализатора хлорида цинка позволило значительно повысить выходы, что дало возможность использовать полученные соединения для последующих превращений. Модифицированные таким образом азакумарины предложено использовать как флуоресцентные красители, а азапсо-ралены - как биологически активные вещества. С этого момента интерес к химии азакумаринов неуклонно растет. В качестве исходных соединений предложено использовать гидрокипиридины, производные 4-гидрокихинолина, замещенные барбитуровые и тиобарбитуровые кислоты, азааналоги салицилового альдегида. Однако, вследствии малочисленности возможных исходных веществ и труднодоступность некоторых из них, общее число синтезированных на настоящее время азакумаринов невелико. Кроме того, основный характер исходных веществ во многом изменяет их поведение в реакции и требует внесения определенных корректив в методики: в реакции Пехмана предложено использовать межфазный катализ и микроволновое облучение, конденсацию по Кневенагелю рекомендуют проводить в избытке катализатора или в гетерогенной среде, для реакции гидро-ксипиридинов с формилпроизводными метиленактивных соединений в качестве растворителя используют уксусную кислоту. В ряде публикаций некоторые конденсации были проведены без растворителя. [52]
Метод находит особенно широкое применение в микроскопической практике. Нет принципиального различия между обычными и люминесцентными красителями микроскопических объектов - ив том и в другом случае применение красителей, увеличивая контраст, делает заметной разницу, которая иначе оставалась бы неуловимой. Вместе с тем ясно, что применение флуоресцентных красителей вооружает исследователя и практика, работающего в этом направлении, новым методом исследования, открывает новые перспективы ( см. гл. [53]
Страницы: 1 2 3 4