Cтраница 2
Культивируемые ткани растений применяются также для проведения биотрансформации. Примером такого рода может служить образование стимулирующего работу сердца дигоксина путем 12 - 3-гидроксилирования дигитоксина в суспензионных культурах или в иммобилизованных клетках наперстянки Digi talis lanata. [16]
Плотность насыщения выражается числом клеток на 1 см2 в монослой-ной культуре или числом клеток на 1 см3 в суспензионной культуре. [17]
Такие мешалки оказывают двоякое действие: способствуют диспергированию мелких пузырьков воздуха в толще культуральной среды и обеспечивают перемешивание, необходимое для минимизации концентрационных градиентов, эффективного охлаждения реактора и уменьшения выделения пузырьков воздуха. Однако возникающие при таком перемешивании гидродинамические силы могут повреждать клетки, особенно в случае волокнистых плесневых грибов, актиномицетов, бактерий, имеющих жгутики, фимбрии, а также хрупких клеток тканей, выращиваемых в суспензионной культуре. Образование специфического продукта может зависеть от морфологии плесневого гриба; по этой причине явно непригодны для использования в промышленных процессах те штаммы, морфология которых значительно изменяется при изменении условий культивирования. Кроме того, следует избегать таких условий проведения процесса, когда мицелий плесневых грибов, повреждается. [18]
Все способы выращивания клеток животных могут быть соотнесены либо к интактным ( нетрансформированным с помощью вирусов), либо к вирусотрансформированным клеткам. Успех культивирования первых во многом обусловлен наличием и плотностью адгезинов, благодаря которым они проявляют эффект заякорива-ния на подлежащей поверхности стекла, металла или пластика. Однако такие клетки не растут в суспензионных культурах. [19]
В растворах происходит спонтанная изомеризация халконов в соответствующие флаваноны. In vivo процесс легко обратим, и поэтому очень трудно определить, халкон ли или соответствующий флаванон служит непосредственным предшественником флавоноидов других классов. Доступные в настоящее время доказательства, полученные главным образом в работах с суспензионными культурами клеток петрушки и других видов растений, свидетельствуют в пользу того, что прямыми предшественниками являются флаваноны. Этот вопрос может быть разрешен однозначно лишь при исследовании ферментативных систем, в которых не функционирует халкон-флаванон-изомера-за. [20]
В качестве биологических объектов исследований были использованы яровая пшеница сорта Московская-35 ( зеленые листья и корни отдельно) и суспензионная культура леток табака сорта Самсун. Выращивались эти объекты параллельно как с добавлением минерального азота ( iNH4) 2SO4 в качестве удобрения, так и без него. Суспензионную культуру клеток табака, листья и корни пшеницы отдельно помещали в стеклянные сосуды, герметично закрывали и делали экспозицию. Затем через резиновые пробки отбирали из сосудов шприцем 2 мл газовой смеси и делали количественный анализ этилена: для пшеницы ежедневно в течение тринадцати дней, культуры ткани табака - двадцати дней. [21]
![]() |
Микросферы для иммобилизации клеток млекопитающих из микропористых, биологически инертных, стекла ( а и стеклошлака ( так называемого Cultispher-G ( б увеличение хЮООО. [22] |
Площадь выращиваемых клеток можно существенно увеличить при использовании микроносителей, суспендируемых в питательной среде и на поверхности которых клетки закрепляются, а затем разрастаются в виде монослоя. Такие суспендированные микроносители с клетками моделируют глубинные культуры, например, микроорганизмов. Следовательно, в таких системах совмещаются монослойные и суспензионные культуры животных клеток. [23]
Такие клеточные линии уподобляются одноклеточным микроорганизмам и могут называться суспензионными культурами в случае их выращивания в жидких питательных средах. Состав и реологические характеристики сред являются основными факторами, определяющими нахождение одиночных или аггломериру-ющихся ( агрегирующихся) клеток во взвешенном состоянии. Если число клеток в аггломератах превышает 50, то они могут выпасть ( или выпадают) в осадок. Желательно, чтобы в процессе размножения клетки дольше оставались в разобщенном состоянии, тогда поддержание суспензионной культуры в течение необходимого времени оказывается вполне достижимым. [24]
Известно, что корни растения Lithospermum erytrorhizon содержат шиконин и его производные. Это растение издавна используется в Японии как лекарственное, поскольку оно обладает антибактериальной и противовоспалительной активностью. Для того чтобы концентрация шиконина в корнях достигла 1 - 2 %, возраст растения должен составлять 5 - 7 лет. Так как выращивать Lithospermum erythror-hizon в промышленном масштабе в Японии невозможно, его приходилось ввозить из Кореи и Китая, а поэтому стоимость чистого природного вещества составляла 4500 долл. Представлялось заманчивым наладить его промышленное производство на основе культуры тканей растений / Клетки растений не выделяют вторичные продукты в среду, а запасают их в вакуолях и органеллах, что затрудняет их получение. Однако накопление шиконина облегчает отбор наиболее продуктивных линий, поскольку содержащие этот краситель клетки имеют яр-ко-красный цвет. Был разработан двухступенчатый процесс культивирования, в котором на первой стадии создавались оптимальные условия для наращивания биомассы, а на втором - для образования вторичных продуктов. Клетки растят в суспензионной культуре; для этого лучше всего подходят эрлифтные ферментеры, так как в них осуществляются одновременно как интенсивное перемешивание, так и разделение клеток, а вероятность повреждения относительно хрупких клеток минимальна. Затем его содержимое переносят в аппарат объемом 750 л и проводят экстракцию обычными химическими методами. Выход продукта за один цикл составляет 5 кг, поэтому стоимость его гораздо ниже, чем при получении упомянутым выше способом. [25]