Cтраница 2
Для этого почву стерилизуют и вносят в нее культуру продуцента. При возобновлении культуры смыв с почвы высевают на чашки Петри и выделяют на косой питательный агар. [16]
Питательные среды по своему назначению разделяются на три основные группы: среды для поддержания штаммов-продуцентов в лаборатории и в музее; среды для получения посевного материала и среды, употребляемые в больших объемах в основном процессе производства. Состав сред, обеспечивающих накопление того или иного фермента, может значительно отличаться от состава сред, применяемых для выделения и поддержания культуры продуцентов. [17]
Для получения спор многих продуцентов антибиотиков часто используют среду из зерен проса. Споровый материал с таких сред можно засевать прямо в инокулятор, минуя размножение на жидкой среде в колбах. Иногда в лабораторной практике культуру продуцента начинают размножать сразу на жидкой среде в колбах, исключая предварительное получение спор. [18]
Для осуществления контроля за ходом выращивания посевного-материала и ферментации из инокуляторов, посевных аппаратов и ферментеров отбирают пробы среды и культуральной жидкости два раза в сутки. Их оценивают по внешнему виду ( объем, занимаемый мицелием, форма мицелия, цвет), определяют рН среды, наличие посторонней микрофлоры и активность ( содержание антибиотика в 1 мл культуральной жидкости), а также проводят биохимический анализ проб. Иод микроскопом наблюдают за состоянием культуры продуцента. Отбирает пробы сменный микробиолог, анализы выполняются в различных отделах цеховых лабораторий. [19]
Указанные недостатки устраняются при непрерывном культивировании, методы которого разработали С. В. Лебедев, А. А. Андреев, Н. Д. Иерусалимский и другие ученые. Из непрерывных процессов лучше всего разработан метод глубинной ферментации. В этом случае в ферментатор с культурой продуцента непрерывным потоком подается стерильная среда, а из него непрерывно вытекает готовая культуральная жидкость. Процесс может быть гомо - и гетерогенно непрерывным. При гомогенно непрерывном процессе в аппарате, где идет интенсивное перемешивание, все параметры ( концентрация питательных веществ, клеточный титр и др.) постоянны во времени. При гетерогенно непрерывном процессе несколько ферментаторов соединены вместе и образуют каскад. Питательная среда поступает в первый ферментатор и готовая культуральная жидкость вытекает из последнего ферментатора. Культивирование микроорганизмов в протоке через систему трубок также идет по принципу гетерогенно непрерывного процесса ферментации. [20]
Продуцирует кормарин ак-тиномицет Act. Штамм обладает антимикробным действием, он подавляет развитие грамотрицательных и грамположительных бактерий и микобактерий, на грибы и дрожжи не действует. Культура продуцента хороню развивается на многих питательных средах. При выращивании на средах с овсяной, пшеничной или кукурузной мукой хорошо выражена желто-коричневая или красновато-коричневая окраска колоний. Пигмент водорастворим и диффундирует в среду, которая окрашивается в желтый или красновато-коричневый цвет. [21]
Часто штамм хранят на зерне, например на пшене. Для этого пшено, очищенное от примесей, кипятят в минимальном количестве воды до полного поглощения влаги ( на 1 кг пшена 800 мл воды), распаривают в течение 30 мин, высыпают на чистый стол, разбирают образовавшиеся комки и остывшее пшено по 15 - 16 г засыпают в стерильные флаконы объемом 250 мл, которые затем стерилизуют при давлении 0 1 МПа в течение 40 мин. Культуру продуцента выращивают при периодическом встряхивании при температуре 25 - 30 С. [22]