Cтраница 1
Каталитический синтез N-замещенных аминокислот осуществляют карбонилированием смеси N-алкиламинов и алифатических альдегидов. [1]
Синтезы бензиновых эфиров N-замещенных аминокислот проводят с использованием дициклогексилкарбо-диимида, тионилхлорида и сульфурилхлорида, а также методами переэте-рификации. Используют также натрий в жидком аммиаке, жидкий фторо-водород и щелочной гидролиз. Ацидолитическое расщепление в названных УСЛОВИЯХ может иногда задевать и пептидные связи. [2]
Для приготовления смешанных ангидридов N-замещенные аминокислоты или пептиды растворяют в тетрагидрофуране, диоксане, ацетонитриле, этилацетате или диметилформамиде, смешивают с эквивалентным количеством третичного основания ( N-метилморфолин, трибутиламин, N-этилпиперидин) и при охлаждении до - 5 ч - - 15 С добавляют соответствующий алкилхлорформиат. [3]
Метиловые и этиловые эфиры N-замещенных аминокислот реагируют со свободной аминогруппой другого компонента очень медленно. [4]
Наличие свободной аминогруппы является определяющим в асимметрическом модифицировании: N-замещенные аминокислоты обладают меньшей модифицирующей способностью. [5]
Эффективное аминоацилирование нуклеозидов и нуклеотидов может быть осуществлено при действии имидазолидов N-замещенных аминокислот 5859; при использовании грет-бутил-оксикарбонильной и формильной защитных групп реакция может быть проведена в водном растворе. В этих условиях аминогруппа цитидина не затрагивается. С помощью данного метода удалось осуществить аминоацилирование суммарной тРНК из дрожжей60 м, причем 60 - 65 % остатков аминокислоты оказалось соединено с концевой цыс-гликольной группировкой полимера. [6]
Чтобы избежать образования привитых сополимеров и гомополимеров, в качестве исходных продуктов применялись N-замещенные аминокислоты, в которых возможность взаимодействия ангидридной или хлорангидридной группировки с N-замещенной аминогруппой значительно затруднена. [7]
Другой положительной особенностью данной системы является возможность иммобилизации на той же самой основной матрице ряда других N-замещенных аминокислот в качестве хиральных лигандов, что позволяет оптимизировать данную систему. Например, селектор ДНБ-лейцин, как выяснилось, во многих случаях дает лучшие результаты ( см. разд. [8]
Эту корреляцию следует, конечно, применять только для аминокислот, которые могут содержать группу NHJ. N-Замещенные аминокислоты, такие, как N-фенилглицин, саркосин или пролин, имеют только группу NHJ, которая поглощает, по-видимому, при меньших частотах. [9]
Однако поскольку все исследованные до настоящего времени нейтральные аминокислоты поглощают в этой области, данное соотношение можно использовать для целей качественного анализа. N-замещенные аминокислоты, такие, как N-фенилглицин, саркозин или про-лин, имеют толькб группу NH -, которая поглощает, по-видимому, в другой области. Ограниченное число изученных соединений такого рода не позволяет установить какого-либо соотношения для последней структуры. [10]
Образование между аминокислотой и энзимом соединений, построенных по типу шиффовых оснований, было подтверждено Осипенко [161], нашедшей, что реакция переамннирования не идет с N-метилами-нокислотами и что в их присутствии скорость взаимодействия незамещенных аминокислот с кегокислотами не снижается. N-замещенные аминокислоты в противоположность незамещенным в обменную реакцию в присутствии з нзимов и кетокислоты не вступают. Отсюда следует, что комплексы энзим - субстрат действительно имеют строение шиффовых оснований, которые не могут образовываться из М - замещен-иых аминокислот. [11]
Нитробензиловые эфиры ( - ONb) получают, используя те же методы, что и для незамещенных бензиловых эфиров. N-Замещенные аминокислоты и пептиды легко реагируют с 4-нитробензилгалогенидами в присутствии третичных оснований, превращаясь в соответствующие эфиры. [12]
Удивительно простая идея этого нового метода синтеза состоит в том, что аминокислота закрепляется через свою карбоксильную группу на нерастворимом легко фильтруемом полимере, и затем пептидная цепь постепенно наращивается с С-конца. Для этой цели N-замещенные аминокислоты вводят в реакцию с реакционноспособными группами полимерной смолы. С аминокислоты, ковалентно соединенной с полимерной частицей, удаляется N-защитная группа, и полученный аминоацильный полимер реагирует со следующей N-защищенной аминокислотой. Пептидная цепь ступенчато наращивается на полимерной матрице. На последней стадии синтеза Меррифилда расщепляется ковалентная связь между С-концевой аминокислотой построенной полипептидной цепи и якорной группировкой полимерного носителя. Нерастворимый носитель может быть отделен от находящегося в растворе полипептида простым фильтрованием. Решающее преимущество метода Меррифилда состоит в том, что избегают трудоемких и требующих много времени операций по очистке промежуточных продуктов. Ценный продукт реакции все время остается прикрепленным к полимерному носителю, в то время как избытки реагентов и побочные продукты удаляются фильтрованием. Простота эксперимента и возможность автоматизации привели сначала даже к мнению, что благодаря этой новой синтетической концепции будет, наконец, решена проблема химического синтеза ферментов и других белков. Однако после подробного изучения и интенсивной разработки этой новой техники синтеза были выявлены серьезные лимитирующие факторы, которые впоследствии привели к реалистической оценке этого метода. Конечно, сведение трудных стадий высаживания и очистки при обычных методах в растворе к простому процессу фильтрования в твердофазном синтезе уже означает неоспоримое преимущество. [13]
Первая из них, в интервале 1660 - 1610 см 1, бывает обычно слабой, а в некоторых случаях выглядит только как выступ на главной полосе поглощения ионного карбоксила. Причины возникновения этих полос неясны, но отсутствие их у солей и N-замещенных аминокислот [13, 17] и наличие у гидрохлоридов указывает на то, что они, вероятно, связаны с деформационными колебаниями NHJ. Ленорман [13] относит вторую полосу к деформационным колебаниям NH, но не дает никаких объяснений относительно первой полосы, тогда как Рендалл и др. [17] относят первую полосу поглощения к группе NH и не рассматривают вторую. [14]
При этом карбоксильные и аминогруппы взаимодействуют, и в результате получаются триметилсили-ловые эфиры N-замещенных аминокислот. Производные фенилаланина элюируются через 28 - 30 мин. Результаты воспроизводятся с точностью до 0 5 % при использовании метода измерения площадей под пиками и применении ТК-ячейки в качестве детектора. Авторы указывают, что эту реакцию можно провести почти количественно со всеми доступными аминокислотами, но не приводят данных по хроматографическому анализу высокомолекулярных соединений, таких, как производные триптофана и гистидина. [15]