Cтраница 1
Линия старта находится на расстоянии 2 5 см от нижнего края бумаги. [1]
Линия старта с нанесенными на нее пробами не должна погружаться в растворитель. [2]
Линию старта отмечают на расстоянии 1 5 см от нижнего края пластинки, а линию фронта растворителей - на 10 см выше линии старта. Это расстояние соответствует оптимальным условиям хроматографирования и позволяет производить разделение веществ в течение короткого времени. Увеличение пробега растворителей ( расстояние от линии старта до линии фронта растворителей) приводит к замедлению перемещения веществ на пластинке и диффузии пятен. Вследствие этого результаты разделения веществ могут оказаться невоспроизводимыми. [3]
![]() |
Шкала стандартов. [4] |
На линии старта также проявляются окрашенные зоны, свидетельствующие об избытке ацетата ртути. Зоны, характерные для стирола, вырезают из бумаги, измельчают и помещают в пробирки, в которые вносят по 3 5 мл очищенного этанола. Содержимое пробирок встряхивают, через 5 и 15 мин элюаты фотометрируют на спектрофотометре в кюветах с толщиной слоя 1 см при длине волны 570 нм. Содержание стирола устанавливают по калибровочному графику. [5]
На линии старта также проявляются окрашенные зоны, свидетельствующие об избытке ацетата ртути. Зоны, характерные для стирола, вырезают из бумаги, измельчают и помещают в пробирки, в которые вносят по 3 5 мл очищенного этилового спирта. Содержимое пробирок встряхивают, через 5 и 15 мин элюаты фотомет-рируют на спектрофотометре в кюветах с толщиной слоя 1 см при длине волны 570 нм. [6]
На линию старта в точки на расстоянии в 1 см от пробы наносят стандартный раствор, содержащий 10 и 20 мкг дилора. Пластину с пробой и стандартами помещают в хроматографическую камеру с н-гексаном, предварительно насыщенную парами н-гексана, на глубину 0 5 см. Хроматографирование заканчивают, когда подвижная фаза поднимется на 10 см. Затем хроматограмму высушивают при комнатной температуре, орошают проявителем для локализации зон пятен и облучают ультрафиолетовым светом 20 - 30 мин до четкого проявления пятен. [7]
На линию старта хроматограммы наносят от 0 001 до 0 1 иг ( максимум) найденного витамина В12 и по истечении одного часа с пластинок снимают полоски. [8]
На линию старта хроматограммы наносят на четные места образцы стандартных растворов ( 1 а смеси аминокислот в 100 мл) в убывающем количестве - 30, 25, 20, 15, 10, 5 ьл, а на нечетные - 5, 10, 15, 20, 25, 30 ц л испытуемого образца соответствующей концентрации. Все нанесенные точки должны быть одинаковой величины. После хроматографирования и проявления пятен отыскивают для каждой аминокислоты три соседних пятна, у которых постепенно увеличивается либо площадь, либо интенсивность окраски. Например, если пятно аланина на хроматограмме, образованное 10 ujz испытуемого образца, подобно пятну 25 и 20 ил стандартного образца, но ближе к 20 цл, можно предположить, что в 10 цл испытуемого образца содержится такое же количество аланина, как и в 22 цл стандартного раствора известной концентрации. [9]
![]() |
Проведение восходящей хроматографии на бумаге. [10] |
А - линия старта; Б - граница фронта растворителя; В-растворитель. [11]
![]() |
Сравнение эффективности разделения при различных способах нанесения. [12] |
Пластинку на линии старта покрывают двумя толстыми стеклянными пластинами так, чтобы образовалась щель шириной 2 мм; с расстояния 1 см над этой щелью производят опрыскивание из пистолета. [13]
Ближайший к линии старта конец бумаги с нанесенными пробами погружают на 20 - 30 мм в подвижную фазу, закрепляют бумагу и, закрыв камеру, дают растворителю медленно распространяться вдоль бумаги. В отдельных случаях, когда значения Rf компонентов смеси резко различаются, хроматографирование можно заканчивать, как только растворитель пройдет 100 - 150мм от линии старта. Затем бумагу вынимают, карандашом отмечают на ней верхнюю границу фронта растворителя и подсушивают. [14]
Остаются на линии старта. [15]