Линия - старт
Cтраница 2
Проба вдоль линии старта наносится на расстоянии не менее 15 мм от боковых краев пластины и 10 мм между пробами. [16]
 |
Проведение восходящей хроматографии на бумаге. [17] |
А - линия старта; Б - граница фронта растворителя; В-растворитель. [18]
Край полоски ниже линии старта погружают в небольшой сосуд с соответствующим растворителем. Жидкость в силу капиллярности перемещается по полоске снизу вверх. Последние передвигаются по бумаге с разными скоростями. При этом разделяемые вещества образуют с реагентом окрашенные пятна. [19]
Допускается пятно на линии старта. [20]
В три точки на линии старта, отмеченные на равном расстоянии друг от друга, наносят по 0 2 мл хлорофор-менных экстрактов. Нанесение проводят с помощью тонкого капилляра. [21]
На хроматографическую бумагу по линии старта наносят по 0 15 мл каждого раствора, подвергают хроматографированию и проводят все операции аналогично пробе. На основании данных оптических плотностей строят калибровочный график. [22]
Вещества наносят микропипеткой на линию старта и пластинку в слегка наклонном положении опускают в сосуд с находящимся на дне растворителем так, чтобы нижний край слоя сорбента погрузился в растворитель. Последний начинает быстро впитываться, продвигаясь к верхней части пластинки. После того как весь сорбент пропитается растворителем, пластинку вынимают и влажную опрыскивают подходящим проявителем из пульверизатора или просматривают в ультрафиолетовом свете. Во многих случаях пятна на пластинке четко обнаруживаются парами иода. При проведении всех операций нужно соблюдать осторожность и не допускать резких движений, нарушающих слой адсорбента. [23]
Растворы веществ наносят на линию старта микропипеткой или микрошприцем так, чтобы расстояние между точками нанесения отдельных проб было не менее 3 см. Если минимально необходимое для проведения хроматографирования количество анализируемого раствора может образовывать на бумаге пятно, превышающее в диаметре 10 мм, нанесение проводят в несколько приемов, предотвращая путем подсушивания чрезмерное растекание пятна на линии старта. В рабочем положении полоса хроматографической бумаги должна висеть вертикально так, чтобы между ее верхним концом, погруженным в лодочку, и линией, старта был лишь один, по возможности плавный, перегиб. По окончании выдержки начинают хроматографирование, для чего в лодочку вливают подвижную фазу. [24]
На хроматографической пластинке отмечают линию старта и на нее наносят 2 капли упаренного спиртового фильтрата. [25]
На хроматографической пластинке отмечают линию старта, на которую наносят эфирный раствор выделенного вещества. [26]
При этом азотистые основания от линии старта располагаются в следующей последовательности: гуанин, - аденин, цитозин, 5-метилцитозин, тимин. Следует отметить, что тимин идет почти вплотную с фронтом растворителя. Предварительную промывку бумаги необходимо вести этим же растворителем в течение 2 - 3 суток. Последующая промывка бумаги водой нежелательна, так как это ведет к разрушению структуры бумаги. [27]
 |
Шкала стандартов. [28] |
Рядом с пробой ( по линии старта) наносят стандартные растворы для построения стандартной хроматографичес-кой шкалы: из каждой пробирки берут по 0 2 мл раствора, наносят на расстоянии 1 5 - 2 0 см друг от друга. [29]
Протамин оставался при этом на линии старта. Большое значение имеет количественный анализ инсулина. Так, например, согласно Робинсону и Феру, протамнн анализируют ретенциошшм методом, а инсулин после элюирования его комплексов с бромкрезоловым зеленым - колориметрическим методом. Результаты не отличаются больше чем на 0 5 единицы. Более точными, однако, являются полярографические методы Вольдана, где и отдельных случаях точность определения составляет 0 2 единицы. [30]
Страницы: 1 2 3 4