Cтраница 3
На рис. 24.8 представлены пути окислительного распада аминокислот с разветвленной цепью - кетогенной аминокислоты лейцина, а также валина и изолейцина, являющихся одновременно кетогенными и гликогенными. В процессе метаболических превращений валина происходит образование сукцинил - КоА, который через цикл ТКК и при участии некоторых других ферментов может превратиться в пируват, а затем в глюкозу. В то же время лейцин дает непосредственно кетопродукт ацетоацетат и, кроме того, аце-тил - КоА, из которого также может образовываться ацетоацетат. Через метилмалонил - КоА пропи-онил - КоА превращается в сукцинил - КоА, и, следовательно, его надлежит считать гликогенным, а так как ацетил - КоА - кетогенное соединение, то изолейцин можно отнести одновременно к обеим категориям. [31]
Меченый предшественник должен более или менее свободно входить в систему и становиться метаболически эквивалентным эндогенному субстрату, в который требуется ввести метку. Эти требования в общем соблюдаются, например, для ацетат-иона, в меньшей степени - для малонат-иона и часто совершенно не соблюдаются для введенного мевалонат-иона. Эксперимент должен также обеспечивать возможность отличать проверяемый прямой путь включения от любых других неожиданных и часто в высшей степени косвенных путей. Например, структуры многих поликетидов таковы, что меченый поликетид в результате простых реакций расщепления может стать источником специфически меченного аце-тил - КоА, который затем может включаться в совершенно иное соединение. Еще один пример: такие совершенно различные по структуре аминокислоты, как глицин, серии и триптофан, могут являться эффективными предшественниками С-метильных групп; количественное сравнение с меченым метионином показывает, что последний представляет собой гораздо лучший предшественник, но результаты с другими аминокислотами могут быть правильно интерпретированы только при наличии определенных данных о промежуточном метаболизме. Соблюдение соответствующих биологических принципов может также оказаться выгодным при выборе наиболее экономичной или наиболее чувствительной методики. Как будет показано ниже, различные применяющиеся в настоящее время изотопы следует вводить в различных количествах; этот факт следует учитывать, например, при проведении предварительных опытов с целью оптимизации условий включения предшественника. Кинетика включения предшественника может быть чрезвычайно сложной. [32]
Ганглиозидами называют гликосфинголипиды, содержащие остатки сиаловой кислоты. Наиболее богатым, но далеко не единственным источником ганглиозидов является ткань мозга. При помощи хроматографиче-ских методов ганглиозиды были обнаружены также в тканях многих органов. Ганглиозиды, выделенные из разных источников, различаются типом жирной кислоты и сфингозинового основания, а также числом мо-носахаридных звеньев углеводной цепи. Известные к настоящему времени чистые ганглиозиды являются гомогенными лишь в отношении структуры углеводной цепи. Аминогруппа при С-2 сфингозина ацилирована остатком жирной кислоты. Образованная таким образом структура церамида характерна для всех сфинголипидов. Сиаловые кислоты представлены в ганглиозидах мозга млекопитающих N-ацетилнейраминовой кислотой ( 5-ацетамидо - 3 5-ди-ц езокси-о-глицеро - - о-галакго-нонулозоновая кислота), которая связана а-о-кетозидной связью с остатком другого сахара, главным образом с положением 3 о-галактозы или положением 8 другого остатка ней-раминовой кислоты. Олигосахаридные цепи ганглиозидов, содержащихся в тканях других органов, более разнообразны, однако до настоящего времени структура этих цепей определена лишь для немногих соединений. Одним из таких ганглиозидов является моносиалозиллактозилцер амид - главный компонент ганглиозидной фракции из ткани многих органов. Как правило, сиаловая кислота представляет собой смесь М - аце-тил и N-гликолилнейраминовых кислот. [33]